Утверждаю
Заместитель
Главного
государственного
санитарного врача
СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
12 декабря 1988 г.
N 4766-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ О-ФЕНИЛЕНДИАМИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий
промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных
веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов
Министерства здравоохранения СССР и других заинтересованных министерств и
ведомств.
Методические
указания разрабатываются и утверждаются с целью обеспечения контроля
соответствия физических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны их
предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам,
утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности
внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости
использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния
вредных веществ на состояние здоровья работающих и др.
Методические
указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88
"ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей
зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к
методикам измерения концентраций вредных веществ" и одобрены Проблемной
комиссией "Научные основы гигиены труда и профессиональной
патологии". Методические указания являются обязательными при осуществлении
вышеуказанного контроля.
// \
──NH
│ ││ 2 М.м.
108,0.
\\ /
──NH
2
Ортофенилендиамин
(ОФДА) - кристаллы светло-желтого цвета без запаха. Т. пл. - 101 - 103 °C.
Упругость насыщенного пара при 20 °C - 0,018 мм рт. ст., при 40 °C - 0,08 мм
рт. ст. Вещество хорошо растворимо в спиртах, эфире, хлороформе, плохо
растворяется в воде.
В воздухе находится
в виде паров и аэрозоля.
ОФДА обладает
специфическим гонадотропным и эмбриотропным действием.
ПДК вещества в
воздухе - 0,5 мг/куб. м.
Характеристика
метода
Метод основан на
хроматографическом выделении о-фенилендиамина в тонком слое сорбента с
последующим проявлением хроматограмм в виде желтых пятен на белом фоне.
Отбор проб
проводится с концентрированием на фильтр и хлороформ.
Нижний предел
измерения вещества в анализируемом объеме пробы - 2 мкг.
Предел измерения
вещества в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе 40 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций в воздухе - от 0,05 до 5,0 мг/куб. м.
Измерению не мешают
п- и м-фенилендиамины.
Суммарная
погрешность измерения не превышает +/- 20%.
Время выполнения
измерения, включая отбор проб, - около 1 часа 40 минут.
Приборы,
аппаратура, посуда
Фотоэлектроколориметр.
Аспирационное
устройство.
Цилиндры мерные,
ГОСТ 1770-74.
Хроматографическая
камера, ГОСТ 2065-78.
Микропипетки для
нанесения проб, ТУ 64-1-862-77.
Колбы круглодонные,
ГОСТ 8613-75.
Склянка для
промывки и очистки газов (склянка Дрекселя), ТУ 25-11-1062-75.
Ротационный
вакуумный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Колбы конические,
ГОСТ 10394-72, вместимостью 100 мл.
Колбы грушевидные
для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.
Воронки химические,
ГОСТ 8613-75, диаметром 6 см.
Пульверизатор
стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Стеклянный фильтр с
пористой пластинкой.
Реактивы,
растворы и материалы
о-Фенилендиамин, ТУ
6-09-08-1127-76, хч.
Хлороформ, ГОСТ
3160-75, хч.
Ацетон, ГОСТ
2603-79, хч.
Пластинки для
тонкослойной хроматографии "Силуфол-254" размером 150 x 150 мм
(ЧССР).
Этиловый спирт,
ГОСТ 5963-67, 95-процентный.
Подвижный
растворитель: ацетон - вода (1:1) по объему.
Стандартный раствор
о-фенилендиамина с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 10 мг
препарата хлороформом в мерной колбе вместимостью 100 мл. Стандартный раствор
может храниться в холодильнике в течение 2-х месяцев.
Фильтры АФА-ВП-20.
Отбор пробы
воздуха
Воздух с объемным
расходом 2 л/мин. аспирируют последовательно через фильтр АФА-ВП-20 и для
поглощения паров через склянку Дрекселя, содержащую 100 мл хлороформа.
Для определения 1/2
ПДК следует отобрать 8 л воздуха. Пробы могут храниться в холодильнике в
течение 2 дней.
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной
пробой помещают в коническую колбу и заливают 30 мл хлороформа. Экстрагируют в
течение 30 минут. Экстракцию повторяют дважды. Экстракт сливают в колбу для
отгонки растворителя. Хлороформ из поглотителя переносят в ту же колбу.
Отгоняют растворитель под вакуумом до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре 40
°C.
Пробу количественно наносят
при помощи капиллярной
пипетки на
хроматографическую
пластинку так, чтобы
диаметр пятна не превышал 1 см.
Расстояние
центра пятна от
нижнего края пластинки
- 1,5 см. Колбу с
экстрактом 2 - 3 раза смывают небольшими порциями
хлороформа, который также
наносят
в центр пятна.
Справа и слева
от пробы наносят стандартные
растворы,
содержащие 2, 4,
8, 16, 32,
64 мкг препарата. Пластинку с
нанесенными растворами помещают в
хроматографическую камеру, в которую за
30 минут до хроматографирования залита смесь ацетон
- вода (1:1) по объему.
После
поднятия фронта подвижного
растворителя на 10 см пластинку вынимают
из
камеры и оставляют
на несколько минут
на воздухе до
испарения
растворителя,
затем переносят в сушильный шкаф и выдерживают в течение 5
минут
при температуре 100 °C.
Исследуемое вещество дает желтую окраску на
белом фоне. Значение R для о-фенилендиамина составляет 0,6.
f
Окрашенную зону
локализации о-фенилендиамина (с помощью соскоба) лопаткой переносят в
стеклянный фильтр N 4 и элюируют 2 мл этилового спирта. Измеряют оптическую
плотность окрашенных растворов на фотоэлектроколориметре со светофильтром N 3
(зеленый) в кювете 2,0 мм против раствора этилового спирта. По данным
фотометрирования строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения
оптических плотностей стандартных растворов, на ось абсцисс - соответствующие
им значения содержания вещества в растворе (в мкг).
Количественное
измерение содержания о-фенилендиамина в анализируемом объеме пробы находят по
градуировочному графику.
Расчет
концентрации
Концентрацию
вещества в воздухе в мг/куб. м (C) вычисляют по формуле:
а x в
C = -----,
б x V
где:
а - количество
о-фенилендиамина, найденное по градуировочному графику в анализируемом объеме
пробы, мкг;
в - общий объем
раствора пробы, мл;
б - объем пробы, взятый для анализа, мл;
V - объем воздуха,
отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л
(см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. проводят по следующей
формуле:
V x (273 + 20) x P
t
20 = -------------------,
(273 + t°) x
101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
P -
барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t° -
температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
Для удобства
расчета 20 следует пользоваться таблицей коэффициентов (Приложение 2). Для
приведения объема воздуха к температуре 20 °C и давлению 760 мм рт. ст. надо
умножить на соответствующий коэффициент.
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТ
K ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ
УСЛОВИЯМ
┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│
°C │
Давление P, кПа/мм рт. ст. │
│
├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬───────┬───────┬───────┬───────┤
│ │97,33/│97,86/│98,4/
│98,93/│99,46/│ 100/
│100,53/│101,06/│101,33/│101,86/│
│ │ 730
│ 734 │ 738 │ 742
│ 746 │ 750 │
754 │ 758
│ 760 │
764 │
├────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼───────┼───────┼───────┼───────┤
│-30
│1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963
│1,2026 │1,2058 │1,2122 │
│-26
│1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1768
│1,1831 │1,1862 │1,1925 │
│-22
│1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581
│1,1643 │1,1673 │1,1735 │
│-18
│1,1036│1,1097│1,1158│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399
│1,1400 │1,1490 │1,1551 │
│-14
│1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224
│1,1284 │1,1313 │1,1373 │
│-10
│1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053
│1,1112 │1,1141 │1,1200 │
│-6
│1,0540│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887
│1,0945 │1,0974 │1,1032 │
│-2
│1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726
│1,0784 │1,0812 │1,0869 │
│0
│1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648
│1,0705 │1,0733 │1,0789 │
│+2
│1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571
│1,0627 │1,0655 │1,0712 │
│+6
│1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419
│1,0475 │1,0502 │1,0557 │
│+10
│0,9944│0,9999│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272
│1,0326 │1,0353 │1,0407 │
│+14
│0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128
│1,0183 │1,0209 │1,0263 │
│+18
│0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989
│1,0043 │1,0069 │1,0122 │
│+20
│0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921
│0,9974 │1,0000 │1,0053 │
│+22
│0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853
│0,9906 │0,9932 │0,9985 │
│+24
│0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787
│0,9839 │0,9865 │0,9917 │
│+26
│0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721
│0,9773 │0,9799 │0,9851 │
│+28
│0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9555│0,9605│0,9657
│0,9708 │0,9734 │0,9785 │
│+30
│0,9288│0,9339│0,9891│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594
│0,9645 │0,9670 │0,9723 │
│+34
│0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468
│0,9519 │0,9544 │0,9595 │
│+38
│0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347
│0,9397 │0,9421 │0,9471 │
└────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴───────┴───────┴───────┴───────┘