Утверждаю
Заместитель
Главного
государственного
санитарного врача
СССР
В.И.ЧИБУРАЕВ
28 сентября 1989 г.
N 5102-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ФЛУОРИМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
4-ХЛОР-N(2-ФУРИЛМЕТИЛ)-5-СУЛЬФАМОИЛАНТРАНИЛОВОЙ
КИСЛОТЫ
(ФУРАСЕМИДА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(выпуск 26) предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и санитарных
лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием
вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также НИИ Министерства
здравоохранения Российской Федерации и других заинтересованных министерств и
ведомств. Методические указания подготовлены в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Воздух рабочей зоны.
Общие санитарно-гигиенические требования" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ.
Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных
веществ", одобрены Проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда
и профпатологии", утверждены МЗ СССР 28.09.1989.
Методические
указания разработаны и утверждены с целью обеспечения
контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их
предельно допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам и
являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.
Методические
указания являются действующими в соответствии с Постановлением Госкомитета
РСФСР санэпиднадзора от 06.02.92 N 1 "О порядке действия на территории
Российской Федерации нормативных актов бывшего Союза ССР в области санэпидблагополучия населения".
O
//
H N-O
S C
2 2 \// \/ \
│ ││ OH
/\\
/\
┌┬─┬┐
Cl N-CH
─────││ ││
│ 2 \ /
H O
Фурасемид - 4-хлор-N(2-фурилметил)-5-сульфамоилантраниловая кислота -
представляет собой кристаллический порошок белого или белого с кремовым
оттенком цвета (Т пл. 204 - 209 °C с разл.).
Практически нерастворим в воде, растворим в 95%
спирте, легко растворим в 1 н растворе едкого натра.
Обладает
общетоксическим действием.
В воздухе находится
в виде аэрозоля.
Рекомендуемая ПДК в воздухе - 0,01 мг/куб. м.
Характеристика
метода
Определение
основано на реакции взаимодействия фурасемида с
солями скандия и последующем флуориметрировании
образовавшегося флуоресцирующего соединения при длине возбуждающего света 355 нм и регистрации излучения флуоресценции при 420 нм.
Отбор проб с
концентрированием на фильтр.
Нижний предел
измерения в анализируемом растворе 0,5 мкг.
Нижний предел
измерения в воздухе 0,005 мг/куб. м (при отборе 200 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций от 0,005 до 0,045 мг/куб. м.
Метод специфичен в
условиях производства на стадиях сушки, просеивания и фасовки.
Суммарная
погрешность не превышает +/- 20%.
Приборы,
аппаратура, посуда
Аспирационное
устройство.
Фильтродержатели.
Пипетки мерные на
1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74Е.
Колбы мерные
вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
Пробирки с
притертыми пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 10515-73.
Флуориметр с первичным светофильтром с областью пропускания от 320 до 370 нм и вторичным с областью пропускания от 410 до 440 нм.
Реактивы,
растворы и материалы
Фурасемид фармакопейный.
Стандартный раствор
N 1, содержащий 100 мкг/мл фурасемида, готовят
растворением 0,01 г фурасемида в этиловом спирте в
мерной колбе вместимостью 100 мл. Срок хранения раствора в холодильнике при
температуре 4 °C - 15 дней.
Стандартный раствор
N 2 с содержанием 0,5 мкг/мл готовят соответствующим разведением
дистиллированной водой стандартного раствора N 1. Для этого в мерную колбу
вместимостью 100 мл прибавляют 0,5 мл раствора N 1 и доводят объем до метки
дистиллированной водой.
Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.
Этиловый спирт,
ректификат, ГОСТ 5963-67.
Скандия хлорид, ч, ТУ 6-09-04-74-74.
Фильтры АФА-ВП-10.
Отбор пробы
воздуха
Воздух со скоростью
20 л/мин. аспирируют через фильтр, помещенный в фильтродержатель. Для определения 1/2 ПДК следует отобрать
200 л воздуха.
Подготовка
к измерению
Градуировочные растворы готовят согласно таблице.
┌─────────┬───────────────┬────────────────┬────────────────────────┐
│ Номер
│ Стандартный │Дистиллированная│Содержание
фурасемида в │
│стандарта│раствор N 2, мл│ вода, мл │градуировочном
р-ре, мкг│
├─────────┼───────────────┼────────────────┼────────────────────────┤
│
1 │ 0
│ 9 │ 0 │
│ 2
│ 1 │ 8
│ 0,5 │
│ 3
│ 2 │ 7
│ 1 │
│ 4
│ 4 │ 5
│ 2 │
│ 5
│ 6 │ 3
│ 3 │
│ 6
│ 8 │ 1
│ 4
│
│ 7
│ 9 │ 0
│ 4,5 │
└─────────┴───────────────┴────────────────┴────────────────────────┘
Во все пробирки
шкалы приливают по 1 мл 2-процентного раствора хлорида скандия и измеряют
интенсивность флуоресценции полученных растворов на флуориметре
с возбуждением флуоресценции в области 365 нм и
излучением флуоресценции 440 нм по отношению к
раствору сравнения, не содержащему фурасемид (раствор
N 1 по таблице). Строят градуировочный график: на ось
ординат наносят значения интенсивности флуоресценции градуировочных
растворов (%), на ось абсцисс - соответствующие им
величины содержания фурасемида в растворах (мкг).
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в пробирку, прибавляют 4 мл этанола и оставляют на 5 минут,
периодически встряхивая для лучшего растворения вещества. Коэффициент десорбции
фурасемида составляет 0,94. К 2 мл раствора
прибавляют 7 мл дистиллированной воды, 1 мл 2% водного раствора хлорида
скандия, перемешивают и флуориметрируют относительно
стандартных растворов. Интенсивность флуоресценции полученного анализируемого
раствора пробы измеряют аналогично градуировочным
растворам по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично
пробе.
Количественное
определение фурасемида (мкг) в анализируемой пробе
проводят по предварительно построенному градуировочному
графику.
Расчет
концентрации
Содержание фурасемида (мг/куб. м) в воздухе вычисляют по формуле:
а x в
C = ------------,
V x б x 0,94
где:
а - содержание фурасемида в анализируемом растворе пробы, мкг;
в - общий объем
раствора пробы, мл;
б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;
0,94 - степень
десорбции;
V - объем воздуха, л, взятый для анализа и приведенный к стандартным условиям
(см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к стандартным условиям (температура 20 °C и давление 760 мм рт. ст.)
проводят по следующей формуле:
V x (273 + 20) x p
t
V = -------------------,
ст (273 +
t°) x 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
ст
p -
барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t° -
температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
Для удобства
расчета V следует пользоваться
таблицей коэффициентов
ст
(см.
Приложение 2). Для
этого надо умножить
V на соответствующий
t
коэффициент.
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТ
K ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ
УСЛОВИЯМ
┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│
T, │
Давление P, кПа/мм рт. ст. │
│
°C
├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬───────┬───────┬───────┬───────┤
│ │97,33/│97,86/│98,4/
│98,93/│99,46/│ 100/
│100,53/│101,06/│101,33/│101,86/│
│ │ 730
│ 734 │ 738 │ 742
│ 746 │ 750 │
754 │ 758
│ 760 │
764 │
├────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼───────┼───────┼───────┼───────┤
│-30
│1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963
│1,2026 │1,2058 │1,2122 │
│-26
│1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1768
│1,1831 │1,1862 │1,1925 │
│-22
│1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581
│1,1643 │1,1673 │1,1735 │
│-18
│1,1036│1,1097│1,1158│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399
│1,1400 │1,1490 │1,1551 │
│-14
│1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224
│1,1284 │1,1313 │1,1373 │
│-10
│1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053
│1,1112 │1,1141 │1,1200 │
│-6
│1,0540│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887
│1,0945 │1,0974 │1,1032 │
│-2
│1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726
│1,0784 │1,0812 │1,0869 │
│0
│1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648
│1,0705 │1,0733 │1,0789 │
│+2
│1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571
│1,0627 │1,0655 │1,0712 │
│+6
│1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419
│1,0475 │1,0502 │1,0557 │
│+10
│0,9944│0,9999│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272
│1,0326 │1,0353 │1,0407 │
│+14
│0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128
│1,0183 │1,0209 │1,0263 │
│+18
│0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989
│1,0043 │1,0069 │1,0122 │
│+20
│0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921
│0,9974 │1,0000 │1,0053 │
│+22
│0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853
│0,9906 │0,9932 │0,9985 │
│+24
│0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787
│0,9839 │0,9865 │0,9917 │
│+26
│0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721
│0,9773 │0,9799 │0,9851 │
│+28
│0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9565│0,9605│0,9657
│0,9708 │0,9734 │0,9785 │
│+30
│0,9288│0,9339│0,9891│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594
│0,9645 │0,9670 │0,9723 │
│+34
│0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468
│0,9519 │0,9544 │0,9595 │
│+38
│0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347
│0,9397 │0,9421 │0,9471 │
└────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴───────┴───────┴───────┴───────┘