Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации,
Первый заместитель
Министра
здравоохранения
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
16 марта 2003 года
Дата введения -
1 июля 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТРАЛКОКСИДИМА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1231-03
1. Сборник
подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф.
Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской
сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим.
н. А.В. Довгилевич) при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России
(А.П. Веселов). Разработчики методик контроля указаны в конце каждой из
них.
2. Методические
указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при
Минздраве России.
3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным
врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения
Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 г.
4. Введены впервые.
1. Вводная
часть
Фирма-производитель:
Зенека (Великобритания).
Торговое название:
Грасп 80% ВДГ.
Действующее
вещество: тралкоксидим [2-1(этоксиимино)пропил]-3-гидрокси-5-мезитилциклогекс-2-енон
(номенклатура ИЮПАК).
Структурная
формула: (не приводится).
Эмпирическая формула: C H NO .
20 27 3
Молекулярная масса: 329.
Белый
порошок без запаха.
Температура плавления: 106 °С.
-7
Давление
паров (20 °С): 4 х 10 Па.
Коэффициент распределения н-октанол/вода (20 °С): 2,1.
Растворимость в воде (22 °С): 6 мг/л
(рН 5,2)
7 мг/л (рН 6,5)
8850 мг/л (рН
9,0).
Растворимость в органических растворителях при 24 °С
(г/л):
метанол 25
ацетон 89
хлористый метилен > 500
толуол 213
гексан 18
Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.
Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная
токсичность
для крыс LD = 934 - 1324 мг/кг; острая дермальная
50
токсичность
для крыс LD
> 2000 мг/кг; острая ингаляционная
50
токсичность для крыс LC = 3,5 мг/л воздуха.
50
ОБУВ в воздухе
рабочей зоны - 0,4 мг/куб. м.
Область применения
препарата. Послевсходовый селективный системный гербицид для борьбы с сорняками
в посевах пшеницы и ячменя.
2. Методика
измерения концентраций тралкоксидима
в воздухе рабочей
зоны методом высокоэффективной
жидкостной
хроматографии
2.1.
Основные положения
2.1.1. Принцип
методики
Методика основана
на определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии
(ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.
Отбор проб воздуха
осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя
лента". Идентификация тралкоксидима проводится по времени удерживания,
количественное определение - методом абсолютной калибровки.
2.1.2.
Избирательность метода
В предлагаемых
условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, в том
числе смачивателя TF 8035, а также пестицидов, применяемых на зерновых
культурах.
2.1.3.
Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)
Число
параллельных определений 6
Предел
обнаружения в хроматографируемом
объеме 5 нг
Предел
обнаружения в воздухе при отборе
20
куб. дм воздуха
0,005 мг/куб. м
Диапазон
определяемых концентраций 0,005
- 0,1 мг/куб. м
Среднее
значение определения
94,77%
Стандартное
отклонение (S) 11,10%
Относительное
стандартное отклонение (DS) 4,82%
Доверительный
интервал среднего 12,39%
Суммарная
погрешность измерения не
превышает 24%
2.2.
Реактивы, растворы и материалы
Тралкоксидим,
аналитический стандарт
с
содержанием д.в. 99,4%, (Зенека)
Ацетон,
ч.д.а.
ГОСТ 2603-79
Ацетонитрил
для жидкостной хроматографии ТУ
6-09-4326-76
Вода
бидистиллированная <*>
или
деионизованная
Хлороформ,
х.ч. ТУ
6-09-4263-76
Фильтры
бумажные "синяя лента",
предварительно
промытые ацетоном,
затем
хлороформом
ТУ 6-09-26-78
--------------------------------
<*>
Бидистиллят кипятят в течение 6 часов с перманганатом калия, добавленным из
расчета 1 г/л, и затем перегоняют.
2.3.
Приборы, аппаратура, посуда
Высокоэффективный
жидкостный
хроматограф фирмы Beckman (насос 114 м,
ультрафиолетовый
детектор 166)
или
аналогичный
Хроматографическая
колонка стальная,
длиной
15 см, внутренним диаметром 4 мм,
содержащая Диасорб-130 Амин, 7 мкм (АО
БиоХимМак,
117899, Москва, Воробьевы
горы,
МГУ)
Шприц
хроматографический фирмы
Hamilton
на 100 мкл или аналогичный
Аспирационное
устройство типа ЭА-1 ТУ
25-11-1414-78
или
аналогичное
Барометр ТУ
2504-1797-75
Вакуумный
роторный испаритель ИР-1М ТУ
25-11-917-76
или
аналогичный
Весы
аналитические типа ВЛР-200
ГОСТ 19401-74
Водоструйный
насос ГОСТ
10696-75
Встряхиватель
механический ТУ 64-1-1081-73
Термометр
лабораторный, цена деления
1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С ГОСТ 215-73Е
Воронки
химические конусные диаметром
34
- 40 мм
ГОСТ 25336-82Е
Колбы
мерные на 50, 100 и 1000 мл
ГОСТ 1770-74
Колбы
круглодонные со шлифом на 100 мл
ГОСТ 9737-70
Пипетки
на 1, 2, 5 и 10 мл
ГОСТ 20292-74
Пробирки
центрифужные на 10 мл ГОСТ
25336-82Е
Стаканы
химические на 100 мл
ГОСТ 25336-82Е
Цилиндры
мерные на 10 и 200 мл ГОСТ
1770-74
Груша
резиновая
Фильтродержатели
Стеклянные
палочки
2.4. Отбор
проб
Отбор проб воздуха
рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху
рабочей зоны".
Воздух со скоростью
5 л/мин. пропускают через фильтр "синяя лента", помещенный в
фильтродержатель.
Для измерения
концентрации вещества на уровне 0,005 мг/куб. м следует отобрать 20 л воздуха.
Фильтры с
отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно
хранить в морозильной камере при температуре -12 °С в
течение 30 дней, в холодильнике при 4 - 6 °С - в течение 5 дней.
2.5.
Подготовка к определению
2.5.1. Очистка
растворителей
Органические
растворители перед началом работы очищают, сушат и перегоняют в соответствии с
типовыми методиками. Ацетонитрил сушат над пентоксидом фосфора и перегоняют,
отогнанный растворитель повторно перегоняют над углекислым калием. Ацетон
очищают перегонкой.
2.5.2. Подготовка
подвижной фазы
Для ВЭЖХ анализа
тралкоксидима используют подвижную фазу, содержащую 80% ацетонитрила и 20% воды
(по объему). Перед анализом фазу дегазируют, пропуская через нее газообразный
гелий со скоростью 20 л/мин. в течение 5 мин. или помещая сосуд с фазой в
ультразвуковую ванну на 1 мин.
2.5.3.
Кондиционирование колонки
Промыть колонку для
ВЭЖХ подвижной фазой ацетонитрил - вода (80:20, по объему) при скорости подачи
растворителя 1 мл/мин. в течение 30 - 45 мин. до получения стабильной базовой
линии.
2.5.4.
Приготовление стандартных растворов
Взвешивают 100 мг
тралкоксидима и растворяют его в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл, получая
стандартный раствор N 1 с концентрацией 1 мг/мл. Берут 1 мл этого раствора в
мерную колбу на 100 мл и доводят до метки ацетонитрилом, получая стандартный
раствор N 2 с концентрацией 10 мкг/мл. Стандартные растворы N 1 и 2 можно
хранить в холодильнике в течение 3-х месяцев.
Рабочие стандартные
растворы тралкоксидима концентрацией 1,0; 0,5; 0,25; 0,1; 0,05 мкг/мл готовят
из стандартного раствора N 2 методом последовательного разведения подвижной
фазой для ВЭЖХ. Данные стандартные растворы можно использовать в течение 7 дней
при хранении в холодильнике.
2.5.5. Построение
калибровочного графика
Для построения
калибровочного графика вводят в инжектор хроматографа последовательно 5 раз по
100 мкл каждого рабочего стандартного раствора, измеряют высоты или площади
пиков, рассчитывают их средние значения для каждой концентрации и строят график
зависимости высоты или площади пика от концентрации тралкоксидима.
2.6.
Описание определения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл
хлороформа, помещают на встряхиватель на 7 - 10 мин. Растворитель сливают,
отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми
порциями хлороформа объемом 10 мл.
Объединенный
экстракт упаривают в круглодонной колбе на вакуумном роторном испарителе при 40 °С до объема примерно 1 мл, остаток раствора высушивают
током азота. Сухой остаток растворяют в 2 мл подвижной фазы для ВЭЖХ, фильтруют
и анализируют на содержание тралкоксидима по п. 2.7.
2.7.
Условия хроматографирования
Высокоэффективный
жидкостный
хроматограф фирмы Beckman (насос
114 м, ультрафиолетовый детектор 166)
Хроматографическая
колонка стальная,
длиной
15 см, внутренним диаметром 4 мм,
содержащая Диасорб-130 Амин, 7 мкм
Объем
вводимой пробы
100 мкл
Подвижная
фаза
ацетонитрил - вода
= 80:20 (по объему)
Скорость
потока элюента 0,8
мл/мин.
Длина
волны
280 нм
Чувствительность
УФ-детектора 0,01 AUFS
Температура
колонки
комнатная
Время
выхода тралкоксидима
7,5 - 8,5 мин.
Линейный
диапазон детектирования 5 -
100 нг
Образцы,
дающие пики большие, чем
стандартный
раствор с концентрацией
1,0
мкг/мл, разбавляют подвижной
фазой
для ВЭЖХ.
Альтернативная
неподвижная фаза:
Хроматографическая
колонка стальная
(15
х 4 мм), заполненная
Диасорбом
130-С8Т (7 мкм)
Условия
хроматографирования те же
Время
выхода тралкоксидима
около 7 мин.
2.8.
Обработка результатов анализа
Концентрацию
тралкоксидима рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
W
Х = С --,
V
где:
Х - концентрация
тралкоксидима в пробе воздуха, мг/куб. м;
С - концентрация тралкоксидима в
хроматографируемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
W - объем
экстракта, подготовленного для хроматографирования, мл;
V - объем пробы
воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление
760 мм рт. ст., температура 20 °С), куб. дм.
3.
Требования техники безопасности
Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.
4. Контроль
погрешности измерений
Оперативный
контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в
соответствии с рекомендациями МИ 2335-95 "ГСИ. Внутренний контроль
качества результатов количественного химического анализа".
5.
Разработчики
Калинин
В.А., проф., к. с.-х. н., Калинина Т.С. с.н.с., к. с.-х. н., Довгилевич Е.В.,
с.н.с., канд. б. н., Довгилевич А.В., с.н.с., к. хим. н. Московская
сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. 127550, Москва,
Тимирязевская ул., д. 53/1, УНКЦ "Агроэкология пестицидов и агрохимикатов". Телефон/факс: 976-43-26.