Утверждаю
Руководитель Федеральной
службы по надзору в
сфере
защиты прав
потребителей
и благополучия
человека,
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
4 декабря 2006 года
Дата введения:
1 марта 2007 года
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЦИМОКСАНИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ, СМЫВАХ С КОЖНЫХ ПОКРОВОВ ОПЕРАТОРОВ И АТМОСФЕРНОМ
ВОЗДУХЕ НАСЕЛЕННЫХ МЕСТ МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОЙ
ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.2150-06
1. Подготовлены
Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана при участии специалистов
Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия
человека.
2. Рекомендованы к
утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемическому нормированию
при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и
благополучия человека.
3. Утверждены
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым
заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН
Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
Настоящие
Методические указания устанавливают метод капиллярной газожидкостной
хроматографии для измерения массовой концентрации цимоксанила
в воздухе рабочей зоны, смывах с кожных покровов операторов и атмосферном
воздухе в диапазонах 0,1 - 1,0 мг/куб. м; 0,5 - 5 мкг/смыв; 0,0024 - 0,024
мг/куб. м.
Цимоксанил - действующее вещество препарата ОРДАН, СП (689 г/кг хлорокиси меди + 42 г/кг цимоксанила),
производитель ЗАО Фирма "Август".
1-(2-циано-2-метоксииминоацетил)-3-этилмочевина
(IUPAC).
CN
|
CH CH NHCONHCOC=NOCH
3 2 3
C H N O .
7 10 4 3
Мол. масса 198,2.
Бесцветное
кристаллическое вещество без запаха. Плотность 1,31 (при 25 °С). Температура
плавления 160 - 161 °С. Давление паров при 20 °С: 0,15 мПа. Хорошо растворим в
большинстве органических растворителей - бензоле, толуоле, хлороформе, дихлорметане. Слабо растворим в петролейном эфире. Растворимость в органических
растворителях: ацетон - 62,4; ацетонитрил - 57;
хлористый метилен - 133; метанол - 22,9; гексан -
1,85; толуол - 5,29 г/куб. дм (при 20 °С).
Растворимость в воде - 890 мг/куб. дм.
В почве цимоксанил быстро разрушается под воздействием
микроорганизмов. В тепличных условиях период полураспада составляет около трех
дней, в полевых условиях от 7 до 14 дней. Миграция по почвенному профилю
слабая.
Краткая
токсикологическая характеристика:
Острая пероральная токсичность
(LD ) для
крыс - 960 мг/кг; острая
50
дермальная токсичность
(LD ) для
крыс - >
2000 мг/кг; острая
50
ингаляционная токсичность для крыс 5060 мг/куб. м (4
часа).
Область применения
препарата
Цимоксанил - контактный фунгицид с местным системным эффектом, обладающий
защитным и лечебным действием против болезней, вызываемых споровыми грибами.
ОБУВ в воздухе
рабочей зоны - 1 мг/куб. м; ОБУВ в атмосферном воздухе населенных мест - 0,003
мг/куб. м.
1.
Погрешность измерений
Методика
обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей +/- 25%, при
доверительной вероятности 0,95.
2. Метод
измерений
Измерения
концентраций цимоксанила выполняют методом
капиллярной газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором (ТИД).
Концентрирование
цимоксанила при исследовании воздуха рабочей зоны
осуществляют на фильтр "синяя лента", атмосферного воздуха - на
последовательно соединенные фильтр "синяя лента" и фильтр из пенополиуретана, экстракцию с фильтров проводят ацетоном.
Смыв с кожных
покровов проводят этиловым спиртом.
Нижний предел
измерения в анализируемом объеме пробы - 0,5 нг.
Средняя полнота извлечения с фильтров - 91,0%, с поверхности кожи - 90,4%.
Определению не
мешают компоненты препаративной формы.
3. Средства
измерений, вспомогательные
устройства,
реактивы и материалы
3.1.
Средства измерений
Газовый
хроматограф "Кристалл-2000М", Номер Госреестра
14516-95
снабженный термоионным детектором с пределом
детектирования
по азоту в азобензоле
-13
5
х 10 г/с,
предназначенный для
работы
с капиллярной колонкой
Весы
аналитические ВЛА-200
ГОСТ 24104
Меры
массы
ГОСТ 7328
Микрошприц типа МШ-1М вместимостью ТУ 2.833.105
1
куб. мм
Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ Номер Госреестра
18860-05
(ЗАО
"ОПТЭК", г. Санкт-Петербург)
Барометр-анероид
М-67 ТУ
2504-1797-75
Термометр
лабораторный шкальный ТЛ-2, цена
ТУ 215-73Е
деления
1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С
Колбы
мерные вместимостью 100 куб. см
ГОСТ 1770
Пипетки градуированные 2-го класса точности ГОСТ 29227
вместимостью
1,0; 2,0; 5,0; 10 куб. см
Цилиндры
мерные с пришлифованной пробкой
ГОСТ 1770
вместимостью
50 куб. см
Допускается
использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2.
Реактивы
Цимоксанил, аналитический стандарт ГСО 7658-99
с
содержанием действующего вещества 99,4%
(НИИХСЗР,
НПК "Блок-1")
Азот
особой чистоты из баллона
ГОСТ 9293
Ацетон,
осч ГОСТ
2306
Вода дистиллированная ГОСТ 6790
Натрий
углекислый, хч ГОСТ 83
Спирт
этиловый ректификованный
ГОСТ Р 51652 или
ГОСТ 18300
Допускается
использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой
квалификацией.
3.3.
Вспомогательные устройства, материалы
Аппарат
для встряхивания типа АВУ-6с
ТУ 64-1-2851-78
Баня
водяная
Бумажные
фильтры "синяя лента" ТУ 6-09-2678-77
обеззоленные
Бязь
хлопчатобумажная белая
Воронка
Бюхнера ГОСТ 9147
Воронки
конусные диаметром 40 - 45 мм
ГОСТ 25336
Генератор
водорода
Груша
резиновая
Колба
Бунзена
ГОСТ 25336
Колбы
грушевидные на шлифе вместимостью ГОСТ 9737
150
куб. см
Компрессор
Насос
водоструйный
ГОСТ 25336
Пенополиуретан ППУ ПЕНОР-301 ТУ 2254-018-329-57768-2002
Пинцет
Стаканы
химические с носиком вместимостью
ГОСТ 25336
150
куб. см
Стекловата
Стеклянные
емкости вместимостью 100 куб. см
с
герметичной металлической крышкой
Стеклянные
палочки
Ректификационная
колонна с числом
теоретических
тарелок не менее 50
Ротационный
вакуумный испаритель В-169
фирмы
Buchi, Швейцария
Установка
для перегонки растворителей
Хроматографическая колонка капиллярная
ZB-5
длиной 15 м, внутренним диаметром
0,53
мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм
Хроматографическая колонка капиллярная
ZB-50
длиной 30 м, внутренним диаметром
0,32
мм, толщина пленки сорбента 0,5 мкм
Допускается
применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими
характеристиками.
4.
Требования безопасности
4.1. При выполнении
измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими
реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования по электробезопасности при работе с
электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в
технической документации на газовый хроматограф.
4.2. Помещение
должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь
средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе
не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 <...> "проб
к анализу проводят при температуре воздуха (20 +/- 5) °С и относительной
влажности не более 80%.
5.
Требования к квалификации операторов
К выполнению
измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже
лаборанта-исследователя, с опытом работы на газовом хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией
"лаборант", имеющего опыт работы в химической лаборатории.
6. Условия
измерений
При выполнении
измерений соблюдают следующие условия:
- процессы
приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре
воздуха (20 +/- 5) °С и относительной влажности не более 80%;
- выполнение
измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных
технической документацией к прибору.
7.
Подготовка к выполнению измерений
Выполнению
измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетона (при необходимости),
приготовление градуировочных растворов, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и
салфеток для отбора проб, отбор проб.
7.1.
Очистка ацетона
Ацетон перегоняют над
небольшим количеством KMnO и
прокаленным
4
карбонатом
калия или подвергают
ректификационной перегонке на колонне с
числом теоретических тарелок не менее 50.
7.2.
Приготовление градуировочных растворов
и растворов
внесения
7.2.1.
Исходный раствор цимоксанила для градуировки
(концентрация 1 мг/куб. см)
В мерную колбу
вместимостью 100 куб. см помещают 0,1 г цимоксанила,
растворяют в 40 - 50 куб. см ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно
перемешивают.
Раствор хранят в
холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение
месяца.
7.2.2.
Раствор N 1 цимоксанила для градуировки (концентрация
50 мкг/куб. см)
В мерную колбу
вместимостью 100 куб. см помещают 5 куб. см исходного раствора цимоксанила с концентрацией 1 мг/куб. см (п. 7.2.1),
разбавляют ацетоном до метки.
Градуировочный раствор N 1 хранят в холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение месяца.
7.2.3. Рабочие
растворы N 2 - 5 цимоксанила для градуировки и
внесения (концентрация 0,25 - 2,5 мкг/куб. см)
В 4 мерные
колбы вместимостью 100 куб. см помещают по 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 куб. см градуировочного раствора N 1 цимоксанила
с концентрацией 50 мкг/куб. см (п. 7.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно
перемешивают, получают рабочие растворы N 2 - 5 с концентрацией цимоксанила 0,25; 0,5; 1,25 и 2,5 мкг/куб. см,
соответственно.
Растворы хранят в
холодильнике при температуре 4 - 6 °С в течение 10-ти
дней.
Эти растворы цимоксанила используют для приготовления проб с внесением
при оценке полноты извлечения действующего вещества методом
"внесено-найдено".
7.3.
Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мВ х сек.) от
концентрации цимоксанила в растворе (мкг/куб. см),
устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки.
В испаритель
хроматографа вводят по 2 куб. мм каждого градуировочного
раствора и анализируют в условиях хроматографирования
по п. 7.3.1. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают
площадь пика действующего вещества.
Градуировочный график проверяют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов. Если значения площадей отличаются
более чем на 15% от данных, заложенных в градуировочную
характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие
растворы для градуировки.
7.3.1.
Условия хроматографирования
Измерения выполняют
при следующих режимных параметрах:
Газовый хроматограф
"Кристалл-2000М", снабженный термоионным детектором.
7.3.1.1. Колонка
капиллярная ZB-5 длиной 15 м, внутренним диаметром 0,53 мм, толщина пленки
сорбента 0,5 мкм.
Температура детектора: 310 °С
испарителя: 260 °С.
Температура
термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °С, выдержка 30 сек., нагрев колонки со скоростью 10
градусов в минуту до температуры 160 °С, выдержка - 3 мин., нагрев колонки со
скоростью 25 градусов в минуту до температуры 250 °С, выдержка - 3 мин.
Скорость газа 1
(азот): 40 см/сек., давление 17,235 кПа, поток 5,554 куб. см/мин.
Газ 2: деление
потока 1:1,8; сброс 10 куб. см/мин.
Скорость воздуха
200 куб. см/мин.; водорода 14 куб. см/мин.
Хроматографируемый объем: 2 куб. мм
Ориентировочное
время выхода цимоксанила: 3 мин. 29 сек.
7.3.1.2. Колонка
капиллярная ZB-50 длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина пленки
сорбента 0,5 мкм
Температура детектора: 310 °С
испарителя: 250 °С.
Температура
термостата колонки программированная. Начальная температура - 170 °С, выдержка 7 мин., нагрев колонки со скоростью 35
градусов в минуту до температуры 240 °С.
Скорость газа 1
(азот): 31,1 см/сек., давление 70 кПа, поток 1,4 куб. см/мин.
Газ 2: деление
потока 1:3,6; сброс 5,0 куб. см/мин.
Скорость водорода
12,5 куб. см/мин., воздуха - 200 куб. см/мин.
Хроматографируемый объем: 2 куб. мм.
Ориентировочное
время выхода цимоксанила: 6 мин.
Линейный диапазон
детектирования: 0,5 - 5 нг.
7.4.
Подготовка фильтров для отбора проб воздуха
Из пенополиуретана вырезают фильтр толщиной 2 - 2,5 мм,
диаметром 48 - 50 мм, соответствующим внутреннему диаметру фильтродержателя.
Диаметр бумажного фильтра "синяя лента" также должен соответствовать
внутреннему диаметру фильтродержателя.
Фильтры из пенополиуретана и бумаги последовательно по 3 раза
промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетоном
порциями 25 - 30 куб. см, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным
насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры
хранят в герметично закрытой стеклянной таре.
7.5.
Подготовка салфеток для проведения смыва
Вырезают салфетки
(лоскуты) из белой бязи размером 10 х 10 см, затем их последовательно
обрабатывают 5%-ным раствором углекислого натрия (при
кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают
этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования
салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.
8. Отбор и
хранение проб воздуха
8.1. Воздух
рабочей зоны
Отбор проб проводят
в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 "ССБТ. Общие
санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны". Воздух с
объемным расходом 2 - 5 куб. дм/мин. аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента",
помещенный в фильтродержатель.
Для измерения
концентрации цимоксанила на уровне 0,5 ОБУВ для
воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 5 куб. дм
воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в
холодильнике при температуре +4 - 6 °С - 10 дней.
8.2.
Атмосферный воздух
Отбор проб проводят
в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02-81 "ОПА. Общие требования к
методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест".
Воздух с объемным расходом 5 куб. дм/мин. аспирируют через пробоотборную
систему - последовательно соединенные бумажный фильтр "синяя лента" и
фильтр из пенополиуретана, помещенные в фильтродержатель.
Для измерения
концентрации цимоксанила на уровне 0,8 ОБУВ для
атмосферного воздуха необходимо отобрать 105 куб. дм
воздуха. Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в
холодильнике при температуре +4 - 6 °С - 10 дней.
9. Условия
проведения смыва
Смывы проводят в
конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых
спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, спина, грудь,
предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).
До работы выбирают
участок кожи, обрабатывают его с целью удаления загрязнений, фиксируют площадь
(не менее 200 кв. см). При необходимости отбирают фоновые смывы.
Смыв проводят
способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 куб.
см в стеклянную емкость с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной
растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают кожный покров сверху
вниз. Операцию повторяют дважды.
Срок хранения
отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в
холодильнике при температуре +4 - 6 °С - 10 дней.
10.
Выполнение измерений
10.1.
Воздушная среда
Экспонированные
фильтры ("синяя лента" - при исследовании воздуха рабочей зоны;
"синяя лента" + "пенополиуретан"
- при исследовании атмосферного воздуха) переносят в химический стакан
вместимостью 150 куб. см, заливают 30 куб. см ацетона, помещают на встряхиватель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтры
еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 20 куб. см, выдерживая
на встряхивателе по 5 минут.
Объединенный
экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при
температуре бани не выше 40 °С почти досуха,
оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в
10 куб. см (исследование воздуха рабочей зоны) или 1 куб. см (исследование
атмосферного воздуха) ацетона и анализируют при условиях хроматографирования,
указанных в п. 7.3.1.
10.2. Смывы
с кожных покровов
Пробу смыва сливают
(через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку,
помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для
упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по
10 куб. см, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой
находилась проба.
Объединенный
раствор упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при
температуре бани не выше 40 °С почти досуха,
оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в
2 куб. см ацетона и анализируют при условиях хроматографирования,
указанных в п. 7.3.1.
Пробу вводят в
испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика
действующего вещества, с помощью градуировочного
графика определяют концентрацию цимоксанила в хроматографируемом растворе.
Образцы, дающие
пики большие, чем градуировочный раствор с
концентрацией 2,5 мкг/куб. см, разбавляют ацетоном (не более чем в 50 раз).
Перед анализом
опытных образцов проводят хроматографирование
холостых (контрольных) проб - экстрактов неэкспонированных фильтров и салфетки.
11.
Обработка результатов анализа
11.1.
Воздушная среда
Массовую
концентрацию цимоксанила в пробе воздуха X, мг/куб.
м, рассчитывают по формуле:
X = C х W / V ,
t
где:
C -
концентрация цимоксанила в хроматографируемом
растворе, найденная
по градуировочному
графику в соответствии с
величиной площади
хроматографического пика,
мкг/куб. см;
W - объем
экстракта, подготовленного для хроматографирования,
куб. см;
V -
объем пробы воздуха,
отобранный для анализа,
приведенный к
t
стандартным
(давление 760 мм рт. ст.,
температура 20 °С) при исследовании
воздуха рабочей
зоны или нормальным
условиям (давление 760 мм рт. ст.,
температура 0 °С) при исследовании атмосферного
воздуха, куб. дм:
V = R х P х u t / (273 + T),
t
где:
T - температура
воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), град. С;
P - атмосферное
давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
u - расход воздуха
при отборе пробы, куб. дм/мин.;
t - длительность
отбора пробы, мин.;
R - коэффициент,
равный 0,386 для воздуха рабочей зоны и 0,357 для атмосферного воздуха.
_
За результат
анализа (X) принимается
среднее арифметическое
_
результатов
двух параллельных определений
X и X (X = (X
+ X ) / 2),
1 2 1
2
расхождение между
которыми не превышает значений норматива оперативного
контроля сходимости (d):
|X - X | <= d.
1 2
_
d = d х X / 100, мг/куб. м,
отн.
где:
d -
норматив оперативного контроля сходимости, мг/куб. м;
d - норматив оперативного контроля
сходимости, % (равен 18%).
отн.
11.2. Смывы
с кожных покровов
Массовую
концентрацию цимоксанила в пробе смыва X, мкг/смыв,
рассчитывают по формуле:
X = C х W,
где:
C - концентрация цимоксанила в хроматографируемом
растворе, найденная по градуировочному графику в
соответствии с величиной площади хроматографического
пика, мкг/куб. см;
W - объем
экстракта, подготовленного для хроматографирования,
куб. см.
Примечание:
Идентификация и расчет концентрации металаксила в
пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую
систему.
12.
Оформление результатов измерений
Результат
количественного анализа представляют в виде:
_
- результат анализа
X в мг/куб. м или мкг/смыв (с
указанием площади
смыва в кв. см), характеристика погрешности дельта, %
(+/- 25%), Р = 0,95
_
или X +/- ДЕЛЬТА, мг/куб. м (мкг/смыв,
площадь смыва, кв. см), Р = 0,95,
где ДЕЛЬТА - абсолютная погрешность:
_
дельта х X
ДЕЛЬТА = ----------, мг/куб. м (мкг/смыв).
100
Результат измерений
должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.
Если содержание
вещества менее нижней границы диапазона определяемых
концентраций, результат анализа представляют в виде:
"содержание цимоксанила в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,1
мг/куб. м; атмосферного воздуха - менее 0,0024 мг/куб. м; смыва - менее 0,5
мкг/смыв" <*>.
--------------------------------
<*>
0,1 мг/куб. м; 0,0024 мг/куб. м; 0,5 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе
25 куб. дм воздуха рабочей зоны; 105 куб. дм атмосферного воздуха, в пробе смыва (фиксированная
площадь смыва, кв. см) соответственно.
13.
Контроль погрешности измерений
Оперативный
контроль погрешности и воспроизводимости измерений
осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6.2002 "Точность
(правильность и прецизионность) методов и результатов
измерений".
14.
Разработчики
ФГУН
"Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана Роспотребнадзора".