Утверждаю
Заместитель
Главного
государственного
санитарного врача
СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
12 декабря 1988 г.
N 4873-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ СТРОФАНТИДИН-АЦЕТАТА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
Аннотация
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
предназначены для работников санитарно-эпидемиологических станций и санитарных
лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием
вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских
институтов системы здравоохранения России и других заинтересованных министерств
и ведомств.
Методические
указания разработаны и утверждены с целью обеспечения контроля соответствия
фактических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны к их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) - санитарно-гигиеническим нормативам,
утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности
внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости
использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния
вредных веществ на состояние здоровья работающих.
Методические
указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88
"ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей
зоны" и ГОСТ 12.1.016-79 "ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к
методикам измерения концентраций вредных веществ", одобрены Проблемной
комиссией "Научные основы гигиены труда и профессиональной
патологии", являются обязательными при осуществлении вышеуказанного
контроля.
O
/ \ O
CH / \//
H O /\ │ 3
├─────┤
\// /
\┌────┬─┴─────┴── М.м. 446,5.
C │ │ │
/\ │ /\
/ \ /
/ \ / \/ │ \/
│ │ │ OH
CH COO
\ / \
/
3 \/ │ \/
OH
Строфантидин-ацетат-3
бета, 5 бета (14-Триокси-19-оксо-5 бета, 14-кард-20(22)-енолид, 3 бета-ацетат)
- белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок. При хранении
на свету препарат желтеет. Растворим в хлороформе, бензоле; трудно растворим в
метиловом спирте, малорастворим в этиловом спирте, практически нерастворим в воде. Т плавл. 235 °С.
В воздухе может
находиться в виде аэрозоля.
Препарат обладает
средней токсичностью. Кумулятивными свойствами не обладает.
ПДК в воздухе 0,05
мг/куб. м.
Характеристика
метода
Метод основан на
хроматографическом выделении строфангидин-ацетата в тонком слое силикагеля с
последующим проявлением 5-процентным раствором М-динитробензола в бензоле и
20-процентным раствором щелочи в этаноле.
Отбор проб воздуха
проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел
измерения в анализируемом объеме пробы - 10 мкг.
Нижний предел
измерения в воздухе - 0,025 мг/куб. м (при отборе 400 л).
Диапазон измеряемых
концентраций от 0,025 до 0,25 мг/куб. м.
Определению не
мешают наполнители технических продуктов, псоберан и дезоксипеганин
гидрохлорид.
Суммарная
погрешность измерения не превышает 14,7%.
Время выполнения
измерения, включая отбор проб, 60 мин.
Приборы,
аппаратура, посуда
Спектрофотометр.
Аспирационное
устройство.
Водяная баня, ТУ
64-1-2850-76.
Фильтродержатели,
ТУ 95.72.05-77.
Пульверизаторы
стеклянные, ГОСТ 10392-74.
Хроматографические
камеры, ГОСТ 10565-75.
Колбы мерные, ГОСТ
1770-74, вместимостью 50 и 100 мл.
Микропипетки, ГОСТ
20292-74, вместимостью 0,1 мл.
Пипетки, ГОСТ
20292-74, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл.
Стаканы химические,
ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 мл.
Реактивы,
растворы, материалы
Строфантидин-ацетат,
х.ч.
Бензол, ГОСТ
5955-75, х.ч.
Хлороформ, ГОСТ
215-74, х.ч.
М-динитробензол, ТУ
6-09-88-77, х.ч.
Натрия гидроокись,
ГОСТ 4328-77, х.ч., 20-процентный раствор.
Спирт этиловый,
ГОСТ 8314-77.
Стандартный раствор
строфантидина-ацетата в бензоле с содержанием 1000 мкг/мл готовят растворением
100 мг строфантидина-ацетата в бензоле. N 2 с содержанием 100 мкг/мл готовят
разбавлением стандартного раствора N 1 бензолом в 10 раз. Срок хранения растворов
в холодильнике 30 дней.
Бумажные фильтры
"синяя лента".
Хроматографические
пластинки "Силуфол" (ЧССР), 15 х 15 см.
Отбор пробы
воздуха
Воздух с объемным
расходом 20 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента", укрепленный
в фильтродержателе. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 400 л воздуха. Срок
хранения отобранных проб 5 суток.
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в стаканчик и обрабатывают дважды по 10 мл бензола при
перемешивании стеклянной палочкой. Фильтр отжимают, объединенный бензольный
экстракт отгоняют на водяной бане при 80 °С до объема
0,2 мл и количественно наносят на пластинку при помощи микропипетки. Рядом
слева и справа наносят на линию старта в качестве свидетеля стандартный раствор
строфантидина-ацетата, содержащий 10 и 40 мкг вещества, таким образом, чтобы
диаметр пятна не превышал 0,5 см.
После испарения
растворителя пластинку помещают в
камеру с подвижной
фазой,
состоящей из системы
растворителей хлороформ-этанол (90:10). После
того, как линия растворителя достигнет 12 см высоты,
пластинку извлекают из
камеры и сушат
на воздухе до
удаления растворителя. Пластинку орошают
5-процентным
М-динитробензолом в бензоле,
сушат под вытяжным шкафом и
обрабатывают
20-процентным раствором щелочи в этаноле. Строфантидин-ацетат
проявляется на хроматограмме в виде синих пятен.
R равно 0,6 +/- 0,05.
f
Количественное
измерение содержания строфантидина-ацетата в пробе проводят по калибровочному
графику, для построения которого наносят на пластинку стандартные растворы N 1
или N 2, содержащие 10, 20, 30, 40, 50, 100 мкг/мл строфантидина-ацетата, и
обрабатывают аналогично пробам.
Образовавшиеся
синие пятна по контуру обкалывают иглой, окрашенный слой сорбента количественно
соскабливают в коническую пробирку, прибавляют 5 мл спирта, перемешивают 1 - 2
мин. и центрифугируют при 3000 об./мин.
в течение 3 мин.
Жидкость над
осадком переносят с помощью пипетки в кювету и фотометрируют при 575 - 590 вм.
Контролем служит спиртовый раствор, полученный после обработки слоя сорбента
(равного по площади анализируемому пятну), снятого с любого участка пластинки.
Расчет концентрации
Концентрацию
строфантидина-ацетата в воздухе в мг/куб. м "С" вычисляют по формуле:
С = (а х в) / (б х
V),
где:
а - количество
вещества, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;
б - объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;
в - общий объем
раствора пробы, мл;
V - объем воздуха
(в л), отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям (см.
Приложение 1).
Приложение 1
(справочное)
Приведение объема
воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С,
давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:
V х (273 + 20) х Р
t
С = -------------------,
(273 + t°) х
101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа;
t
Р - барометрическое давление, кПа;
(101,33
кПа = 760 мм рт. ст.);
t° -
температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для
удобства расчета V следует
пользоваться таблицей коэффициентов
t
(Приложение
2). Для приведения
объема воздуха к температуре 20 °С
и к
давлению 760 мм рт. ст. надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение
2
(справочное)
КОЭФФИЦИЕНТ
К ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К УСЛОВИЯМ ПО ГОСТ
12.1.016-79
┌───┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│°С
│ Давление Р, кПа
(мм рт. ст.) │
│
├──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┬──────┤
│ │97,33 │97,86 │ 98,4
│98,93 │99,46
│100,00│100,53│101,06│101,33│101,86│
│ │(730) │(734) │ 738)
│(742) │(746) │(750) │(754) │(758) │(760)
│(764) │
├───┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┼──────┤
│-30│1,1582│1,1646│1,1709│1,1772│1,1836│1,1899│1,1963│1,2026│1,2058│1,2122│
│-26│1,1393│1,1456│1,1519│1,1581│1,1644│1,1705│1,1763│1,1831│1,1862│1,1925│
│-22│1,1212│1,1274│1,1336│1,1396│1,1458│1,1519│1,1581│1,1643│1,1673│1,1735│
│-18│1,1036│1,1097│1,1159│1,1218│1,1278│1,1338│1,1399│1,1460│1,1490│1,1551│
│-14│1,0866│1,0926│1,0986│1,1045│1,1105│1,1164│1,1224│1,1284│1,1313│1,1373│
│-10│1,0701│1,0760│1,0819│1,0877│1,0986│1,0994│1,1053│1,1112│1,1141│1,1200│
│-06│1,0640│1,0599│1,0657│1,0714│1,0772│1,0829│1,0887│1,0945│1,0974│1,1032│
│-02│1,0385│1,0442│1,0499│1,0556│1,0613│1,0669│1,0726│1,0784│1,0812│1,0869│
│0
│1,0309│1,0366│1,0423│1,0477│1,0535│1,0591│1,0648│1,0705│1,0733│1,0789│
│+02│1,0234│1,0291│1,0347│1,0402│1,0459│1,0514│1,0571│1,0627│1,0655│1,0712│
│+06│1,0087│1,0143│1,0198│1,0253│1,0309│1,0363│1,0419│1,0475│1,0502│1,0557│
│+10│0,9944│0,9990│1,0054│1,0108│1,0162│1,0216│1,0272│1,0326│1,0353│1,0407│
│+14│0,9806│0,9860│0,9914│0,9967│1,0027│1,0074│1,0128│1,0183│1,0209│1,0263│
│+18│0,9671│0,9725│0,9778│0,9880│0,9884│0,9936│0,9989│1,0043│1,0069│1,0122│
│+20│0,9605│0,9658│0,9711│0,9783│0,9816│0,9868│0,9921│0,9974│1,0000│1,0053│
│+22│0,9539│0,9592│0,9645│0,9696│0,9749│0,9800│0,9853│0,9906│0,9932│0,9985│
│+24│0,9475│0,9527│0,9579│0,9631│0,9683│0,9735│0,9787│0,9839│0,9865│0,9917│
│+26│0,9412│0,9464│0,9516│0,9566│0,9618│0,9669│0,9721│0,9773│0,9755│0,9851│
│+28│0,9349│0,9401│0,9453│0,9503│0,9955│0,9605│0,9657│0,9708│0,9734│0,9785│
│+30│0,9288│0,9339│0,9391│0,9440│0,9432│0,9542│0,9594│0,9646│0,9670│0,9723│
│+34│0,9167│0,9218│0,9268│0,9318│0,9368│0,9418│0,9468│0,9519│0,9544│0,9595│
│+38│0,9049│0,9099│0,9149│0,9198│0,9248│0,9297│0,9347│0,9397│0,9421│0,9471│
└───┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┴──────┘