Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N
4970-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
НОВЫХ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПИРЕТРОИДОВ
(ДАНИТОЛ, ФАСТАК,
ЦИБОЛТ, КАРАТЕ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ
Краткая
характеристика препаратов приведена в Методических указаниях N 4344-87. При
применении могут находиться в воздухе в виде аэрозоля.
Принцип метода.
Определение основано на хроматографировании анализируемых соединений на
неподвижной фазе SE-30 с ДПР и в тонком слое силикагеля с последующим
обнаружением зон локализации препаратов путем обработки раствором нитрата
серебра (фастак) или бромфенолового синего.
Пробы отбирают с
концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента" или стеклянный
фильтр с пористой пластинкой).
Метрологическая
характеристика метода. Предел измерения в анализируемом объеме пробы методом
ГЖХ 2 нг, методом ТСХ - 2 мкг. Предел измерения в воздухе (при отборе 40 л
воздуха) методом ГЖХ 0,05 мг/куб. м, методом ТСХ - 0,1 мг/куб. м. Диапазон
измеряемых концентраций методом ГЖХ 0,05 - 0,1 мг/куб. м, методом ТСХ - 0,1 -
0,5 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения: методом ГЖХ - 14,8 -
16,7%, методом ТСХ - 17,5 - 19,5%.
Избирательность
метода. Определению не мешают наполнители технического препарата.
Реактивы и
растворы. Ацетон ч. н-Гексан ч. Безводный сульфат натрия х.ч. свежепрокаленный.
Фильтры бумажные "синяя лента". Аммиак 25-процентный водный. Нитрат
серебра х.ч. Лимонная кислота, 2-процентный раствор. Бромфеноловый синий
(индикатор). Пластинки "Силуфол". Подвижная фаза гексан - ацетон
(4:1).
Проявляющие
реагенты:
N 1 - 0,5 г нитрата
серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и
доводят объем до 100 мл ацетоном. Для обработки одной пластинки расходуют 10
мл. После обработки облучают УФ-светом в течение 30 -
40 мин.;
N 2 - раствор а: 50
мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона; раствор
б: 0,5 г нитрата серебра растворяют в 20 мл воды и приливают 60 мл
дистиллированной воды. Раствор б приливают к раствору
а и доводят объем раствора до 100 мл ацетоном. На обработку одной пластинки
расходуют 10 мл. После обработки бромфеноловым реагентом фон пластинки
обесцвечивают 2-процентным раствором лимонной кислоты.
Стандартный раствор
N 1 (данитола, фастака, циболта, карате), содержащий
100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с
притертой пробкой в 100 мл гексана. Хранят в холодильнике не дольше 2 мес.
Для ГЖХ. Носитель -
хроматон N-AW с 5% SE-30 (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты.
Стандартный раствор препарата N 2. Для приготовления раствора с концентрацией
препарата 2 мкг/мл вносят 2 мл раствора N 1 в мерную колбу на 100 мл и доводят
объем до метки гексаном. Хранят в холодильнике не дольше 2 мес.
Приборы и посуда.
Аспиратор для отбора проб воздуха. Фильтродержатели. Ротационный вакуумный
испаритель для отгонки растворителей. Водяная баня. Колбы: конические на 100
мл; грушевидные; мерные на 50 мл. Воронки химические.
Для ТСХ. Пластинки
для хроматографии "Силуфол". Камера хроматографическая. Пульверизатор
стеклянный.
Для ГЖХ.
Хроматограф с ДПР (марки "Цвет", "Газохром" и др.).
Микрошприцы МШ-10 на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним
диаметром 3 мм.
Отбор проб. Воздух
со скоростью 2 л/мин. аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный
фильтр "синяя лента" (или стеклянный фильтр Шотта) в течение 20 мин.
Отбирают три параллельные пробы. Пробы хранят в холодильнике не дольше 2 сут.
Ход анализа.
Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в
коническую колбу и заливают 20 мл смеси гексана с ацетоном (9:1). Пестицид
экстрагируют из фильтра в течение 30 мин., экстракцию повторяют дважды.
Объединяют экстракты, сушат безводным сульфатом натрия, сливают в колбу для отгонки
растворителей. Испаряют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре не
выше 50 °C, а затем досуха на воздухе. Если для поглощения аэрозоля
использовали стеклянный фильтр с пористой пластиной, то поверхность фильтра
дважды смывают ацетоном порциями по 20 мл, тщательно обмывая стенки фильтра,
сливают ацетон через слой сульфата натрия в колбу для отгонки растворителя,
концентрируют до 0,2 - 0,3 мл, а затем испаряют досуха током воздуха. Сухой
остаток растворяют в 1 мл гексана и проводят определение методом ГЖХ и ТСХ.
Условия хроматографирования при
использовании метода ГЖХ.
Длина набивки
0,5 м. Диаметр
колонки 3 мм.
Твердый носитель
хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм). Жидкая фаза 5%
SE-30. Температура,
°C: колонки -
220, испарителя - 240,
детектора - 250. Скорость
потока газа-носителя
(азота особой чистоты) 70 мл/мин. Скорость
движения диаграммной ленты 240
мм/ч. Объем вводимой пробы 5 мкл.
-12
Рабочая
шкала электрометра 20 x 10
А. Линейный диапазон
детектирования 2 - 10 нг. Время удерживания
приведено в табл. 190.
Таблица 190
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ
ПАРАМЕТРЫ РАЗДЕЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ
┌────────────────────┬───────────────────┬───────────────────────┐
│ Пестицид │ Время удерживания │ Величина R │
│ │ │ f │
│ │ │ (гексан - ацетон
4:1) │
├────────────────────┼───────────────────┼───────────────────────┤
│Данитол │2 мин. 48 с │0,7 │
│Фастак │5 мин. │0,6 │
│Циболт │5 мин. 18 с │0,4 │
│Карате (2 изомера)
│2 мин.
│0,7 и 0,6
│
└────────────────────┴───────────────────┴───────────────────────┘
Определение методом
ТСХ. Пробу, сконцентрированную до объема 0,2 - 0,3 мл, количественно наносят
при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку, чтобы диаметр
пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего
края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают диэтиловым эфиром
порциями по 0,01 мл, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от
пробы наносят серию стандартных растворов пестицида, содержащих 2, 5, 7 и 10
мкг препарата.
Пластинку с
нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30
мин. до хроматографирования налита смесь гексана с ацетоном (4:1). После
поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют
на несколько минут на воздухе для испарения растворителя. Далее пластинку
обрабатывают из пульверизатора раствором нитрата серебра, подсушивают и
облучают УФ-светом в течение 15 - 20 мин. Фастак и карате
проявляются в виде пятен серо-черного цвета. Для обнаружения данитола, циболта,
фастака, карате можно использовать проявляющий реагент
N 2. После обработки бромфеноловым синим и обесцвечивания пластинки раствором
лимонной кислоты препараты проявляются в виде пятен синего цвета.
Обработка
результатов анализа. Количественное определение пестицида проводят по методу
абсолютной калибровки.
При определении
методом ГЖХ концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по
формуле:
GV S
2 пр
X = --------,
S V V
ст 1 20
где:
G -
количество препарата во введенном в хроматограф
стандартном растворе, нг;
S - площадь пика стандартного раствора
препарата, введенного
ст
в хроматограф, кв. мм;
S - площадь пика препарата в исследуемом
растворе пробы, кв.
пр
мм;
V - объем экстракта, введенный в хроматограф,
мкл;
1
V - общий объем пробы, мл;
2
V - объем воздуха, отобранный для
анализа и приведенный к
20
стандартным условиям, л.
При использовании
метода ТСХ количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности
окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора. Строят градуировочный
график зависимости количества препарата (в мкг) от площади. Прямолинейная
зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в
интервале 1 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю
границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать
аликвотную часть экстракта (0,1; 0,2 мл и т.д.) параллельной пробы.
Концентрацию
препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GV
2
X = -----,
V V
1 20
где:
G -
количество препарата, найденное
в хроматографируемом
объеме пробы, мкг;
V - объем пробы, взятый для
хроматографирования, мл;
1
V - общий объем пробы, мл;
2
V -
объем воздуха, отобранный для
анализа и приведенный к
20
стандартным условиям, л.
Требования
безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с
органическими растворителями и токсичными веществами.