Утверждены

Минздравом СССР

8 июня 1989 г. N 4971-89

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО МЕТОДАМ ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТРИАМЕЛОНА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

 

Краткая характеристика препарата. Химически чистый препарат представляет собой белый сыпучий порошок, негигроскопичный, без запаха, желтеющий на свету. При нагревании на воздухе при температуре более 170 °C разлагается. Хорошо растворяется в воде, мало - в хлороформе, этаноле и его смесях с водой. Практически нерастворим в ацетоне, керосине, бензине, масле. Устойчив при длительном хранении при температуре 20 +/- 5 °C и влажности не более 80%.

    Препарат предложен как высокоэффективный регулятор роста дынь.

Малотоксичен  для теплокровных животных: ЛД   более 4000 мг/кг для

                                           50

белых мышей при введении перорально. ОБУВ 1 мг/куб. м.

Принцип метода. При использовании тонкослойной хроматографии определение основано на хроматографировании пробы в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации препарата с помощью реактива Драгендорфа, йода или йодкрахмального реактива.

При использовании фотометрического метода определение основано на измерении оптической плотности исследуемого йодкрахмального комплекса на фотоколориметре с желто-зеленым светофильтром или визуальной колориметрии путем сравнения проб и стандартной шкалы. Пробы отбирают с концентрированием (стеклянный фильтр с пористой пластинкой).

Избирательность методов. Определению не мешают пестициды, применяемые при возделывании бахчевых культур.

Метрологическая характеристика методов представлена в табл. 195.

 

Таблица 195

 

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ

 

┌─────────────────┬─────────────┬──────────────────┬─────────────┬────────────┐

│      Метод      │Нижний предел│  Нижний предел   │  Диапазон   │  Граница   │

│   определения   │ измерения в │   измерения в    │ измеряемых  │ суммарной  │

│                 │ анализуемой │воздухе, мг/куб. м│концентраций,│погрешности,│

│                 │ пробе, мкг  │   (при отборе    │  мг/куб. м  │     %      │

│                 │             │   воздуха, л)    │             │            │

├─────────────────┼─────────────┼──────────────────┼─────────────┼────────────┤

│ТСХ на пластинках│1            │0,25 (500 л)      │0,25 - 1,25  │+/- 20      │

│"Силуфол"        │             │                  │             │            │

│ТСХ на пластинках│2            │0,5 (500 л)       │0,5 - 5,0    │+/- 20      │

│с силикагелем КСК│             │                  │             │            │

│Фотометрия       │70           │0,5 (350 л)       │0,5 - 1,4    │+/- 15,5    │

│Качественный     │0,2          │0,13              │-            │-           │

│(визуальный)     │             │                  │             │            │

└─────────────────┴─────────────┴──────────────────┴─────────────┴────────────┘

 

Реактивы и растворы. Триамелон (ФАМ). Кислота хлороводородная, водный раствор (1:3). Подвижная фаза N 1: уксусная кислота - ацетон - HCl (5:2:5). Подвижная фаза N 2: этанол - этилацетат - вода (15:1:0,5). Ацетон ч.д.а. Нитрат висмута (основной) ч.д.а. Хроматографические пластинки "Силуфол" (15 x 15 см). Йодид калия ч.д.а. Гипс медицинский, просушенный в течение 2 ч при 160 °C. Безводный сульфат кальция. Кислота уксусная ледяная х.ч. Силикагель марки ЛС 5/40 или марки КСК. Крахмал растворимый для йодометрии, 2-процентный раствор.

Проявляющие реагенты:

N 1. Реактив Драгендорфа. Основной раствор готовят, смешивая растворы А и Б (1:1). А: 1,7 г нитрата висмута растворяют в 80 мл воды. Б: 32 г йодида калия растворяют в 80 мл дистиллированной воды. Готовый раствор устойчив при температуре 4 +/- 1 °C и влажности не выше 80% (в холодильнике). Рабочий раствор готовят, смешивая 2 мл основного раствора с 2 мл ледяной уксусной кислоты и 6 мл воды.

N 2. Раствор йода в хлороформе 1-процентный.

N 3. Для приготовления проявляющего реагента к 30 +/- 1 мл раствора крахмала с массовой долей 0,2% прибавляют 0,003 +/- 0,001 г калия йодноватокислого и подкисляют раствор одной каплей концентрированной серной кислоты. Перемешивают до полного растворения йодноватокислого калия. Полученный проявляющий реагент устойчив в течение 1 сут. при температуре 20 +/- 5 °C.

Дистиллированная вода. Стандартный раствор ФАМ концентрацией 100 мг/кг в дистиллированной воде. Хранят в холодильнике в течение недели. Натрия нитрит ч.д.а., 10-процентный раствор. Применяют свежеприготовленным.

Приборы и посуда. Ротационный испаритель с набором колб или вакуумный испаритель для отгонки растворителей. Пробирки гранулированные со шлифом вместимостью 10 - 15 мл. Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр. Стеклянные пластины размером 5 x 7 мм. Колбы мерные на 50 и 100 мл. Стеклянные бюксы. Цилиндры мерные на 25, 50 и 100 мл. Прибор для встряхивания. Стеклянный фильтр Пор 100. Устройство для отбора проб воздуха. Камера для хроматографирования. Камера для опрыскивания пластинок. Микропипетки мерные на 0,1 и 0,2 мг. Пипетки мерные вместимостью 1, 2 и 5 мл. Источник УФ-света (ртутно-кварцевая лампа). Пульверизатор стеклянный. Планиметр, линейка. Воронки. Денситометр БИАН-170. Пробирки колориметрические.

Отбор проб. Воздух со скоростью 20 л/мин. аспирируют через стеклянный фильтр в течение 25 мин. при проведении ТСХ и 17,5 - при фотометрии. Для определения триамелона на уровне 1/2 ОБУВ по расчету следует отобрать: для определения методом ТСХ - 500 л воздуха, фотометрии - 350 л.

Подготовка к определению. Для приготовления хроматографических пластинок со слоем силикагеля КСК предварительно очищают силикагель. Для этого его заливают на 18 - 20 ч водным раствором хлороводородной кислоты (1:1), затем кислоту сливают, промывают силикагель водой и кипятят его в течение 2 - 3 ч с разбавленной азотной кислотой (1:1). Обработанный таким образом силикагель промывают проточной водопроводной водой, а затем дистиллированной до нейтральной реакции и сушат в сушильном шкафу при температуре 113 +/- 2 °C в течение 4 - 6 ч. Дробят и просеивают через сито 1100 меш. Хранят в склянке с притертой пробкой.

Хроматографическую камеру за 2 ч до начала хроматографирования на пластинках "Силуфол" заполняют подвижной фазой N 2. Для равномерного заполнения камеры парами подвижной фазы ее обкладывают фильтровальной бумагой размером 18 x 22 см. Высота слоя подвижной фазы 0,7 - 1 см.

Очищенный силикагель КСК (или ЛС 5/40) массой 5 г просеивают через сито 100 меш, смешивают с 2 г гипса (или безводного сульфата кальция) и приливают постепенно 90 мл воды. Взбалтывают смесь до получения однородной суспензии и равномерно наносят тонким слоем на стеклянные пластинки размером 9 x 12 или 12 x 15 см. Сушат при комнатной температуре 8 - 10 ч. Хранят в эксикаторе.

Ход анализа. Метод ТСХ. Фильтр промывают небольшими порциями воды объемом 10 - 12 мл. Экстракт отгоняют на ротационном испарителе до объема 5 мл и наносят на хроматографическую пластинку 10 - 40 мкл раствора на линию старта. Параллельно наносят стандартные растворы триамелона, содержащие от 2 до 20 мкг вещества. Пластинку со слоем КСК помещают в хроматографическую камеру, куда предварительно (примерно на 1 ч) наливают подвижную фазу N 1, а пластинку "Силуфол" - в камеру с подвижной фазой N 2. После поднятия фронта растворителя на 10 см от линии старта пластинки извлекают и после улетучивания следов растворителя обрабатывают одним из проявляющих реагентов (N 1, 2 или 3).

    После   опрыскивания   пластинок   со  слоем  КСК  проявляющим

реагентом N 1 зоны локализации триамелона и исходного полупродукта

синтеза   (примесь)   окрашиваются   в   ярко-кирпичный   цвет  на

светло-желтом  фоне  пластинки.  Величина R  триамелона составляет

                                           f

0,37,   примеси  препарата  -  0,85.  Пластинку  можно  обработать

проявляющим  реагентом  N  2.  При  этом  триамелон  и его примесь

окрашиваются   в  красно-коричневый  цвет  на  светло-желтом  фоне

пластинки.  Цвет  пятен  сохраняется  несколько дней, если накрыть

пластинку стеклом.

    Если  хроматографирование  ведут  на  пластинках  "Силуфол"  в

подвижной  фазе N 2, то после развития хроматограмм и подсушивания

пластинки  в  течение  1  мин.  при 110 °C опрыскивают проявляющим

реагентом  N  3.  В этом случае в диапазоне концентраций 1 - 5 мкг

триамелон   проявляется   в   виде   интенсивно  окрашенных  пятен

фиолетового цвета. Цвет устойчив несколько дней. Величина R  0,72.

                                                           f

Для количественного измерения сравнивают интенсивность окрашивания и вычисляют площадь пятен с помощью промасленной миллиметровой бумаги. Для расчета выбирают пятна стандартов, наиболее близкие по размерам к пробам.

Для определения содержания триамелона (ФАМ) может быть использован денситометр БИАН-170. Для этого снимают спектрофореграммы с хроматографических пластинок "Силуфол" при оранжевом светофильтре (скорость кимографа 15 мм/мин., скорость каретки 30 мм/мин.). Измеряют площади пиков и для расчета выбирают пик стандарта, наиболее близкий по размерам к пробе.

Фотометрический метод. Из концентрированного до 5 мл исследуемого раствора для анализа отбирают 2 мл, приливают 1 мл 10-процентного раствора нитрита натрия, перемешивают, приливают 1 мл ледяной уксусной кислоты, снова перемешивают и приливают 1 мл 2-процентного раствора крахмала. Растворы перемешивают. Через 15 мин. измеряют оптическую плотность растворов в кюветах шириной 10 мм на фотоэлектроколориметре при желто-зеленом фильтре.

Концентрацию триамелона в фотометрируемом объеме определяют по градуировочному графику. Для построения графика в колориметрические пробирки вносят 0, 70, 80, 100, 120, 140, 160, 180, 200 мкг триамелона, доводят объем раствора водой до 2 мл и далее поступают так же, как с пробой. Строят график по данным оптической плотности не менее чем трех стандартных шкал.

Качественное определение триамелона (ФАМ). На стеклянную пластинку тонким слоем насыпают крахмал или в маленькие пробирки диаметром 7 мм, высотой 2 см насыпают крахмал слоем высотой 1 см. Осторожно наносят на пластинку или вносят в пробирку до 50 мкл из 5 мл исследуемого водного раствора и по каплям (1 - 3 капли) 1-процентный раствор йода в хлороформе. Триамелон тотчас проявляется в виде сине-черного пятна. Чувствительность обнаружения 0,2 мкг, или 0,13 мг/куб. м.

Обработка результатов анализа. Содержание триамелона в воздухе (X, мг/куб. м) находят по формуле:

 

                                  GV

                                    2

                             X = -----,

                                 V V

                                  1 20

 

    где:

    G - количество препарата в анализируемом растворе, мкг;

    V  - анализируемый объем пробы, мл;

     1

    V  - общий объем пробы, мл;

     2

    V    -  объем  воздуха, отобранный для анализа и приведенный к

     20

стандартным условиям, л.

Требования безопасности. Следует соблюдать общие правила безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и электронагревательными приборами.