Утверждены
Министерством
здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N
6180-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
ЦИПРОКОНАЗОЛА (АЛЬТО) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие
Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические
указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов
при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями
растений и сорняками.
Ципроконазол
(альто) - 2-(4-хлорфенил)-3-циклопропил-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)бутон-2-ол.
OH
───
│ C H
ClNO.
Cl──//
\\───C────CH
───N───N 15 18
\ ___
/ │ 2
/ \\
─── CH \\ /
М.м. 291,5.
/ \ N
CH CH
3 / \
CH ──CH
2 2
Растворим в
хлороформе, ацетоне, метаноле, хлористом метилене.
ОБУВ альто в воздухе рабочей зоны - 0,7 мг/куб. м.
1.
Характеристика метода
Определение
основано на хроматографическом определении (ГЖХ, ТСХ) препарата после
концентрирования из воздуха.
Отбор проб
проводится с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента",
поглотитель с хлороформом).
Пределы измерения в
анализируемом объеме пробы: 20 нг (ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).
Пределы измерения в
воздухе: 0,2 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 100 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций - 0,2 - 6,0 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 - 3,0 мг/куб. м (ТСХ).
Определению не
мешают наполнители технического препарата.
Граница суммарной
погрешности - +/- 18,5%.
2.
Реактивы, растворы, материалы
Ацетон хч, ГОСТ
2603-79.
Гексан ч, ТУ
6-09-3375-78.
Натрия сульфат
безводный чда, ГОСТ 4166-76.
Хлороформ чда, ГОСТ
20015-74.
Стандартный раствор
ципроконазола в ацетоне концентрации 100 мкг/мл. Готовят растворением 10 мг
препарата в 100 мл ацетона. Срок хранения - до 3 месяцев. Для ГЖХ готовят
стандартные растворы последовательным разведением исходного раствора. Срок
хранения - до 5 дней.
К методу ГЖХ
Насадка для колонки
- Хроматон N-AW с 5% SE-30.
К методу ТСХ
Серебро
азотнокислое чда, ГОСТ 1277-75.
Пластинки
"Силуфол" (ЧССР).
Бромфеноловый синий чда, ТУ 6-09-1058-76.
Подвижная фаза -
хлороформ - ацетон (9:1).
Проявляющий реактив
- раствор бромфенолового синего. 0,05 г бромфенолового синего растворяют в 10
мл ацетона, доводят до 100 мл 0,5% водно-ацетоновым (1 часть воды + 3 части
ацетона) раствором азотнокислого серебра.
3. Приборы,
аппаратура и посуда
Электроаспиратор,
ТУ 64-1-862-77.
Бумажные фильтры
"синяя лента".
Фильтродержатели.
Ротационный
испаритель с набором колб (типа ИР-1), ТУ 26-11-917-76.
Водяная баня, ТУ
64-1-2850-76.
Посуда стеклянная
лабораторная по ГОСТ 1770-74, ГОСТ 25336-82, ГОСТ 20292-74.
К методу ГЖХ
Хроматограф с
термоионным детектором (типа "Цвет", "Кристалл-2000" или
другой).
Колонка стеклянная,
длина 1 м, диаметр 3 мм.
Микрошприц на 10
мкл МШ-10.
К методу ТСХ
Камера
хроматографическая, ГОСТ 25336-82.
Пульверизатор
стеклянный, ГОСТ 25336-82.
4. Отбор
проб воздуха
Воздух с объемным
расходом 5 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные фильтры
"синяя лента" и дрексель, заполненный 100 мл хлороформа, в течение 20
мин. Дрексель целесообразно поместить в емкость с охлаждающей смесью (лед -
соль).
Пробы хранятся в
закрытых склянках до 3-х дней.
5.
Проведение измерения
Фильтр переносят в
коническую колбу, заливают 10 - 15 мл ацетона и оставляют на 1 час. Экстракцию
повторяют дважды. Ацетон сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до
объема ~ 0,2 - 0,3 мл, досуха удаляют растворитель на воздухе.
Хлороформ из
дрекселя переносят в колбу для отгонки растворителей и концентрируют до объема
~ 0,2 - 0,3 мл. Досуха удаляют растворитель на воздухе. Сухой остаток
количественно переносят с помощью ацетона в колбу, где находится экстракт пробы
из фильтра. Объединенный экстракт доупаривают досуха, остаток растворяют в 3
мкл ацетона и далее хроматографируют. Параллельно в хроматограф вводят по 3 мкл
стандартных растворов, содержащих 20, 30, 50, 100, 600 нг ципроконазола.
Метод ГЖХ
Хроматограф с
термоионным детектором (ТИД).
Колонка длиной 1 м,
диаметром 3 мм.
Носитель Хроматон
N-AW с 5% SE-30.
Температура колонки
- 210 °C.
Температура
испарителя - 230 °C.
Расходы газов: азот
- 3 - 32, водород 11 - 13, воздух 100 - 150 мл/мин.
-10
Рабочая
шкала электрометра - 32 x 10 .
Объем вводимой
пробы - 3 мкл.
Время удерживания:
I пик - 2,8 мин.; II - 5,6 мин.
Количественный
расчет ведут методом соотношения со стандартом путем сравнения высоты пика
пробы с высотой пика соответствующего стандартного раствора, высота пика
которого наиболее близка пику рабочей пробы.
6. Расчет
концентрации
Концентрацию
ципроконазола (альто) в воздухе (X) в мг/куб. м определяют по формуле (по сумме
двух пиков):
C x H x V
рп общ
X = ---------------,
h x V
x V
ст пр 20
где:
C -
количество стандарта ципроконазола, введенного в хроматограф, нг;
H - высота пика рабочей пробы, мм;
рп
h - высота пика стандартного раствора, мм;
ст
V - объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;
пр
V - общий объем рабочей пробы, мл;
общ
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к стандартным
20
условиям, л.
Метод ТСХ
Аликвотную часть рабочей пробы
(0,1 мл) с помощью микропипетки наносят
на
хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см.
Центр
пятна должен быть
на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки.
Справа и слева
от пробы с помощью микропипетки наносят по 0,1 мл
серии
стандартов,
содержащих 1, 2, 3...10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными
растворами
помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30
мин. до
хроматографирования
залита смесь хлороформ - ацетон
(1:1). После развития
хроматограммы
пластинку вынимают и
оставляют на несколько
минут для
испарения
растворителя, затем пластинку
обрабатывают из пульверизатора
раствором
бромфенолового синего.
После высушивания пластинку обрабатывают
для удаления фона
2-процентным раствором лимонной
(уксусной) кислоты.
Ципроконазол
(альто) проявляется в виде 2-х пятен ярко-голубого цвета на
1 2
светло-желтом
фоне.
Величина R =
0,45, R = 0,60. Линейный диапазон
f f
определения - 1 - 10 мкг.
Если содержание
препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона 10 мкг, то к рабочему
раствору пипеткой добавляют дополнительное количество ацетона и анализируют
более разбавленный раствор.
Количественное
определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности (по сумме) окраски
и площади пятен пробы и стандартных растворов.
7. Расчет
концентрации
Концентрацию
препарата (X) в воздухе мг/куб. м вычисляют по формуле:
A x V
X = --------,
V x V
1 20
где:
A -
количество препарата, найденное в пробе, мкг;
V - общий
объем рабочей пробы, мл;
V - объем аликвоты, нанесенный на
хроматографическую пластинку, мл;
1
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к стандартным
20
условиям, л.
8.
Требования безопасности
Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями, токсичными веществами.