Утверждены
Министерством
здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N
6220-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
БИФЕНТРИНА (ТАЛСТАРА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие
Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические
указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов
при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с
вредителями, болезнями растений и сорняками.
CH
CH
3\/ 3 /\\
/\ /
\\
/ \
O ││ │ C H O F
Cl.
C────\ / \ ││ │ 22 22 2 3
││ \C/
\/\ //\ /\\
││ \\
CH \// \/ \\ М.м. 422.
││ O
2 │ ││ │
C │ ││ │
/ \ CH \ //
F C
Cl
3 \//
3
Бифентрин (талстар, бифенат) -
(2-метил-/1,1'-бифенил/-3-ил)-метил-
3(2-хлор-3,3,3-трифлуро-1-пропенил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат.
Химически чистое соединение
представляет собой белый кристаллический
-7
порошок с
температурой плавления 51 - 66 °C, давление пара 1 x 10 Па при
25 °C. Хорошо
растворим в большинстве
органических растворителей
(хлороформ,
ацетон, эфир, хлористый метилен), слабо
растворим в гептане,
метаноле, воде.
В воздухе рабочей
зоны может находиться в виде аэрозоля.
ОБУВ талстара в воздухе рабочей зоны - 0,015 мг/куб. м.
1.
Характеристика метода
Метод основан на
использовании газожидкостной хроматографии с детектором по захвату электронов
или тонкослойной хроматографии.
Отбор проб
проводится с концентрированием на бумажном фильтре "синяя лента".
Нижний предел
измерения в хроматографируемом объеме 0,1 нг (ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).
Нижний предел
измерения в воздухе 0,001 мг/куб. м (ГЖХ), 0,01 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 100
л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций 0,001 - 0,1 мг/куб. м (ГЖХ), 0,01 - 0,1 мг/куб. м (ТСХ).
Измерению не мешают
другие пестициды, в том числе ДДТ, ГХЦГ, хостаквик, пиретроиды.
Суммарная
погрешность не превышает +/- 20,5% (ГЖХ) и +/- 25% (ТСХ).
2. Приборы,
аппаратура, посуда
Хроматограф,
снабженный детектором по захвату электронов (ДЭЗ).
Аспирационное
устройство, ТУ 64-1-862-77.
Ротационный
вакуумный испаритель с набором колб типа ИР-1М (2М), ТУ 25-11-317-74.
Ртутно-кварцевая
лампа ПРК-2 или ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.
Фильтродержатель (патроны).
Весы аналитические.
Хроматографическая стеклянная колонка длиною 1 м и внутренним диаметром 3 мм.
Секундомер, ГОСТ
5072-72.
Микропипетки, ГОСТ
20292-74, на 0,1 мл.
Пипетки, ГОСТ
20292-74, на 1, 2, 5 мл.
Колбы мерные, ГОСТ
1770-74, на 100 мл.
Колбы конические,
ГОСТ 25336-82, на 100 мл.
Воронки химические,
ГОСТ 25336-82.
Цилиндры мерные,
ГОСТ 1770-74, емкостью 10 мл с ценой деления 0,1 мл.
Камера хроматографическая, ГОСТ 25336-82.
Пульверизаторы
стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Эксикатор, ГОСТ 25336-82.
2.1.
Реактивы, растворы, материалы
Талстар хч.
Хлороформ хч, ГОСТ 20015-74.
н-Гексан хч, ГОСТ 6-09-3875-78.
Ацетон хч, ГОСТ 2603-79.
Спирт этиловый хч, ГОСТ 5962-81.
Натрия сульфат
безводный ч, ГОСТ 4166-76.
Йод кристаллический
чда, ГОСТ 4139-79.
Крахмал
водорастворимый хч, ГОСТ 10163-76, 1-процентный
водный раствор.
Фильтры бумажные обеззоленные "синяя лента", ТУ 6-09-1673-77,
предварительно промытые смесью хлороформ - ацетон (1:1) и высушенные.
Пластинки хроматографические "Силуфол"
UV-254 (ЧССР) размером 15 x 15 см.
Азот особой чистоты
газообразный в баллонах с редуктором, ГОСТ 9293-74.
Хроматон N-AW силанизированный ГМДС с 5% SE-30 (0,16
- 0,20 мм).
Стандартный раствор
в ацетоне с содержанием талстара 100 мкг/мл (N 1);
растворы, содержащие 10, 1, 0,1 мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением
раствора N 1. Хранят в холодильнике не более 2-х недель.
2.2. Отбор
проб
Воздух со скоростью
5 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя
лента" в течение 5 минут. (Для определения на уровне чувствительности методики
необходимо отобрать 25 л воздуха.)
Пробы анализировать
сразу.
2.3.
Подготовка к измерению
2.3.1. Градуировочный график
Для количественного
определения талстара методом ГЖХ строят градуировочный график. Градуировку прибора осуществляют
методом абсолютной калибровки. Для этого готовят серию стандартных растворов с
содержанием 0,1 - 10 мкг/мл в ацетоне, 1 мкл каждого
разведения вводят в хроматограф. По полученным данным строят градуировочный график зависимости высоты пика в мм от количества бифентрина (талстара) в нг.
Для определения талстара с помощью ТСХ применяется метод оценки по размерам
пятна. Площадь пятен известных количеств стандартных
растворов измеряют с помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги и
строят график зависимости "площадь пятна - количество" в пределах
диапазона линейности (1 - 10 мкг).
2.3.2. Проведение
измерения
Фильтр переносят в
коническую колбу и экстрагируют бифентрин хлороформом
трижды по 15 - 20 мл, периодически встряхивая. Объединенные экстракты сушат
безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема
0,1 - 0,2 мл. Растворитель удаляют на воздухе досуха. Сухой остаток в колбе
растворяют в 1 мл ацетона и далее анализируют методами ГЖХ и ТСХ.
Условия ГЖХ-анализа следующие:
хроматограф, снабженный детектором
постоянной
скорости рекомбинации, включают в соответствии с инструкцией на
следующий
режим: температура термостата
колонок - 210 °C; температура
испарителя - 250
°C; температура детектора -
270 °C;
скорость потока
газа-носителя
(азота) - 60 мл/мин.;
скорость диаграммной ленты
- 600
-12
мм/час;
рабочая шкала электрометра 5 x 10 А; хроматографируемый
объем -
1 мкл; линейный
диапазон детектирования 0,1 - 10
нг.
Абсолютное время
удерживания на колонке с SE-30 - 8 минут 45 секунд.
Количественную оценку бифентрина проводят
методом абсолютной калибровки
по градуировочному
графику. На полученной
хроматограмме
измеряют
интенсивность
пиков и по градуировочному
графику определяют количество
бифентрина.
Для
определения бифентрина с помощью ТСХ экстракт после
анализа методом
ГЖХ
концентрируют до объема примерно
0,1 - 0,2 мл и количественно наносят
на хроматографическую пластинку "Силуфол".
Справа и слева от пробы наносят
известные
количества стандартных растворов талстара в
пределах линейности
детектирования.
Хроматографирование проводят
в системе гексан - ацетон в
соотношении 50:1.
После поднятия фронта растворителя на 14 см пластинку
проветривают
на воздухе до
полного удаления растворителя. После этого
пластинку
подвергают облучению УФ-светом в течение 20 - 25 минут, а затем
помещают в
камеру с парами йода на 5 минут. Далее пластинки выветривают на
воздухе и
проявляют 1-процентным водным
раствором крахмала. Зоны
локализации
обнаруживаются в виде
синих пятен на светлом фоне.
Окраска
пятен устойчива в течение
3-х дней. Величина R составляет 0,40 +/- 0,02.
f
Линейный
диапазон измерения на пластинке составляет 1,0 - 10,0 мкг. Если
содержание препарата в пробе превышает верхнюю
границу диапазона линейности
(10 мкг),
то для нанесения на пластинку
необходимо брать аликвотную часть
экстракта.
На полученной хроматограмме измеряют интенсивность пиков (по окраске и
площади) с помощью миллиметровой бумаги и по калибровочному графику определяют
содержание бифентрина.
2.4. Расчет
концентрации
Концентрацию (C,
мг/куб. м) бифентрина вычисляют по формуле:
a x V
C = --------,
V x V
1 20
где:
a -
количество бифентрина, найденное
в хроматографируемой пробе по
градуировочному графику,
нг
(ГЖХ), или соотношением со стандартом, мкг
(ТСХ);
V - общий
объем анализируемого раствора, мл;
V - хроматографируемый
объем пробы, мкл (ГЖХ) или мл (ТСХ).
1
При
нанесении всей пробы на пластинку V = V ;
1
V - объем анализируемого воздуха.
20
3.
Требования безопасности
Соблюдать все
необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а
также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии,
противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях,
отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N
2455-81 от 20.10.81).