Утверждены
Министерством
здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N
6235-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ФЛУФЕНОКСУРОНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Настоящие
Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.
Методические
указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов
при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями
растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Торговое
наименование: Каскад.
Фирма-производитель:
Цианамид (США).
Действующее
вещество: флуфеноксурон - 1-[4-(2-хлор-альфа,альфа,альфа-трифтор-n-толилокси)-2-фторфенил]-3-(2,6-дифторбензоил)мочевина.
Относится к группе
ацилмочевин.
F F Cl
─── / \
─── \
───
// \\
// \\ //
\\
\ ___
/-CONHCONH-\ ___ /-O-\ ___ /-CF
─── \
───
─── 3
F
Эмпирическая формула: C H ClF N O .
21 11 6 2 3
Молекулярная масса: 488,5.
Химически чистое соединение
представляет собой белый кристаллический
порошок без
запаха с температурой плавления 169 - 172 °C. Хорошо растворим
в большинстве органических растворителей (хлороформ,
ацетон, бензол и др.),
-6
растворимость
в воде ограничена
(4 x 10 г/л). Стабилен
по отношению к
-9
действию
света и температуры. Давление
пара при 20 °C - 4,55 x 10 Н/кв.
м.
В воздухе
рабочей зоны может находиться в виде аэрозоля.
Краткая
токсикологическая характеристика:
Умеренно
токсичен.
Острая
оральная токсичность:
ЛД для крысы - более 3000 мг/кг.
50
Острая
дермальная токсичность:
ЛД для крысы - более 2000 мг/кг.
50
ОБУВ каскада в
воздухе рабочей зоны не установлен.
Область применения
препарата
Каскад - регулятор
роста насекомых и клещей. Используется за рубежом в качестве инсектоакарицида, эффективен против многих вредителей плодовых и овощных
культур, виноградной лозы, цитрусовых, хлопчатника, кукурузы, сои.
Выпускается в виде
5% диспергируемого в воде концентрата.
2. Методика
измерения концентраций флуфеноксурона
в воздухе рабочей
зоны
2.1.
Основные положения
2.1.1. Принцип
метода
Определение
основано на концентрировании аэрозолей флуфеноксурона
из воздуха на фильтр "синяя лента" с последующей идентификацией и
количественным определением с помощью газожидкостной (ГЖХ) и тонкослойной (ТСХ)
хроматографии.
2.1.2.
Избирательность методики
Определению каскада
в предлагаемых условиях не мешают близкие по структуре и области применения
такие соединения, как ДДТ, ДЦЕ, ДДД, ГХЦГ, талстар, номолт.
2.1.3.
Метрологическая характеристика методики (n = 25, p = 0,95).
|
Метод
анализа
|
Метрологические
параметры
|
|
предел
обнаруж.,
мг/куб. м
|
диапазон
определяемых
конц.,
мг/куб. м
|
среднее
значение
обнаружен.,
%
|
стан-
дартное
откло-
нение, %
|
доверит.
интервал
среднего,
%
|
относит.
стандартн.
отклонение,
%
|
|
ГЖХ
|
0,04
|
0,04
- 0,8
|
98,6
|
+/-
2,05
|
+/-
0,95
|
+/-
2,07
|
|
ТСХ
|
0,04
|
0,04
- 0,4
|
88,0
|
+/-
7,13
|
+/-
2,94
|
+/-
8,10
|
2.2.
Реактивы, растворы, материалы
Флуфеноксурон хч.
Хлороформ хч, ГОСТ
20215-74.
н-Гексан хч, ГОСТ
6-09-3875-78.
Ацетон хч, ГОСТ
2603-79.
Спирт этиловый хч,
ТУ 6-1710-77.
Натрия сульфат
безводный ч, ГОСТ 4166-76.
Соляная кислота
концентрированная хч, ГОСТ 3118-77, 12% водный раствор (по объему).
Калий
марганцовокислый хч, ГОСТ 20490-76, 3% водный раствор.
Калий йодистый хч,
ГОСТ 4232-74, 1% водный раствор.
Крахмал
водорастворимый хч, ГОСТ 10163-76, 3% водный раствор.
Фильтры бумажные
обеззоленные "синяя лента", ТУ 6-09-1673-77, предварительно промытые
смесью хлороформ - ацетон (1:1) и высушенные.
Пластинки
хроматографические "Силуфол" UV-254 (ЧССР) размером 15 x 15 см.
Азот особой чистоты
газообразный в баллонах с редуктором, ГОСТ 9293-74.
Хроматон N-AW
силанизированный ГМДС с 3% OV-17 (0,16 - 0,20 мм).
2.3.
Приборы, аппаратура, посуда
Хроматограф,
снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации.
Аспирационное
устройство, ТУ 64-1-862-77.
Ротационный
вакуумный испаритель с набором колб типа ИР-1М (2М), ТУ 25-11-917-74.
Ртутно-кварцевая
лампа ПРК-2 или ПРК-4, ТУ 16-535-280-74.
Весы аналитические.
Фильтродержатели
(патроны).
Хроматографическая
стеклянная колонка длиной 2 м и внутренним диаметром 3 мм.
Секундомер, ГОСТ
5072-72.
Микропипетки на 0,1
мл, ГОСТ 20292-74.
Пипетки на 1, 2, 5
мл, ГОСТ 20292-74.
Колбы мерные на 100
мл, ГОСТ 1770-74.
Колбы конические на
100 мл, ГОСТ 20292-82.
Воронки химические,
ГОСТ 29932-74.
Цилиндры мерные
емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Пробирки мерные
емкостью 10 мл с ценой деления 0,1 мл, ГОСТ 1770-74.
Камера
хроматографическая, ГОСТ 25336-82.
Пульверизаторы
стеклянные, ГОСТ 10391-79.
2.4. Отбор
проб
Воздух со скоростью
5 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя лента" в течение 5 минут.
(Для определения на уровне чувствительности методики необходимо отобрать 25 л
воздуха.) Пробы анализировать сразу.
2.5.
Подготовка к определению
2.5.1.
Приготовление проявляющего реактива для ТСХ-определения
Проявляющий реактив
для ТСХ-определения: хлорирование - йодид калия - крахмал.
Раствор для
хлорирования. Смешивают равные объемы 3% раствора перманганата калия и 12%
раствора соляной кислоты. Готовят перед употреблением в количествах,
необходимых для разового пользования.
Проявляющий
реагент: а) 1% раствор йодистого калия; б) 3% раствор крахмала; перед
употреблением смешать растворы а), б) и этиловый спирт в соотношении 2,5:2,5:1.
2.5.2.
Приготовление стандартных растворов
Стандартный раствор
с содержанием флуфеноксурона 100 мкг/мл (N 1) готовят растворением 10,0 мг
вещества в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Растворы, содержащие 20, 10, 1
мкг/мл, готовят соответствующим разбавлением ацетоном раствора N 1. Хранят в холодильнике
не более месяца.
2.5.3. Построение
градуировочного графика
2.5.3.1. Метод ГЖХ
Для количественного
определения флуфеноксурона методом ГЖХ строят градуировочный график методом
абсолютной калибровки. Для этого готовят серию стандартных растворов с
содержанием 1 - 20 мкг/мл в ацетоне, 1 мкл каждого разведения вводят в
хроматограф. По полученным данным строят калибровочный график зависимости
интенсивности пика (в мм) от количества флуфеноксурона
(в мкг).
2.5.3.2. Метод ТСХ
Для определения
флуфеноксурона с помощью ТСХ применяли метод оценки по размерам пятна. Площадь
пятен известных количеств стандартных растворов
измеряют с помощью прозрачной или промасленной миллиметровой бумаги и строят
график зависимости "площадь пятна - количество" в пределах диапазона
линейности (1 - 10 мкг).
2.6.
Описание определения
Фильтр переносят в
коническую колбу и экстрагируют флуфеноксурон хлороформом трижды по 15 - 20 мл,
периодически встряхивая. Объединенные экстракты сушат безводным сульфатом
натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2 мл.
Растворитель удаляют
на воздухе досуха. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее
анализируют методами ГЖХ и ТСХ.
Условия ГЖХ-анализа следующие:
хроматограф, снабженный детектором
постоянной
скорости рекомбинации, включают в соответствии с инструкцией на
следующий
режим: температура термостата колонок - 220 °C; температура
испарителя - 250 °C; температура детектора -
230 °C; скорость потока газа-
носителя
(азота) - 60 мл/мин.;
скорость диаграммной ленты - 600 мм/час;
-12
рабочая
шкала электрометра 5 x 10 А;
хроматографируемый объем 1 мкл;
нижний предел обнаружения - 1 нг. Абсолютное время
удерживания на колонке с
3% OV-17 длиной 2 м - 5 минут.
Количественную оценку флуфеноксурона осуществляют с
помощью
калибровочного
графика. На полученной хроматограмме измеряют
интенсивность
пиков и по калибровочному графику определяют
количество флуфеноксурона.
Для определения
флуфеноксурона с помощью ТСХ экстракт после анализа
методом ГЖХ
концентрируют до объема примерно 0,1 - 0,2 мл и количественно
наносят на
хроматографическую пластинку "Силуфол". Справа и слева от пробы
наносят
известные количества стандартного
раствора флуфеноксурона в
пределах линейности детектирования.
Хроматографирование проводят в системе
гексан - ацетон в соотношении 5:3. После поднятия
фронта растворителя на 14
см пластинку
проветривают на воздухе до полного удаления растворителей.
После
этого пластинку подвергают
облучению УФ-светом
в течение 30 - 35
минут, а затем
помещают в камеру с хлорирующей смесью на 3 минуты. После
этого
пластинку оставляют на
воздухе до полного удаления запаха хлора
(около
15 минут) и
обрабатывают из пульверизатора проявляющим реагентом
(йод-крахмальный
реактив). Зоны локализации каскада обнаруживаются в виде
синих пятен
на светлом фоне. Величина R составляет
0,5 +/- 0,02. Линейный
f
диапазон
измерения на пластинке составляет 1,0 - 10,0 мкг. Если содержание
препарата в
пробе превышает верхнюю границу диапазона линейности (10 мкг),
то для нанесения на пластинку необходимо брать
аликвотную часть экстракта.
На полученной
хроматограмме измеряют интенсивность пятен (по окраске и площади) с помощью миллиметровой
бумаги и по калибровочному графику определяют количество флуфеноксурона.
2.7.
Обработка результатов анализа
Концентрацию (C,
мг/куб. м) флуфеноксурона вычисляют по формуле:
а x V
C = --------,
V x V
1 20
где:
а -
количество флуфеноксурона, найденное по калибровочному графику,
мкг;
V - общий
объем анализируемого раствора, мл;
V - хроматографируемый объем пробы, мл;
1
V - объем анализируемого воздуха, приведенный
к стандартным условиям,
20
л.
3.
Требования безопасности
Соблюдать все
необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а
также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии,
противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях,
отделениях, отделах санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР (N
2455-81 от 20.10.81).