Утверждены
Министерством
здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N
6254-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
ДИАФЕНТИУРОНА (ПЕГАСА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие
Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические
указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов
при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с
вредителями, болезнями растений и сорняками.
Диафентиурон (пегас, CGA 106630) - препарат производства фирмы "Сиба-Гейги", кристаллическое вещество белого цвета,
хорошо растворим в ацетонитриле.
H C CH
O 3 \/ 3
/\\ / \
/\\ /C-H
/
\\/ \/ \\/
││ │
││ │ S H C CH C H N
OS.
││ │
││ │ \\ 3\ / 3 23 32 2
\ //
\ //\ C C
\//
\// \ /
\ / \ М.м. 384,59.
│ N N CH
H C-CH │
│ 3
3 │
H H
CH
3
Используется как
несистемный инсектоакарицид. При применении может
находиться в воздухе в виде аэрозоля.
Препарат необходимо
хранить в закрытой заводской таре. Не допускать попадания солнечных лучей и
влаги. Хранить при температуре не ниже -5 °C.
1.
Характеристика метода
Метод основан на хроматографировании пегаса в тонком слое силикагеля после
извлечения препарата из исследуемой пробы органическим растворителем, а также
на получении фторпроизводного пегаса с последующим его определением методом ГЖХ
с использованием постоянной скорости рекомбинации.
Отбор проб
производится с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента").
Предел измерения в хроматографируемом объеме - 2 мкг (ТСХ), 2 нг (ГЖХ).
Предел измерения в
воздухе - 0,02 мг/куб. м (при отборе 100 л воздуха для ТСХ) и 0,004 мг/куб. м
(для ГЖХ).
Диапазон измеряемых
концентраций - 0,02 - 0,15 мг/куб. м (ТСХ) и 0,004 - 0,015 мг/куб. м (ГЖХ).
Определению не
мешают наполнители препарата.
Границы суммарной
погрешности +/- 25% (ТСХ), +/- 21% (ГЖХ).
2.
Реактивы, растворы, материалы
К методу ГЖХ
Азот газообразный,
ГОСТ 9223-74, из баллона с редуктором.
Воздух, ГОСТ
9010-80, из баллона с редуктором.
Хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30 (Хемапол,
ЧССР).
Гептафтормасляный ангидрид ч, ТУ 6-09-40-2571-87.
К методу ТСХ
Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.
Ацетонитрил ч, ТУ 6-09-3534-87.
Гексан ч, ТУ 6-09-3375-78.
Хлороформ ч, ГОСТ 20015-77.
Сульфат натрия
безводный ч, ГОСТ 4166-76.
Бромфеноловый синий ч, ТУ 6-09-1058-71.
Нитрат серебра ч, ГОСТ 1277-81.
Лимонная кислота осч, ГОСТ 908-79, 2%-ный раствор.
Пластинки "Силуфол" (Хемапол, ЧССР).
Проявляющий
реактив. Раствор А: 100 мг бромфенолового
синего растворяют в 10 мл ацетона.
Раствор Б: 1 г нитрата серебра растворяют в 40 мл воды и прибавляют
120 мл ацетона.
Растворы А и Б сливают в мерную колбу на 200 мл и доводят ацетоном
до метки. После обработки БФС пластинку обесцвечивают 2% раствором лимонной
кислоты.
Основной
стандартный раствор диафентиурона, содержащий 1000
мкг/мл, готовят растворением 100 мг препарата в мерной колбе на 100 мл ацетонитрилом. Хранят в холодильнике в течение 2-х месяцев.
Стандартный раствор
фторпроизводного диафентиурона, содержащий 1 мкг/мл,
готовят следующим образом: 10 мкл основного
стандартного раствора, содержащего 10 мкг пегаса, переносят в мерную пробирку,
прибавляют 10 мкл гептафтормасляного
ангидрида и оставляют на 1 час. По истечении времени избыток отдувают в токе
сжатого воздуха. Сухой остаток разбавляют в 10 мл гексана.
3. Приборы
и посуда
Газовый хроматограф
с детектором постоянной скорости рекомбинации.
Колонка стеклянная,
1000 x 3 мм.
Микрошприц 10 мкл МШ-10, ТУ 2.833.106.
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862477.
Ротационный
испаритель ИР-1М, ТУ 26-11-917-77, с набором колб.
Посуда лабораторная
по ГОСТ 1770-74, ГОСТ 25336-82.
Пульверизатор
стеклянный, ГОСТ 25336-82.
Секундомер.
Фильтродержатели.
4. Отбор
пробы воздуха
Исследуемый воздух
со скоростью 5 л/мин. аспирируют через фильтр
"синяя лента", помещенный в фильтродержатель,
в течение 20 мин. Рекомендуется отобрать три параллельные пробы.
5.
Проведение измерения
Метод ГЖХ
Фильтр переносят в
коническую колбу, заливают 15 - 20 мл ацетонитрила и
встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют еще раз. Объединенный ацетонитрильный
экстракт сушат безводным сульфатом натрия, переносят в колбу для упаривания с
оттянутым концом, упаривают растворитель на ротационном испарителе при температуре
бани 60 °C до 0,1 мл и прибавляют 10 мкл гептафтормасляного ангидрида. Через 1 час избыток реагента
отдувают в токе сжатого воздуха, разбавляют 1 - 2 мл гексана
и аликвоту 5 мкл вводят в
хроматограф.
Условия хроматографирования
Газовый хроматограф
с ДЭЗ.
Насадка - Хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30.
Колонка стеклянная,
1000 x 3 мм.
Скорость
газа-носителя (азота) - 50 мл/мин.
-12
Шкала
электрометра - 20 x 10 А.
Температура колонки
- 170 °C.
Температура
испарителя - 240 °C.
Температура
детектора - 240 °C.
Вводимый объем - 5 мкл.
Линейный диапазон
детектирования - 2 - 10 нг.
Минимально
детектируемое количество - 2 нг.
Время удерживания
при указанных условиях - 4 мин.
Расчет концентрации
препарата X, мг/куб. м, в воздухе проводят по формуле:
G x V x h
общ пр
X = --------------,
h x V x V
ст 20
где:
G -
количество диафентиурона (стандартный
раствор), введенного в
хроматограф, мкг;
h - высота пика стандартного раствора, мм;
ст
h - высота пика диафентиурона
в исследуемой пробе, мм;
пр
V - объем
пробы, взятой для хроматографирования, мкл;
V - общий объем экстракта, мл;
общ
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к нормальным
20
условиям, л.
Метод ТСХ
Фильтр
переносят в коническую колбу, заливают 15 - 20 мл ацетонитрила
и
встряхивают
в течение 30 мин. Экстракцию повторяют еще раз.
Объединенный
ацетонитрильный экстракт сушат безводным сульфатом
натрия, концентрируют до
0,1 - 0,2
мл и наносят
на хроматографическую пластинку
"Силуфол",
предварительно
промытую
в камере с ацетоном. Центр пятна должен быть на
расстоянии 2 см от нижнего
края пластинки. Колбу с экстрактом смывают 2 - 3
раза ацетонитрилом,
который также наносят в центр первого пятна. Справа и
слева от пробы наносят стандартные растворы
пестицидов, содержащие 2; 5 и
10 мкг препарата.
Пластинку с нанесенными
растворами помещают в
хроматографическую камеру,
в которую залита
смесь гексан:ацетон
(1:2).
После поднятия фронта растворителей на 10 см
пластинку вынимают и оставляют
на
несколько минут на
воздухе для испарения
растворителей. После этого
пластинку обрабатывают из пульверизатора раствором бромфенолового синего, а
затем обесцвечивают 2%-ным
раствором лимонной кислоты. Препарат проявляется
в виде пятен сине-бурого цвета на желтом фоне с
R - 0,5 +/- 0,05.
f
Количество
препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площадей пятен
пробы и стандартного раствора.
Измерение площади
проводится с помощью миллиметровой бумаги. Строится калибровочный график
зависимости между количеством препарата в мкг и площадью пятна. Прямолинейная
зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в
интервале 2 - 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю
границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать
аликвотную часть экстракта параллельной пробы.
Концентрацию препарата
X в воздухе в мг/куб. м вычисляют по формуле:
G x V
общ
X = --------,
V x V
20
где:
G -
количество препарата, найденное в хроматографируемом
объеме, мкг;
V - общий объем пробы, мл;
общ
V - объем
пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к нормальным
20
условиям, л.
6.
Требования безопасности
Необходимо
соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими
растворителями и токсическими веществами.