Утверждаю
Заместитель
Главного
государственного
санитарного врача
СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
20 июля 1977 г. N
1743-77
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
К ПОСТАНОВКЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ГИГИЕНИЧЕСКОМУ
НОРМИРОВАНИЮ
МИКРОБНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Методические
указания разработаны отделом гигиены и профессиональных заболеваний ЦНИЛа Рижского медицинского института.
Для накопления
опыта и получения сопоставимых результатов воздействия микробных препаратов на
организм человека и животных, могущих в дальнейшем быть использованными при
разработке критериев оценки токсичности и опасности этих препаратов, требуется
проведение единых исследований.
В настоящих
Методических указаниях приведена схема постановки исследований по
гигиеническому нормированию микробных препаратов и даны рекомендации по
обоснованию их предельно допустимых концентраций в воздухе рабочей зоны.
Методические
указания предназначены для использования в работе научно-исследовательских
организаций гигиенического профиля и учреждений санитарно-эпидемиологической
службы, занимающихся исследованием, обоснованием и подготовкой гигиенических
нормативов различных веществ в объектах внешней среды.
Токсикологическая
оценка микробных препаратов связана с их гигиеническим нормированием в воздухе
рабочей зоны производственных помещений.
В настоящее время
возрастает число микробных препаратов, увеличивается производство и масштабы их
применения, что может представлять потенциальную опасность неблагоприятного
воздействия на организм людей, занятых как производством указанных препаратов,
так и их применением.
Для борьбы с бактериальными,
грибными и вирусными заболеваниями растений, которые наносят большой урон
сельскохозяйственному производству, наряду с химическими веществами, нередко высокоопасными, широко используются микробные препараты.
Применение последних в этой области очень перспективно, т.к. они обладают
относительно слабой токсичностью в отношении человека и животных и
специфическим действием на возбудителей ряда болезней растений. Вещества,
получаемые при помощи микробиологического синтеза, широко применяются и в других
отраслях народного хозяйства.
ОБЩИЕ
УКАЗАНИЯ ПО ГИГИЕНИЧЕСКОМУ
НОРМИРОВАНИЮ
МИКРОБНЫХ ПРЕПАРАТОВ
При производстве
микробных препаратов работающие имеют контакт главным
образом с культурой и готовым продуктом. Токсикологическая оценка последнего
проводится, в основном, согласно "Методическим указаниям к проведению
экспериментальных исследований для обоснования ПДК вредных веществ в воздухе
производственных помещений" (1969). При санитарном нормировании указанных
препаратов нельзя оперировать такими понятиями, как эмпирическая или
структурная формула вещества, молекулярный вес, точки плавления и кипения и
др., а также невозможно их определение в воздухе химическим способам.
Для обоснования ПДК
микробных препаратов необходимо оценить возможные проявления и выраженность
специфического биологического действия исследуемых веществ, связанных с
размножением микроорганизмов и включением их в аутофлору
организма, вариабельность их свойств в зависимости от климатических условий и
состава питательных сред. Комплекс белков бактериальной клетки при попадании в
организм может вызвать его сенсибилизацию, поэтому в качестве специфических
тестов рекомендуется использовать микробиологические и иммунологические
показатели.
ОСНОВНАЯ
СХЕМА ПОСТАНОВКИ ЭКСПЕРИМЕНТА
1.
Исследование штаммов-продуцентов
Для решения вопроса
о возможности использования штамма микроорганизма в качестве продуцента следует
определить его патогенность и вероятность носительства.
Степень
патогенности определяется вирулентностью и выражается количеством микробных
тел, вызывающих летальный эффект.
Ориентировочно патогенным следует считать такой штамм микроорганизма,
который при
внутрибрюшинном введении вызывает
гибель 50% подопытных
7
животных
(крысы, мыши) в дозе не более
10 микробных тел на одно животное
<*>.
--------------------------------
<*> Указанные
величины в качестве критерия вирулентности обоснованы Е.А. Мельниковой
(ВНИИГИНТОКС).
Если гибели
животных не наблюдается, то для достоверности оценки степени патогенности
штаммов следует проводить определение вирулентности и на группе ослабленных
животных с использованием некоторых функциональных и экспериментальных
нагрузок: химических (спирт, гексенал и др.),
физических (холодовая, повышенная температура),
механических (плаванье и др.) и биологических (голод и др.).
Патогенные штаммы
не допускаются к использованию в технологическом процессе.
Штаммы-продуценты,
обладающие допустимой вирулентностью, подлежат
дальнейшему исследованию на
возможность носительства (одноразовое
внутрибрюшинное
и внутрижелудочное введение
культуры продуцента
7 8
соответственно в дозах 10 и 10
микробных тел на одно животное).
Носительство
определяется путем посева (в течение 30 дней с интервалом в 2 - 3 дня) со
строгим соблюдением общепринятых правил стерильности из следующих биосубстратов: кожных покровов, слизистых оболочек полости
рта и носа, крови, печени, почек, селезенки.
Прекращать посевы
следует после 3-кратного отрицательного результата в указанный период
наблюдений.
В случае высевания
продуцента в срок более 30 дней исследуемый штамм также не рекомендуется для
использования в производстве.
2. Исследование
готового сухого микробного препарата
С целью обоснования
его ПДК в воздухе рабочей зоны готовый микробный препарат подлежит
экспериментальному токсикологическому изучению с возможным прогнозированием
отдаленных последствий. Необходимо произвести гигиеническую оценку условий
труда, обследование состояния здоровья работающих, а также разработать методику
определения содержания препарата в воздухе.
Для этого
необходимо провести:
2.1. 4-х месячную
ингаляционную затравку белых крыс для оценки препарата на:
а) токсичность -
согласно "Методическим указаниям к проведению экспериментальных
исследований для обоснования ПДК вредных веществ в воздухе производственных
помещений" (1969) с использованием специфических микробиологических и
иммунологических тестов, определяющих порог хронического действия;
б) аллергенность - согласно методическим указаниям
"Постановка исследований по выявлению сенсибилизирующих свойств и
установлению порогов аллергенного действия промышленных веществ",
одобренным Союзной проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профпатологии" (1975).
На основании
экспериментальных данных <*> обосновываются предельно допустимые
концентрации, которые выражаются в единицах микробных тел/куб. м. Одновременно
дается перерасчет в мг/куб. м.
--------------------------------
<*> Если
наполнитель потенциально опасен за счет фиброгенного
действия, нормирование проводится согласно "Временным методическим
указаниям к обоснованию ПДК аэрозолей фиброгенного
действия" (1965).
Учитывая, что при
обосновании величины коэффициента запаса веществ, обладающих аллергенным
действием, и антибиотиков указанная величина равняется 10, целесообразно и при
нормировании микробных препаратов принять аналогичный коэффициент запаса.
2.2. Гигиеническое
изучение условий труда и состояния здоровья рабочих производства микробных
препаратов. При этом следует обратить особое внимание на:
а) технологический
процесс и продолжительность воздействия пыли (кратковременное, прерывистое,
длительное, непрерывное);
б) агрегатное
состояние препарата;
в) активность и
длительность его хранения;
г) количество
микробных тел в 1 г препарата;
д) необходимый
наполнитель;
е) содержание пыли,
в т.ч. микробных тел (минимальные и средние данные)
на рабочих местах с учетом технологического процесса и времени года (в каждой
точке отбирается не менее 8 - 10 проб).