Утверждаю
Заместитель
Главного
государственного
санитарного врача
СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
6 августа 1981 г. N
2420-81
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ РОЗАЛИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие
Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия
временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических
регламентов.
Методические
указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов
при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями
растений и сорняками при МСХ.
Методические
указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования
санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном
санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
Cl
\ // \
___NH
М.м. 166,5.
│ ││ │
\\ / \
//\
N CH
3
Розалин
(действующее начало - 5-хлор-2-метилбензимидазол) - порошок светло-желтого
цвета, Т. пл. 204 - 206 °С. Хорошо растворяется в спирте, ацетоне; плохо в
воде, хлороформе, бензоле. Применяется в виде 50-процентного смачивающего
порошка. Агрегатное состояние в воздухе - пары + аэрозоль.
I.
Характеристика метода
1. Определение
основано на хроматографировании розалина в тонком слое силикагеля с последующим
обнаружением зоны локализации розалина: 1) путем обработки смесью растворов
бромфенолового синего и азотнокислого серебра (с обесцвечиванием фона раствором
лимонной кислоты); 2) с помощью паров йода и измерения оптической плотности
растворов розалина при длине волны 246 нм.
2. Отбор проб
проводится с концентрированием (силикагель).
3. Предел измерения
в анализируемом объеме пробы - 1 мкг.
4. Предел измерения
в воздухе - 0,25 мг/куб. м (при отборе 4 литров воздуха).
5. Диапазон
измеряемых концентраций - 0,25 - 5,0 мг/куб. м.
6. Определению не
мешают ГХЦГ, ДДТ, антио, рогор.
7. Граница
суммарной погрешности измерения - +/- 17,2%.
8. Ориентировочно
безопасный уровень воздействия розалина - 0,5 мг/куб. м (расчетный).
II.
Реактивы, растворы, материалы
Розалин, х.ч.
Ацетон, ч.д.а.,
ГОСТ 2603-79.
Бензол, х.ч., ГОСТ
5955-75.
Гексан, ч., ТУ
6-09-3375-78.
Спирт этиловый
96-процентный, ТУ 6-09-17-10-77.
Бромфеноловый синий, ч.д.а., ТУ 6-09-1058-76.
Серебро
азотнокислое, х.ч., ГОСТ 1277-75.
Лимонная кислота,
х.ч., ГОСТ 3652-69, 2-процентный раствор.
Йод, ч., ГОСТ
4159-79.
Вата обезжиренная.
Силикагель марки
АСМ.
Подвижная фаза: 1) бензол - ацетон (1:1);
2) этанол - гексан (1:1).
Проявляющий реактив
N 1: 0,05 г бромфенолового синего растворить в 10 мл ацетона и полученный
раствор разбавить до объема 100 мл 0,5-процентным водно-ацетоновым (1 ч. воды и
3 ч. ацетона) раствором азотнокислого серебра. Реактив хранится длительное
время.
Проявляющий реактив
N 2: пары йода (10 г йода насыпают в чашку Петри, слегка увлажняют и чашку
помещают в эксикатор).
Стандартный раствор
розалина в ацетоне концентрации 100 мкг/мл: готовят растворением 10 мг
розалина, х.ч., в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор устойчив в течение
2-х месяцев при хранении на холоде.
III.
Приборы и посуда
Аспирационное
устройство, ТУ 64-1-862-77.
Гофрированные
трубки стеклянные с рабочей длиной 55 мм (для наполнения их силикагелем).
Посуда стеклянная
химическая, ГОСТ 1770-74.
Пипетки, ГОСТ
20292-74, на 1, 2, 5, 10 мл.
Колбы мерные, ГОСТ
1770-74.
Туберкулиновые
шприцы.
Баня водяная.
Хроматографическая
камера, ГОСТ 10565-75.
Пульверизаторы
стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Пластинки для
хроматографии "Силуфол" (ЧССР) размером 150 х 160 мм.
Спектрофотометр.
IV. Условия
отбора проб воздуха
Исследуемый воздух
со скоростью 1 л/мин. аспирируют через гофрированную трубку с силикагелем. Для
определения 1/2 ПДК достаточно отобрать 4 л воздуха.
V. Условия
анализа
Гофрированные
трубки с силикагелем промывают ацетоном (20 - 30 мл) против потока поглощения,
экстракт упаривают на водяной бане до небольшого объема 0,2 - 0,3 мл, остаток
удаляют на воздухе.
Содержимое колбы
после упаривания растворяют в 0,3 - 0,5 мл ацетона.
Последующую
обработку пробы и количественное определение можно проводить двумя способами:
А. Пробу при помощи
туберкулинового шприца количественно наносят на хроматографическую пластинку
так, чтобы размер пятна не превышал 0,5 см (по диаметру). Колбу дважды
промывают небольшими порциями (0,3 мл), которые также наносят в ту же точку. Справа
и слева параллельно наносят стандартный раствор розалина, содержащий 1, 5, 10,
20 мкг препарата.
Пластинку помещают в
камеру для хроматографирования, в
которую
предварительно
за 30 мин.
налита система растворителей бензол
- ацетон
(1:1).
Край пластинки погружают
в растворитель не более чем на
0,5 см,
после
поднятия растворителя на высоту
10 см пластинку вынимают из камеры,
оставляют
на воздухе до полного испарения растворителей. Затем
пластинку
опрыскивают проявляющим реактивом N 1. После того,
как пластинка подсохнет,
пластинку
обрабатывают 2-процентным
раствором лимонной кислоты. На желтом
фоне проявляется синее
пятно розалина с R = 0,56 +/- 0,05.
f
Количественное
определение содержания розалина в анализируемой пробе проводится визуально по
интенсивности окрашивания пятен на хроматограмме и путем измерения площади
пятен стандартных растворов и проб.
Б. Содержимое
колбы после отгонки
растворителя растворяют в 0,2 мл
ацетона.
Пластинку делят по длине на три
параллельные полосы. На первую и
вторую полосы
наносят в виде сплошной линии ацетоновый раствор экстрактов.
Стенки
колбы ополаскивают небольшими
порциями ацетона (0,2 - 0,3 мл),
наносят
туда же. На
третью полосу наносят стандартный раствор розалина.
Пластинку
помещают в камеру, куда за 20 - 30 мин. до
хроматографирования
налита смесь растворителей этанол - гексан (1:1).
Когда фронт растворителей
достигает
высоты 10 см,
пластинку вынимают из камеры и после удаления
следов
растворителя первую и вторую
полосы закрывают стеклом, и пластинку
помещают
в йодную камеру
на 5 - 10 мин. Розалин обнаруживают на третьей
полосе по темно-коричневому пятну на желтом фоне с R = 0,60 +/- 0,07. По
f
проявленной
зоне отмечают участки силикагеля
на первой и второй полосах и
снимают
участки с розалином
в колбу емкостью
100 мл. Элюируют 10% мл
этилового
спирта встряхиванием в течение 30 мин. Соответственно элюируют и
зону чистого силикагеля и измеряют оптическую
плотность элюата при 246 нм.
Для количественного
определения строят калибровочный график по стандартам розалина (приготовленным
в ряде мерных колб) с концентрацией 1, 2, 5, 10, 15, 20 мкг/мл. Затем измеряют
оптическую плотность растворов при 246 нм и строят калибровочный график Д = f(с), где с - концентрация розалина. Количество
розалина определяют либо по калибровочному графику, либо сравнением оптических
плотностей стандартного и анализируемого раствора.
Концентрацию
розалина в воздухе (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:
G х V
1
Х = -------,
V х V
20
где:
G -
количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме пробы,
мкг;
V - общий объем пробы, мл;
1
V - объем
пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к стандартным
20
условиям, л.
VI.
Требования безопасности
Соблюдаются общие
правила по технике безопасности, необходимые при работе с химическими
реактивами и пестицидами.
VII.
Разработчики
Узб. НИИ санитарии,
гигиены и профзаболеваний.