Утверждены
Минздравом СССР
24 августа 1983 г.
N 2867-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЗООКУМАРИНА В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая характеристика препарата.
Зоокумарин
- 3-(альфа-
ацетонилбензил)-4-гидроксикумарин. Брутто-формула C
H O .
19
16 4
Молекулярная
масса 308,33. Синоним
- варфарин. Белое
кристаллическое
вещество с т.
пл. 161 °C. Хорошо растворим в
ацетоне,
диоксане; почти нерастворим в
95-процентном этиловом
спирте, эфире.
Не растворяется в воде,
бензоле. Малолетуч. В
воздухе может
находиться в виде аэрозоля. В воздухе рабочей зоны
ПДК 0,1 мг/куб. м.
Принцип метода.
Метод основан на хроматографировании зоокумарина в тонком слое силикагеля с последующим
обнаружением зоны локализации препарата путем использования реакции
взаимодействия с диазотированной сульфаниловой кислотой. Отбор проб проводят с
концентрированием (фильтр "синяя лента").
Метрологическая
характеристика метода. Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы 5
мкг; в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе 100 л воздуха). Диапазон измеряемых
концентраций 0,05 - 0,4 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения +/-
13%.
Избирательность
метода. Определению не мешают другие гетероциклические соединения.
Реактивы, растворы,
материалы. Зоокумарин 92-процентный. Диэтиловый эфир х.ч. Ацетон х.ч. Этиловый
спирт 96-процентный. Бензол х.ч. Сульфаниловая кислота ч.д.а.
Гидроксид калия х.ч. Нитрит натрия ч.д.а. Хлороводородная кислота х.ч. Карбонат
натрия х.ч. Фильтры бумажные "синяя лента". Подвижная фаза
бензол - ацетон (2:1).
Проявляющий
реагент: раствор 0,1 г диазотированной сульфаниловой кислоты в 20 мл
10-процентного раствора карбоната натрия. Реагент готовят непосредственно перед
анализом. Диазотированную сульфаниловую кислоту получают следующим образом.
Сульфаниловую кислоту (25 г) растворяют в 125 мл 10-процентного раствора
гидроксида калия. После охлаждения раствора добавляют 100 мл 10-процентного
раствора нитрита натрия. Затем полученный раствор по каплям прибавляют к
охлажденной льдом хлороводородной кислоте (40 мл хлороводородной кислоты, уд. в. = 1,19 в 20 мл воды) так,
чтобы температура раствора не поднималась выше 8 °C. Полученную диазотированную
сульфаниловую кислоту отфильтровывают, промывают ледяной водой, этиловым
спиртом, эфиром и сушат на воздухе. Реагент хранят в темной склянке.
Стандартный раствор
зоокумарина в ацетоне концентрации 200 мкг/мл. Готовят, растворяя
соответствующую навеску препарата (с учетом действующего начала) в ацетоне в
мерной колбе. Стандартный раствор устойчив в течение месяца.
Приборы, посуда.
Аспирационное устройство. Фильтродержатели. Чашки фарфоровые диаметром 4 - 5
см. Микропипетки вместимостью 0,1; 0,2 мл с оттянутыми концами.
Хроматографические пластинки "Силуфол" размером 150 x 150 мм. Камера
для хроматографирования. Пульверизаторы стеклянные.
Условия отбора проб
воздуха. Воздух со скоростью 10 л/мин. аспирируют через фильтр "синяя
лента". Для определения 1/2 ПДК необходимо отобрать 100 л воздуха. Срок
хранения отобранных проб в сухом и темном месте неограничен.
Ход анализа.
Фильтр переносят в стаканчик,
трижды промывают
небольшими
порциями ацетона (6
- 10 мл).
Фильтры отжимают
стеклянной
палочкой. Раствор сливают
в фарфоровую чашку
и
упаривают
на водяной бане при температуре 50 °C до объема 0,1 -
0,2 мл, который
количественно наносят на
хроматографическую
пластинку.
На эту же пластинку наносят 0,025; 0,05; 0,1; 0,2 мл
стандартного раствора зоокумарина, что соответствует
5, 10, 20, 40
мкг
препарата. Затем пластинку
помещают в хроматографическую
камеру,
в которую за 20 мин. до хроматографирования была налита
подвижная
фаза бензол -
ацетон (2:1). После
подъема фронта
подвижной
фазы на высоту
10 см пластинку вынимают из камеры,
оставляют
на воздухе до полного испарения следов растворителя и
затем обрабатывают
проявляющим реагентом. При
наличии в пробе
зоокумарина
на пластинке проявляются
желто-оранжевые пятна с
величиной R
0,86 +/- 0,1. Окраска пятен устойчива в течение 24 ч.
f
Количество
препарата определяют путем
измерения площади пятен
стандартных растворов и пробы.
Обработка
результатов анализа. Концентрацию зоокумарина в воздухе (X, мг/куб. м)
вычисляют по формуле:
GS
1
X = -----,
V S
20 2
где:
G -
количество препарата, найденное в пробе, мкг;
S , S -
площади пятен пробы и стандарта соответственно, кв.
1 2
мм;
V -
объем воздуха, отобранный для
анализа и приведенный к
20
стандартным условиям, л.
Требования
безопасности. Соблюдать все требования по технике безопасности при работе в
химических лабораториях.