Утверждаю
Заместитель
Главного
государственного
санитарного врача
СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
24 августа 1983 г.
N 2872-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
БЕНЗОИЛПРОПЭТИЛА И ЭТИЛОВОГО ЭФИРА
N-3,4-ДИХЛОРФЕНИЛАЛАНИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие
Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия
временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических
регламентов.
Методические
указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов
при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями
растений и сорняками при МСХ.
Методические
указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном
санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
COC H
/
6 5
N
│\CH(CH
)COOC H М.м. 366,3.
│ 3
2 5
// \
│ ││_
\\ / Cl
│
Cl
Бензоилпропэтил (синоним - карахол) действующее начало - N-бензоил-N-(3,4-дихлорфенил) аланин-этиловый
эфир - белое кристаллическое вещество с Т. плавления 65 - 67 °С; растворимость
при 20 °С в % масс.: в этиловом спирте - 6, метиловом спирте - 16, толуоле -
15, хлороформе - 40, ацетоне - 26.
При производстве в
воздухе рабочей зоны может находиться в виде паров и аэрозоли.
NH-CH(CH
)COOC H
│ 3
2 5
// \
│ ││_ М.м. 262,0.
\\ / Cl
│
Cl
Этиловый эфир
N-3,4-дихлорфенилаланина - белое кристаллическое вещество с т. плавления 36 -
38 °С; при температуре выше 300 °С разлагается.
Растворяется в спиртах, толуоле, м-ксилоле. Является полупродуктом в
производстве бензоилпропэтила. В воздухе может
находиться в виде паров и аэрозоли.
I.
Характеристика метода
1. Определение
основано на хроматографическом разделении бензоилпропэтила и этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина
в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации веществ с
помощью раствора марганцовокислого калия и реактива Драгендорфа.
2. Отбор проб
проводится с концентрированием (фильтр "синяя лента" и этиловый
спирт).
3. Предел измерения
в анализируемом объеме пробы - 5 мкг (для обоих веществ).
4. Предел измерения
в воздухе - 1 мг/куб. м (при отборе 5 л воздуха).
5. Диапазон измеряемых
концентраций - 1 - 8 мг/куб. м.
6. Определению не
мешают все сопутствующие в производстве вещества.
7. Граница
суммарной погрешности измерения для бензоилпропэтила
- +/- 15%, для этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина - +/- 10%.
8. Предельно
допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны: бензоилпропэтила
- 5 мг/куб. м, этилового эфира N-3,4-дихлорфенилаланина - 4 - 5 мг/куб. м
(ориентировочная, расчетная).
II.
Реактивы, растворы, материалы
Бензоилпропэтил, 99,5-процентный
Этиловый эфир
N-3,4-дихлорфенилаланина, 99,5-процентный
Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78
Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79
Аммиак, ч.д.а., ГОСТ 3760-79, 25-процентный водный раствор
Эфир диэтиловый, х.ч., ГОСТ 6262-79
Спирт этиловый, ТУ
6-09-17-10-77, 96-процентный
Калий
марганцовокислый, х.ч., ГОСТ 20490-75
Висмут азотнокислый
основной, ч., ГОСТ 4110-75
Кислота серная, х.ч., ГОСТ 4204-77
Кислота уксусная
ледяная, о.с.ч., ГОСТ 18270-72
Калий йодистый, х.ч., ГОСТ 4232-74
Кальций
сернокислый, ГОСТ 3210-77, ч.д.а.
Силикагель марки
КСК
Фильтры бумажные
"синяя лента", ТУ 6-09-1678-77
Подвижная фаза: гексан - ацетон - водный аммиак (10:5:0,8)
Проявляющий реактив
N 1: 0,5 г марганцовокислого калия растворяют в 47,5 мл воды и добавляют 2,5 мл
серной кислоты. Реактив должен быть свежеприготовленным.
Проявляющий реактив
N 2 (реактив Драгендорфа): к раствору 850 мг
основного азотнокислого висмута в 40 мл воды и 10 мл уксусной кислоты
прибавляют раствор 8 г калия йодистого в 20 мл воды. Этот раствор устойчив в
течение 10 суток. Для проявления хроматограммы 1 мл
этого раствора разбавляют 2 мл уксусной кислоты и 10 мл воды. Реактив должен
быть свежеприготовленным.
Стандартные
растворы бензоилпропэтила и этилового эфира
N-3,4-дихлорфенилаланина концентрации 1000 мкг/мл готовят растворением
соответствующих навесок (в пересчете на действующее начало) в 10 мл этилового
спирта. Устойчивы в течение трех суток.
III.
Приборы и посуда
Аспирационное
устройство
Фильтродержатели
Поглотительные
приборы Рихтера, ТУ 25-21-1081-75
Ротационный
испаритель ИР-IМ, ТУ 25-11-944-74
Камера стеклянная хроматографическая, ГОСТ 10565-75
Пульверизатор
стеклянный, ГОСТ 10391-74
Микропипетка или
стеклянный капилляр
Микрошприц емкостью 10 мкл
Колбы грушевидные
для отгонки растворителя, ГОСТ 10894-72
Стаканы химические
емкостью 50 мл, ТУ 25-11-917-74
Колбы мерные,
цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74
Пипетки различной
емкости, ГОСТ 20292-74
Пробирки с
притертыми пробками емкостью 5 мл, ГОСТ 10515-75
Пластинки для
хроматографии "Силуфол", 150 х 150 мм
Пластинки для
хроматографии стеклянные, 90 х 120 мм.
Стеклянную
пластинку, промытую содой, хромовой смесью и дистиллированной водой сушат и
протирают этиловым спиртом. Компоненты сорбционной массы обрабатывают следующим
образом. Сернокислый кальций сушат при температуре 150 °С
в течение 6 ч и просеивают через сито 100 мкг. Хранят в банке с притертой
пробкой. Силикагель размалывают на шаровой мельнице. Суспензию 250 г
измельченного силикагеля в 2,5 л дистиллированной воды помещают в химический
стакан (h = 20 см, d = 14 см). Тщательно перемешивают
содержимое стакана и оставляют на 16 мин. После этого надосадочную
жидкость переливают во второй стакан такого же размера и доливают воду до
уровня 19 см. В этом стакане суспензию отстаивают 30 мин., надосадочную
жидкость сливают в третий стакан и оставляют на 60 мин., затем переливают в
четвертый стакан и отстаивают жидкость 120 мин. Надосадочную
жидкость выливают, осадок высушивают при 130 - 140 °С
в течение суток. Стеклянные пластинки покрывают сорбционной массой. Для
приготовления сорбционной массы на 8 - 9 пластинок смешивают 14 г силикагеля, 2
г сернокислого кальция, 60 мл дистиллированной воды и перемешивают до
образования однородной массы. 2 - 3 чайных ложки массы наливают по пластинку и,
покачивая, распределяют равномерно на поверхности. Пластинки сушат 12 ч в сухом
шкафу при 100 - 110 °С. Хранят пластинки в эксикаторе.
IV. Условия
отбора проб воздуха
Воздух со скоростью
1 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные
фильтродержатель с бумажным фильтром и поглотительный
прибор, содержащий 15 мл этилового спирта. Для определения 1/2 ПДК отбирают не
более 5 л воздуха. Пробы можно хранить в течение трех суток.
V. Условия
анализа
Бумажный фильтр извлекают
из патрона (фильтродержателя) и помещают в
химический
стаканчик. Промывают бумажный фильтр тремя порциями этилового
спирта по 5
мл, собирают смыв в отгонной колбе. Туда же сливают содержимое
поглотительного
прибора. Этиловый
спирт отгоняют (ротационный испаритель,
ток
воздуха) досуха. Сухой остаток
растворяют в 0,5 мл диэтилового эфира,
тщательно
обмывая стенки колбы.
На стартовую линию хроматографической
пластинки
количественно наносят пробу, слева и справа от нее наносят смеси
стандартных
растворов бензоилпропэтила и
этилового эфира
N-3,4-дихлорфенилаланина, содержащие по 5; 10; 20;
40 мкг каждого вещества.
Размер
пятна должен быть
не более 1 см. Пластинку помещают
в наклонном
положении
в хроматографическую камеру,
в которую за
30 мин. до
хроматографирования был
налит подвижный растворитель - гексан:ацетон:водный
аммиак
(10:5:0,8) в таком количестве, чтобы пластинка погружалась не более
чем на 0,5
см. Когда фронт растворителя
поднимается на 10 см, пластинку
вынимают
из камеры и
подсушивают на воздухе
в вытяжном шкафу. Затем
пластинку
опрыскивают проявляющим реактивом
N 1, при этом обнаруживают
желтые
пятна этилового эфира
N-3,4-дихлорфенилаланина (R 0,7).
Для
f
количественного определения измеряют площадь пятна
пробы и соответствующего
ему по размеру
и интенсивности окраски
пятна стандартной шкалы. Затем
пластинку
опрыскивают проявляющим реактивом
N 2. При этом проявляются
коричневые
пятна бензоилпропэтила (R
0,6). Окраска пятен устойчива в
f
течение
нескольких минут. Для количественного определения также
измеряют
площадь
соответствующего по размеру
и интенсивности окраски
пятна
стандартной шкалы.
Концентрацию бензоилпропэтила или N-3,4-дихлорфенилаланина этилового
эфира в воздухе (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:
G х S
ст пр
Х = ---------,
S х V
ст 20
где:
G -
количество вещества в пятне стандарта, мкг;
S - площадь пятна пробы, кв. мм;
пр
S - площадь пятна стандарта, кв. мм;
ст
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к стандартным
20
условиям, л.
VI.
Требования безопасности
Соблюдать все
необходимые требования техники безопасности при работе в химических
лабораториях.
VII.
Разработчики
Всесоюзный
научно-исследовательский технологический институт гербицидов и регуляторов
роста растений (ВНИТИГ), г. Уфа.