Утверждаю
Заместитель
Главного
государственного
санитарного врача
СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
27 ноября 1984 г. N
3154-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ
АНОМЕТРИНА-Н В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
I. Краткая
характеристика препарата
Анометрин-Н - отечественный препарат из группы синтетических
пиретроидов. Растворим в большинстве органических
растворителей.
CH CH
3\ / 3
\/
/\
Мол. масса 391,2.
H──────────H O
/ \ // \/ \// \
Cl C=CH C -O-CH
──│ ││
│ ││
2 ││ 2
\\ / \\ /
O
3-феноксибенолл-2,2-диметил-3-(2,2-дихлорвизил)-циклопропанкарбоксилат.
При применении
может находиться в виде аэрозоля.
I.
Характеристика метода
1. Определение
основано на хроматографировании анометрина-Н
на неподвижной фазе SE-30 с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР)
или в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации
препарата путем обработки раствором нитрата серебра.
2. Отбор проб проводится
с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента" или стеклянный
фильтр с пористой пластиной).
3. Предел измерения
в анализируемом объеме пробы: ГЖХ - 3 нг, ТСХ - 3
мкг.
4. Предел измерения
в воздухе (при отборе 40 л воздуха):
ГЖХ - 0,05 мг/куб.
м, ТСХ - 0,1 мг/куб. м.
5. Диапазон
измеряемых концентраций: ГЖХ - 0,05 - 0,5 мг/куб. м, ТСХ - 0,1 - 0,5 мг/куб. м.
6. Определению не
мешают наполнители технического препарата, хлор-, фосфорорганические пестициды.
7. Границы
суммарной погрешности: ГЖХ - +/- 13,8%, ТСХ - +/- 20%.
8. ОБУВ - 0,3
мг/куб. м.
II.
Реактивы, растворы, материалы
Ацетон ч, ГОСТ 2603-79.
Гептан ч, ТУ 6-09-3375-78.
Диэтиловый эфир хч, ГОСТ 6262-79.
Сульфат натрия
безводный свежепрокаленный, ГОСТ 4166-76.
Фильтры бумажные
"синяя лента", ТУ 6-09-1678-77.
Аммиак 25% водный,
ГОСТ 3760-79.
Нитрат серебра,
ГОСТ 1277-81, хч.
Пластинки "Силуфол" (ЧССР).
Подвижная фаза - гексан - ацетон (95:5).
Проявляющий
реагент: 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды,
прибавляют 7 мл аммиака и доводят объем до 100 мл ацетоном. Хранят в темном
месте. Для обработки 1 пластинки берут 7 - 10 мл раствора.
Стандартный раствор
анометрина-Н N 1, содержащий 100 мкг/мл вещества,
готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100
мл гексана. Хранят в холодильнике не более 2 месяцев.
К методу ГЖХ:
Неподвижная фаза -
5% SE-30, нанесенная на Хроматом
N-AW (0,16 - 0,20 мм).
Азот газообразный
особой чистоты, ГОСТ 9293-74.
Стандартный раствор
N 2. Для приготовления раствора с концентрацией 2 мкг/мл вносят 5 мл раствора N
1 в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки гексаном.
Хранят в холодильнике не более 2-х недель.
III.
Приборы и посуда
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77.
Фильтродержатели.
Стеклянный фильтр с
пористой пластиной (фильтр Шотта) N 2 (40 мк).
Ротационный
вакуумный испаритель для отгонки растворителей.
Водяная баня, ТУ
46-22-608-75.
Колбы конические
емкостью 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Колбы грушевидные
емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Воронки химические,
диаметр 6 см, ГОСТ 8613-75.
Колбы мерные на 25,
100 мл, ГОСТ 1770-74.
Цилиндры мерные,
ГОСТ 1770-74.
К методу ТСХ:
Пластинки для
хроматографии "Силуфол" (ЧССР).
Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-74.
Пульверизатор
стеклянный, ГОСТ 10391-74.
К методу ГЖХ:
Хроматограф с
детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) или с детектором по захвату
электронов (ДЗЭ) (марки "Цвет", "Газохром"
или др.).
Микрошприцы на 10 мкл.
Колонка стеклянная,
длина 0,5 м, диаметр 3 мм.
Секундомер.
IV. Условия
отбора проб воздуха
Воздух со скоростью
2 л/мин. аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр "синяя лента"
(или стеклянный фильтр Шотта) в течение 20 мин.
Длительность хранения пробы в холодильнике не более 2-х суток.
V. Условия
анализа
Бумажный фильтр,
содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в
коническую колбу и заливают 30 мл смеси гексан -
ацетон (9:1). Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 30 мин. Экстракт сушат
безводным сульфатом натрия, сливают в колбу ротационного испарителя и
концентрируют до объема ~ 0,1 - 0,2 мл при температуре бани не выше 50 °C.
Досуха испаряют на воздухе. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана
и проводят определение методами ГЖХ и ТСХ.
Если для поглощения
аэрозоля использован стеклянный фильтр с пористой пластиной, то поверхность
фильтра смывают дважды по 20 мл смеси гексан - ацетон
(9:1), тщательно обмывая стенки фильтра. Сливают экстракт через слой сульфата
натрия в колбу для отгонки растворителей. Концентрируют так, как описано выше,
и далее проводят определение методами ТСХ и ГЖХ.
Определение методом
ГЖХ
Детектор постоянной
скорости рекомбинации.
Колонка стеклянная
0,5 м, внутренний диаметр - 3 мм.
Твердый носитель - Хроматон N-AW (0,16 - 0,20 мм).
Жидкая фаза - 5%
SE-30.
Температура
термостата колонки 220 °C.
Температура
испарителя 230 °C.
Температура
термостата детектора 250 °C.
Газ-носитель - азот
особой чистоты.
Скорость азота 70
мл/мин.
Скорость
диаграммной ленты 240 мм/час.
Объем вводимой
пробы 5 мкл.
-12
Шкала 20 x
10 А.
Линейный диапазон
детектирования - 2 - 15 нг.
Время удерживания -
2,72 мин.
Количественное
определение препарата проводят по методу абсолютной калибровки.
Концентрацию
препарата (X) в воздухе в мг/куб. м рассчитывают по формуле:
G x V x S
1 пр
X = -------------,
S x V x V
ст 20
где:
G -
количество препарата во введенном в хроматограф
стандартном
растворе, мкг;
S - площадь
пика стандартного раствора
препарата, введенного в
ст
хроматограф, кв. мм;
S - площадь пика препарата в используемом
растворе пробы, кв. мм;
пр
V - общий объем пробы, мл;
1
V - объем
экстракта, введенный в хроматограф, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к стандартным
20
условиям, л.
Определение методом
ТСХ
Пробу,
сконцентрированную до объема 0,2 - 0,3 мл, количественно наносят при помощи
капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку,
чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5
см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают порциями диэтилового эфира, который также наносят в центр пятна.
Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов пестицида,
содержащих 2 мкг, 3 мкг, 10 мкг препарата.
Пластинку с нанесенными
растворами помещают в хроматографическую
камеру,
в которую за
30 мин. до хроматографирования налита
смесь
гептан - ацетон (98:2). После хроматографирования пластинку высушивают на
воздухе, после чего
обрабатывают из пульверизатора проявляющим реагентом,
подсушивают
и подвергают УФ-облучению в
течение 15 - 20 мин. Анометрин-Н
проявляется
в виде двух пятен (цис- и трансизомеры) серо-черного цвета.
Величины R -
0,33 и 0,45.
f
Количество
препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площадей пятен
пробы и стандартного раствора. Строится градуировочный
график зависимости площади от количества препарата в мкг и интенсивности
окраски пятна. Прямолинейная зависимость между площадью и интенсивностью
окрашивания пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в интервале 2 -
10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона
(10 мкг), то для хроматографирования необходимо брать
аликвотную часть экстракта (0,1, 0,2 мл и т.д.) параллельной пробы.
Концентрацию
препарата (Х) в воздухе в мг/куб. м рассчитывают по формуле:
G x V
1
X = -------,
V x V
20
где:
X - количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме пробы,
мкг;
V - общий объем пробы, мл;
1
V - объем
пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V - объем воздуха, отобранный для анализа и
приведенный к стандартным
20
условиям, л.
VI.
Требования безопасности
Выполняются в
соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при
работе в лабораториях (отделениях, отделах) санэпидучреждений
системы МЗ СССР", N 2455-81 от 20.10.81.