Утверждены
Минздравом СССР
3 января 1985 г. N
3195-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ РЕЛДАНА И ПРОДУКТА
ЕГО ГИДРОЛИЗА 3,5,6-ТРИХЛОР-2-ПИРИДИНОЛА В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Краткая характеристика препаратов.
Релдан - O,O-диметил-O-
(3,5,6-трихлорпиридил-2-)тиофосфат. Брутто-формула C H Cl NPSO .
7 7 3 3
Молекулярная масса 322,6. Синонимы - хлорпирифосметил, даурелдан,
петрал.
Релдан - белый
кристаллический порошок со слабым запахом меркаптана. Т. пл. 45,5 - 46,5 °C.
Растворимость в воде 4 мг/л. Хорошо растворим в ацетоне, ацетонитриле, бензоле,
сероуглероде, хлороформе, метиленхлориде, диэтиловом эфире, плохо растворим в
алифатических углеводородах и спиртах.
Во влажной
атмосфере и воде под действием УФ-света релдан
гидролизуется до 3,5,6-трихлор-2-пиридинола и O,O-диметилфосфата.
Летучесть 0,014
мг/куб. м при 0 °C, 0,75 мг/куб. м при 25 °C, 3,1 мг/куб. м при 35 °C. В
воздухе может находиться в виде аэрозоля и паров. ОБУВ релдана в воздухе
рабочей зоны 0,3 мг/куб. м.
Принцип метода.
Методика основана на определении релдана методом газожидкостной и тонкослойной
хроматографии. Определение релдана методом ГЖХ проводят на газовом
хроматографе, снабженном ТИД. Определение релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола
методом ТСХ основано на хроматографировании препаратов в тонком слое силикагеля
и обнаружении обоих соединений по реакции с нитратом серебра или обнаружении
только релдана по реакции с бромфеноловым реагентом.
Пробы отбирают с
концентрированием.
Метрологическая
характеристика. Метод ГЖХ. Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме
0,5 нг, в воздухе - 0,02 мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха). Диапазон линейной
зависимости величины хроматографируемого сигнала от величины количества
введенного в хроматограф релдана 0,5 - 10 нг. Диапазон измеряемых концентраций
0,02 - 0,5 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения +/- 15,8%.
Метод ТСХ. При
применении реагента на основе нитрата серебра нижний предел измерения релдана и
3,5,6-трихлор-2-пиридинола 0,3 мкг (0,06 мг/куб. м); при применении реагента на
основе бромфенолового синего нижний предел измерения релдана 0,5 мкг (0,1
мг/куб. м). Граница суммарной погрешности измерения релдана +/- 19,7%,
3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 20,6%.
Избирательность
метода. При определении релдана методом ГЖХ с ТИД на колонке с фазой 5% SE-30
определению может мешать метафос. Для идентификации релдана в присутствии
метафоса используется альтернативная колонка (фаза 5% OV-1), на которой время
удерживания релдана по отношению ко времени удерживания метафоса равно 0,76.
Сочетание методов
ГЖХ и ТСХ также позволяет идентифицировать релдан в присутствии метафоса и
других ФОП и ХОП.
Реактивы и растворы. н-Гексан ч. Ацетон ч. Диэтиловый
эфир х.ч. Фильтры бумажные "синяя лента". Пенополиуретан (порезанный
ножницами до размера частиц 3 - 5 мм), отмытый ацетоном в течение 12 ч в
аппарате Сокслета. Нитрат серебра х.ч. Аммиак водный ч.д.а.
Бромфеноловый синий (индикатор) ч.д.а. Уксусная кислота х.ч. Лимонная кислота
особой чистоты. Безводный сульфат натрия ч.д.а. Пластинки
"Силуфол". Неподвижные фазы: 5% SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 -
0,20 мм), 5% OV-1 на диатомите CLQ (80 - 100 меш). Азот особой чистоты. Водород
из баллона или получаемый из генератора водорода. Воздух из баллона или
нагнетаемый компрессором.
Проявляющие
реагенты:
1) реагент
на основе AgNO . 0,5 г
AgNO растворяют в 5 мл
3 3
дистиллированной
воды, после чего
прибавляют 7 мл
аммиака и
доводят объем раствора до 100 мл ацетоном;
2) реагент
на основе бромфенолового синего и AgNO . Готовят
3
два раствора. Раствор а - 0,5-процентный водно-ацетоновый раствор
AgNO (1 часть
воды и 3 части ацетона),
раствор б - 0,05 г
3
бромфенолового
синего растворяют в
10 мл ацетона.
Раствор б
разбавляют раствором а до
объема 100 мл.
Хранят в темном
прохладном месте. Для
осветления фона пластинки после опрыскивания
проявляющей
смесью б используют 5-процентный раствор
уксусной
кислоты
или 2-процентный раствор
лимонной кислоты. Релдан
проявляется в виде сине-лилового пятна.
Основные
стандартные растворы релдана (N 1) и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола (N 2) в ацетоне
с содержанием 100 мкг/мл. Хранят в холодильнике в течение 3 мес.
Рабочие стандартные
растворы релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола в ацетоне (1, 2, 5 мкг/мл)
готовят соответствующим разбавлением из основных стандартных растворов. Хранят
в холодильнике 6 дней.
Приборы и посуда.
Хроматограф с ТИД. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм,
заполненная 5% SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм). Альтернативная
стеклянная колонка длиной 1,8 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5%
OV-1 на диатомите CLQ (80 - 100 меш). Аспирационное устройство. Аппарат для
встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель с набором колб. Колбы: мерные
вместимостью 25, 50, 100 мл; грушевидные вместимостью 50 мл. Стаканы химические
вместимостью 50, 100 мл. Пробирки мерные на шлифах вместимостью 5 - 10 мл.
Пипетки вместимостью 1, 5, 10 мл. Микропипетки вместимостью 0,1 мл. Микрошприцы
МШ-10М. Фильтродержатели. Аллонжи, плотно заполненные пенополиуретановой
крошкой.
Отбор проб. Воздух,
содержащий релдан в виде паров и аэрозоля, протягивают со скоростью 1 л/мин.
через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель, и
последовательно соединенный с фильтродержателем аллонж с пенополиуретановой
крошкой. Для определения 1/2 ПДК следует отобрать 4 л воздуха. Закрытые пробы
могут сохраняться в холодильнике до 10 дней.
Ход анализа.
Подготовка проб к анализу. Бумажные фильтры, содержащие аэрозоль, вынимают из
фильтродержателя, измельчают ножницами (до размера частиц 1 см), помещают в коническую
колбу и заливают 25 мл ацетона, закрывают колбу и встряхивают ее на аппарате
для встряхивания 30 мин. Сливают растворитель, экстракцию повторяют.
Объединенные экстракты переносят в колбу для отгонки растворителей и упаривают
на вакуумном ротационном испарителе при температуре бани не более 40 °C до 2
мл. В эту же колбу переносят экстракт, полученный от промывки аллонжа. Аллонж с
пенополиуретановой крошкой промывают смесью н-гексана с ацетоном (3:1). Для
этого конец аллонжа, который был присоединен со стороны фильтродержателя,
опускают в колбу для отгонки растворителей, а к противоположному концу
присоединяют встык воронку и промывают сорбент 40 - 50 мл смеси, собирая
экстракт в колбу. Растворитель отгоняют, как описано выше, до 2 - 3 мл. Остаток
растворителя отгоняют под вакуумом при комнатной температуре до 0,5 мл и
переносят в мерную пробирку со шлифом, ополаскивая колбу н-гексаном. Доводят
объем в пробирке до 1 мл.
Условия
газохроматографического анализа. Используют ТИД. Пробы
вводят через самоуплотняющуюся мембрану. Скорость
потока, мл/мин.:
газа-носителя
- 23, водорода - 14 - 17, воздуха - 400. Скорость
-10
движения
диаграммной ленты 240 мм/ч. Шкала электрометра 2 x 10
А. Объем вводимой пробы 5 мкл.
При
использовании в качестве неподвижной фазы 5% SE-30 температура колонки 190 °C,
испарителя - 210 °C, линейный диапазон детектирования 0,5 - 10 нг, время
удерживания 4 мин. 30 с. При использовании в качестве неподвижной фазы 5% OV-1
температура колонки 225 °C, испарителя - 240 °C, линейный диапазон
детектирования 1 - 15 нг, время удерживания 5 мин. 48 с.
Условия анализа
методом тонкослойной хроматографии. Экстракт после определения методом ГЖХ
упаривают до 0,2 - 0,3 мл и количественно наносят при помощи микропипетки на
хроматографическую пластинку "Силуфол" так, чтобы диаметр пятна не
превышал 0,5 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края
пластинки. Пробирку с экстрактом 2 - 3 раза ополаскивают небольшими порциями
(по 0,2 - 0,3 мл) эфира, который также наносят в центр первого пятна. Справа и
слева от пробы на расстоянии 2 см от нее наносят стандартные растворы,
содержащие 1, 3, 5 или 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами
помещают в хроматографическую камеру, в которую налита смесь н-гексана с
ацетоном (9:1). Время насыщения камер 30 мин. Край пластинки должен быть
погружен в раствор не глубже чем на 0,5 см. После поднятия фронта подвижного
растворителя на 10 см пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько
минут на воздухе для испарения растворителя. Затем пластинку опрыскивают одним
из проявляющих реагентов.
После обработки
реагентом на основе
AgNO (N 1) пластинку
3
помещают под источник УФ-света на 5 мин. до появления пятен серо-
черного
цвета. Нижний предел
обнаружения релдана и
3,5,6-трихлор-2-пиридинола 0,3 мкг. Величина R релдана составляет
f
0,52, 3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 0,29.
После
обработки бромфеноловым реагентом пластинку оставляют на
5 мин. на
воздухе, а затем опрыскивают раствором 5-процентной
уксусной
или 2-процентной лимонной кислоты для осветления фона.
Релдан проявляется в виде синего пятна на желтом
фоне. Величина R
f
равна 0,52,
нижний предел обнаружения 0,5 мкг;
3,5,6-трихлор-2-пиридинол этим реагентом не
обнаруживается.
Обработка
результатов анализа. При использовании метода ГЖХ количественное определение
проводят методом абсолютной калибровки. Для этого до и после анализа проб
вводят в хроматограф по 5 мкл рабочих стандартных растворов, измеряют высоту
пиков и вычисляют среднее арифметическое из пяти определений. Если при введении
в хроматограф аликвотной части (5 мкл) конечного экстракта пробы получают
слишком большие пики или происходит "зашкаливание", пробу разбавляют
н-гексаном.
Количественное
определение при использовании метода ТСХ проводят путем сравнения интенсивности
окраски и измерения площади пятна пробы и того стандарта, площадь пятна
которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы.
Концентрацию
препарата в пробе (X, мг/куб. м) рассчитывают по формуле:
GH V
1 2
X = -------,
H V V
2 1 20
где:
G -
количество препарата в
хроматографируемом объеме
стандарта, нг;
H - высота пика (или площадь пятна) на хроматограмме
пробы,
1
мм (кв. мм);
H -
высота пика (или
площадь пятна) на
хроматограмме
2
стандарта, мм (кв. мм);
V - хроматографируемый объем пробы, мкл;
1
V - общий объем анализируемого раствора, мл;
2
V - объем воздуха, отобранный для анализа
и приведенный к
20
стандартным условиям, л.
Требования
безопасности. Следует соблюдать правила безопасности при работе в химических
лабораториях.