Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
30 декабря 1999
года
Дата введения:
с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ
КИСЛОТЫ
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.805-99
Методические
указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии
"Научные основы гигиены труда и профпатологии".
Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации,
Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому
нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации
Г.Г. Онищенко в декабре 1999 г.
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(сборник 35) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия
(ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методические
указания разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические
требования".
Методики
выполнены с использованием современных методов исследования, метрологически аттестованы и дают возможность
контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ
в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно
допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН
2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных
веществ в воздухе рабочей зоны".
О
//
NН -СН -СН -СН -С
2 2
2 2 \
ОН
С Н NО М.
м. 103,12
4 9 2
Гамма-аминомасляная
кислота (аминалон) - белый кристаллический порошок с
температурой плавления 200° - 205 °С (с разложением).
Легко растворим в воде, растворим в спирте, практически не растворим в эфире и
хлороформе.
В воздухе находится
в виде аэрозоля.
Обладает
общетоксическим действием.
ПДК в воздухе - 2,0
мг/куб. м.
Характеристика
метода
Определение
основано на хроматографировании вещества в тонком
слое на пластинках Сорбфил ПТСХ-II-А
с последующим обнаружением хроматограмм раствором нингидрина и денситометрировании
окрашенных зон при длине волны 513 нм.
Отбор проб проводят
с концентрированием на фильтр.
Нижний предел
измерения вещества в анализируемом объеме - 0,5 мкг.
Нижний предел
измерения вещества в воздухе - 1,0 мг/куб. м (при отборе 5,0 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций от 1,0 до 20,0 мг/куб. м.
Определению не
мешают декстрамин, треоамин
Д(-), треоамин Д.
Суммарная
погрешность не превышает +/- 20%.
Время выполнения
измерения 2 часа, включая отбор проб.
Приборы,
аппаратура, посуда
Спектрофотометр Спекорд М-40 с приставкой для измерения отражения с
фотометрическим шаром, денситометр БИАН-170.
Аспирационное устройство,
модель 822, ТУ 64-1-86.2-72.
Фильтродержатели.
Хроматогрфическая камера для ТСХ размером 10 х 20 см, ГОСТ 23932-79Е.
Пластинки для
тонкослойной хроматографии Сорбфил ПТСХ-II-А, ТУ 26-11-17-89.
Стаканы химические
вместимостью 50 мл, ГОСТ 25336-82Е.
Вакуумная
установка.
Колбы грушевидные
вместимостью 25 мл, ГОСТ 25336-82Е.
Пипетки
вместимостью 1, 2, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Сушильный шкаф.
Реактивы,
растворы, материалы
Аминалон, ФС 42-1903-89.
Этиловый спирт,
ГОСТ 5963-67.
Метиловый спирт,
ГОСТ 6965-77.
Хлороформ, ТУ
6-09-4263-76.
Кислота уксусная
ледяная, ТУ 61-65.
Аммиак водный, 25%
раствор, ГОСТ 3760-79.
Нингидрин, х.ч.
Подвижный
растворитель: метанол-25% раствор аммиака (50:3).
Проявляющий
реактив: в мерную колбу на 100 мл помещают 0,2 г нингидрина,
20 мл уксусной кислоты и доводят объем до метки этиловым спиртом.
Градуировочный раствор N 1 с концентрацией 200 мкг/мл готовят растворением 0,0200 г
вещества в смеси этанол - вода дистиллированная - хлороформ (70:10:20) в мерной
колбе вместимостью 100 мл.
Рабочие градуировочные растворы, содержащие 5-10-20-40-60-80-100
мкг/мл вещества, готовят соответствующим разбавлением смесью этанол - вода
дистиллированная - хлороформ (70:10:20 мл) градуировочного
раствора N 1. Растворы устойчивы в течение недели при хранении в холодильнике.
Фильтры АФА-ВП-10,
ТУ 85-743-80.
Отбор пробы
воздуха
Воздух с объемным
расходом 1,0 л/мин. аспирируют через фильтр
АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 5,0
л воздуха. Хранение проб допускается в течение 2 недель.
Подготовка
к измерению
На линию
старта пластинки Сорбфил наносят
в виде точек
(диаметр
пятна не должен превышать 0,5 см)
по 0,1 мл стандартных
растворов,
содержащих 5-10-20-40-60-80-100 мкг/мл вещества, что
соответствует 0,5-1-2-4-6-8-10 мкг аминалона. Пластинку высушивают
на
воздухе в течение
3 мин. и
помещают в камеру
для
хроматографирования со смесью растворителей метанол-25%
раствор
аммиака
(50:3мл). Камера предварительно насыщается в течение
1 часа, для
лучшего насыщения стенки
камеры покрыты
фильтровальной бумагой. После того, как фронт
растворителя пройдет
10 см, пластинку
вынимают из камеры, подсушивают на воздухе и
помещают
в сушильный шкаф при температуре
100 °С на 5 мин. Затем
пластинку опрыскивают проявляющим реактивом и
помещают в сушильный
шкаф при
температуре 100 °С на 2 мин. Аминалон
проявляется в виде
оранжево-коричневых пятен на светлом фоне с R = 0,25 +/- 0,02.
f
Интенсивность
окраски пятен вещества измеряют на спектрофотометре Спекорд
М-40 с приставкой для отражения с фотометрическим шаром при длине волны 513 нм по отношению к фону. В качестве фона используется
участок исследуемой пластинки без вещества. Для каждой концентрации измеряют
отражение (Т) в %. Оптическая
плотность (Д) и отражение (Т) связаны между собой соотношением:
Д = -lg Т,
где Т выражено в %, тогда:
1
Д = lg - х 100 или Д
= 2 - lg Т.
Т
По средним
результатам из пяти определений строят градуировочный
график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных хроматограмм, на
ось абсцисс - соответствующее им количество вещества в мкг в анализируемой
пробе.
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в химический стакан, добавляют в него 6 мл растворителя (смеси
этанол - вода дистиллированная - хлороформ в соотношении 70:10:20 мл) и
оставляют на 15 мин., периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего
растворения вещества. Степень десорбции вещества с фильтра - 96%.
Раствор переносят в
грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 60 - 70 °С.
Сухой остаток растворяют в 1,0 мл смеси этанол - вода дистиллированная -
хлороформ (70:10:20 мл) и используют полученный раствор для анализа.
Пробу в количестве
0,1 мл наносят на пластинку Сорбфил, одновременно
рядом с пробой наносят раствор свидетеля, содержащий 6,0 мкг аминалона. Пластинки обрабатывают так же, как стандарты при
построении градуировочного графика. Измеряют
отражения пятен вещества на спектрофотометре Спекорд
М-40 при длине волны 513 нм. Затем вычисляют значение
оптической плотности (Д) и по градуировочному графику
находят содержание вещества в пробе.
Расчет
концентрации
Концентрацию аминалона в воздухе "С" (мг/куб. м) вычисляют по
формуле:
а х в
С = -----,
б х V
где:
а - масса вещества,
найденная в пробе, мкг;
в - общий объем
раствора пробы, мл;
б - объем раствора пробы, используемый для анализа, мл;
V - объем воздуха
(в л), отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям (см.
Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и
давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:
V (273 + 20) х Р
t
V = ------------------,
20 (273 + t) х 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
Р - барометрическое давление,
кПа (101,33 кПа
= 760
мм рт. ст.);
t -
температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства
расчета V следует
пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха
к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТЫ
ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА
ВОЗДУХА К
СТАНДАРТНЫМ УСЛОВИЯМ
|
°С
|
Давление Р, кПа/мм рт. ст.
|
|
97,33/
730
|
97,86/
734
|
98,4/
738
|
98,93/
742
|
99,46/
746
|
100/750
|
100,53/
754
|
101,06/
758
|
101,33/
760
|
101,86/
764
|
|
-30
|
1,1582
|
1,1646
|
1,1709
|
1,1772
|
1,1836
|
1,1899
|
1,1963
|
1,2026
|
1,2058
|
1,2122
|
|
-26
|
1,1393
|
1,1456
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1644
|
1,1705
|
1,1768
|
1,1831
|
1,1862
|
1,1925
|
|
-22
|
1,1212
|
1,1274
|
1,1336
|
1,1396
|
1,1458
|
1,1519
|
1,1581
|
1,1643
|
1,1673
|
1,1735
|
|
-18
|
1,1036
|
1,1097
|
1,1158
|
1,1218
|
1,1278
|
1,1338
|
1,1399
|
1,1460
|
1,1490
|
1,1551
|
|
-14
|
1,0866
|
1,0926
|
1,0986
|
1,1045
|
1,1105
|
1,1164
|
1,1224
|
1,1284
|
1,1313
|
1,1373
|
|
-10
|
1,0701
|
1,0760
|
1,0819
|
1,0877
|
1,0986
|
1,0994
|
1,1053
|
1,1112
|
1,1141
|
1,1200
|
|
-6
|
1,0540
|
1,0599
|
1,0657
|
1,0714
|
1,0772
|
1,0829
|
1,0887
|
1,0945
|
1,0974
|
1,1032
|
|
-2
|
1,0385
|
1,0442
|
1,0499
|
1,0556
|
1,0613
|
1,0669
|
1,0726
|
1,0784
|
1,0812
|
1,0869
|
|
0
|
1,0309
|
1,0366
|
1,0423
|
1,0477
|
1,0535
|
1,0591
|
1,0648
|
1,0705
|
1,0733
|
1,0789
|
|
+2
|
1,0234
|
1,0291
|
1,0347
|
1,0402
|
1,0459
|
1,0514
|
1,0571
|
1,0627
|
1,0655
|
1,0712
|
|
+6
|
1,0087
|
1,0143
|
1,0198
|
1,0253
|
1,0309
|
1,0363
|
1,0419
|
1,0475
|
1,0502
|
1,0557
|
|
+10
|
0,9944
|
0,9999
|
1,0054
|
1,0108
|
1,0162
|
1,0216
|
1,0272
|
1,0326
|
1,0353
|
1,0407
|
|
+14
|
0,9806
|
0,9860
|
0,9914
|
0,9967
|
1,0027
|
1,0074
|
1,0128
|
1,0183
|
1,0209
|
1,0263
|
|
+18
|
0,9671
|
0,9725
|
0,9878
|
0,9880
|
0,9884
|
0,9936
|
0,9989
|
1,0043
|
1,0069
|
1,0122
|
|
+20
|
0,9605
|
0,9658
|
0,9711
|
0,9783
|
0,9816
|
0,9868
|
0,9921
|
0,9974
|
1,0000
|
1,0053
|
|
+22
|
0,9539
|
0,9592
|
0,9645
|
0,9696
|
0,9749
|
0,9800
|
0,9853
|
0,9906
|
0,9932
|
0,9985
|
|
+24
|
0,9475
|
0,9527
|
0,9579
|
0,9631
|
0,9683
|
0,9735
|
0,9787
|
0,9839
|
0,9865
|
0,9917
|
|
+26
|
0,9412
|
0,9464
|
0,9516
|
0,9566
|
0,9618
|
0,9669
|
0,9721
|
0,9773
|
0,9799
|
0,9851
|
|
+28
|
0,9349
|
0,9401
|
0,9453
|
0,9503
|
0,9555
|
0,9605
|
0,9657
|
0,9708
|
0,9734
|
0,9785
|
|
+30
|
0,9288
|
0,9339
|
0,9391
|
0,9440
|
0,9432
|
0,9542
|
0,9594
|
0,9645
|
0,9670
|
0,9723
|
|
+34
|
0,9167
|
0,9218
|
0,9268
|
0,9318
|
0,9368
|
0,9418
|
0,9468
|
0,9519
|
0,9544
|
0,9595
|
|
+38
|
0,9049
|
0,9099
|
0,9149
|
0,9199
|
0,9248
|
0,9297
|
0,9347
|
0,9397
|
0,9421
|
0,9471
|
|