Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1987 г. N
4379-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ГЛИФОСАТА, ГЛИФОСИНА И
ГЛИЦИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая характеристика препаратов. Глифосат -
N-фосфонометилглицин. Брутто-формула C H O PN. Молекулярная масса
3 8 5
169,1.
Синоним - раундап.
Белое кристаллическое вещество. Т. пл.
230 °C (с
разложением). Нелетуч, нерастворим
в органических
растворителях, плохо растворим в воде. В воздухе может
находиться
в виде аэрозоля. ПДК в воздухе рабочей зоны 3,0
мг/куб. м.
Глифосин - бис-фосфонометилглицин. Брутто-формула C H NO P .
4 11 8 2
Молекулярная масса 263,096. Белое кристаллическое
вещество. Т. пл.
208 - 210 °C
(с разложением). Нелетуч, нерастворим в органических
растворителях. Плохо растворим в воде. В воздухе может
находиться
в виде аэрозоля. ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.
Глицин - аминоуксусная кислота.
Брутто-формула C H NO .
2 5 2
Молекулярная
масса 75,07. Белое
кристаллическое вещество. Т. пл.
233 °C (с
разложением). Малолетуч, плохо растворим в
органических
растворителях. Растворимость
в воде 235 г
на 100 г. Возможный
метаболит глифосина, глифосата. В воздухе
может находиться в виде
аэрозоля. ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.
Принцип метода. Метод основан на определении препаратов методом ТСХ (пластинки
"Силуфол") с использованием в качестве
подвижной фазы смеси этанол - вода - водный аммиак (22:20:0,25) для определения
глифосата и глицина, смеси изопропанол
- вода - водный аммиак (6:6:1) - для глифосина с
последующим обнаружением зон локализации глифосата и
глицина нингидриновым реактивом, глифосина
- о-толидиновым реактивом после реакции
N-галогенирования.
Метрологическая
характеристика метода. Нижний предел измерения в анализируемом объеме раствора,
мкг: глифосата - 0,5; глифосина
- 1,0; глицина - 0,25. Нижний предел измерения в воздухе (при отборе 200 л
воздуха), мг/куб. м: глифосата - 0,25; глифосина - 0,50; глицина - 0,125. Диапазон измеряемых
концентраций, мг/куб. м: глифосата - 0,25 - 2,5; глифосина - 0,50 - 5,0; глицина - 0,125 - 1,25. Граница
суммарной погрешности измерения не превышает +/- 20%.
Избирательность
метода. Определению не мешают соединения, применяющиеся в производстве, фосфор-
и азотсодержащие гербициды, а также исследуемые соединения.
Реактивы, растворы, материалы.
Глифосат
99,5-процентный.
Глифосин 99,5-процентный. Глицин
х.ч.
Этиловый спирт
96-процентный. Изопропиловый спирт ч. Бутиловый
спирт нормальный.
Водный аммиак ч.д.а. Ледяная
уксусная кислота. Хлороводородная
кислота х.ч. Нингидрин ч.д.а. о-Толидин ч.
Йодид калия.
Перманганат
калия. Фильтры аэрозольные АФА-ВП-20 или АФА-ХП-20.
Пластинки "Силуфол"
УФ .
254
Подвижная фаза N 1
(для хроматографирования глифосата
и глицина): смешивают этанол, воду, аммиак водный в соотношении 22:20:0,25;
подвижная фаза N 2 (для хроматографирования глифосина): смешивают изопропанол,
воду, аммиак водный в соотношении 6:6:1.
Проявляющий реагент
N 1 (нингидриновый): 0,3 г нингидрина
растворяют в 100 мл н-бутанола и приливают 3 мл ледяной уксусной кислоты.
Реактив устойчив в течение 2 недель. Проявляющий реагент N 2 (хлор): получают в
хроматографической камере смешиванием 1 - 2 г калия
перманганата с 10 - 15 мл концентрированной хлороводородной
кислоты непосредственно перед употреблением. Проявляющий реагент N 3 (о-толидиновый): 0,160 г о-толидина
растворяют в 30 мл ледяной уксусной кислоты, добавляют 1 г йодида калия и
доливают водой до 500 мл. Устойчив при хранении в
темном месте в течение 2 недель.
Стандартный раствор
N 1 смеси глифосата и глицина концентрации 1000
мкг/мл (для глифосата) и 500 мкг/мл (для глицина)
готовят, растворяя навески 0,0500 г глифосата и
0,0250 г глицина в 50 мл водно-этанольной смеси
(1:1). Раствор устойчив в течение недели. Стандартный раствор N 2 глифосина концентрации 1000 мкг/мл готовят, растворяя
навеску 0,0500 г в 50 мл водно-этанольной смеси
(1:1). Раствор устойчив в течение месяца.
Приборы, посуда.
Аспирационное устройство. Фильтродержатель. Камеры хроматографические стеклянные. Пульверизаторы стеклянные. Микрошприцы. Микропипетки вместимостью 0,1 мл. Колбы
мерные, цилиндры, мензурки. Пипетки вместимостью 1, 2, 5, 10 мл. Пробирки градуированные с притертыми пробками вместимостью 5
мл. Стаканы химические вместимостью 50 мл. Лампа ПРК-4.
Условия отбора проб
воздуха. Воздух со скоростью 7 - 10 л/мин. аспирируют
через аэрозольный фильтр, помещенный в фильтродержатель.
Для анализа отбирают 200 л воздуха. Срок хранения проб - неделя.
Ход анализа.
Подготовка проб. Аэрозольный фильтр извлекают из фильтродержателя,
помещают в химический стакан, заливают 2,5 мл водно-этаноловой смеси (1:1) и
выдерживают 1 ч, периодически встряхивая или помешивая стеклянной палочкой.
Экстракт сливают в градуированную пробирку. Экстракцию с фильтра повторяют 2,5
мл водно-этанольной смеси (1:1), выдерживая 1 ч при
встряхивании и помешивании. Второй экстракт объединяют с первым. Доводят объем
в пробирке точно до 5 мл водно-этанольной смеси
(1:1), тщательно перемешивают.
Условия хроматографирования. По 0,05 мл полученного раствора наносят
на хроматографические пластинки N 1 и 2. На те же пластинки наносят стандартные растворы по схеме:
раствор для стандартных пятен глифосата и глицина - в
5 градуированных пробирок с помощью микрошприца или
микропипетки вносят 0,05; 0,10; 0,20; 0,30; 0,50 мл стандартного раствора N 1 и
доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл водно-этанольной
смесью (1:1); раствор для стандартных пятен глифосина
- в 5 градуированных пробирок вносят 0,10; 0,20; 0,50; 0,75; 1,0 мл
стандартного раствора N 2 и доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл
водно-этанольной смесью (1:1), раствор для
стандартных пятен глифосина - в 5 градуированных
пробирок вносят 0,10; 0,20; 0,50; 0,75; 1,0 мл стандартного раствора N 2 и
доводят объем в каждой пробирке точно до 5 мл водно-этанольной
смесью (1:1).
На линию стандарта
пластинки N 1 наносят по 0,05 мл растворов из пробирок, приготовленных из
стандартного раствора N 1, что соответствует 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 5,0 мкг глифосата и 0,25; 0,50; 1,0; 1,5; 2,5 мкг глицина.
На линию стандарта
пластинки N 2 наносят по 0,05 мл растворов из пробирок, приготовленных из
стандартного раствора N 2, что соответствует 1,0; 2,0; 5,0; 7,5; 10 мкг глифосина.
Пластинку N 1
помещают в хроматографическую камеру с подвижной
фазой N 1, пластинку N 2 - с подвижной фазой N 2. После хроматографирования
пластинки вынимают из камер, подсушивают в сушильном шкафу при температуре 40 -
50 °C.
Пластинку N 1
обрабатывают проявляющим реагентом
N 1 с
последующим
нагреванием в сушильном шкафу при температуре 110 -
120 °C. Глифосат и глицин
обнаруживают в виде розовых пятен с R
f
0,60 и 0,50 соответственно. Окраска пятен устойчива.
Пластинку N 2 помещают на 20 мин. под источник
УФ-облучения, а
затем на 5
мин. - в пары
проявляющего реагента N 2 (хлора) и
оставляют
в вытяжном шкафу до полного
исчезновения запаха хлора.
Далее
пластинку орошают проявляющим
реагентом N 3. Глифосин
обнаруживают
в виде синих пятен на белом фоне
с R 0,62. Окраска
f
пятен устойчива.
Количество глифосата, глифосина и глицина
определяют, сравнивая интенсивность окраски и площадь пятен проб со стандартными, интенсивность окраски и площадь которых
наиболее близки к пробам.
Обработка
результатов анализа. Концентрацию глифосата, глицина
и глифосина (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GS V
1 2
X = -------,
S V V
2 1 20
где:
G
- количество вещества
в стандарте, наиболее
близко
подходящем к пробе, мкг;
S , S -
площади пятен соответственно пробы и стандарта, кв.
1 2
мм;
V - общий объем раствора пробы, мл;
2
V - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;
1
V -
объем воздуха, отобранный для
анализа и приведенный к
20
стандартным условиям, л.
Требования
безопасности. Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в
химических лабораториях.