Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации,
Первый заместитель
Министра
здравоохранения
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
Дата введения -
1 января 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЭТИЛГЕКСИЛОВОГО ЭФИРА 2,4-Д
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1134-02
1. Методические
указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены
им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина);
Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А.
Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М.
Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.);
Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и
др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П.
Веселов).
2. Методические
указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному
санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и
введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской
Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации,
академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
1. Вводная
часть
Фирма-производитель:
ДауАгросайенсис.
Торговое название:
Эстерон.
Название
действующего вещества по ИСО: 2-этилгексиловый эфир 2,4-Д.
Название
действующего вещества по ИЮПАК: 2-этилгексиловый эфир 2,4-дихлорфеноксиуксусной
кислоты.
Структурная формула
(не приводится).
C H Cl
O
М. м. 333,3
16
22 2 3
Химически чистый
2-этилгексиловый эфир 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты представляет собой
бесцветную вязкую жидкость.
Температура кипения
- свыше 300 °C.
Растворимость:
хорошо растворим в большинстве органических растворителей, растворимость в воде
менее 0,1 мг/л.
2-этилгексиловый
эфир 2,4-Д не стабилен в водных растворах и быстро гидролизуется до кислоты.
Токсикологическая
характеристика 2-этилгексилового эфира 2,4-Д соответствует характеристике самой
кислоты.
Может
присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля и паров.
В РФ установлены
следующие гигиенические нормативы:
ПДК в воздухе
рабочей зоны - 0,5 мг/куб. м (малолетучие эфиры 2,4-Д);
ПДК в атмосферном
воздухе - 0,001 мг/куб. м.
Область применения
2-этилгексиловый
эфир 2,4-Д - селективный гербицид системного действия из группы
арилоксиалкановых кислот, эффективно подавляет развитие двудольных сорняков в
посевах зерновых колосовых культур.
2. Методика
измерения концентраций 2-этилгексилового
эфира 2,4-Д в
воздухе рабочей зоны методом
газожидкостной
хроматографии
2.1.
Основные положения
2.1.1. Принцип
метода
Метод основан на
определении вещества с помощью газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором
постоянной скорости рекомбинации ионов на неподвижной
фазе SE-30 или OV-17.
Отбор проб воздуха
осуществляется концентрированием на бумажные фильтры из пенополиуретана.
Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2.
Метрологическая характеристика метода (P = 0,95)
Число параллельных
определений - 6.
Предел обнаружения
в хроматографируемом объеме - 0,1 нг.
Предел обнаружения
в пробе - 0,005 мг/куб. м (при отборе 20 куб. дм воздуха).
Диапазон
определяемых концентраций - 0,005 - 0,1 мг/куб. м.
Среднее значение
определения - 93,23%.
Стандартное
отклонение (S) - 2,66%.
Относительное
стандартное отклонение (DS) - 1,08%.
Доверительный
интервал среднего - 2,78%.
Суммарная
погрешность измерения не превышает 19%.
2.1.3.
Избирательность метода
В предлагаемых
условиях метод специфичен в присутствии других пестицидов.
2.2.
Реактивы, материалы, приборы и оборудование
2.2.1. Реактивы и
материалы
2-этилгексиловый
эфир 2,4-Д,
аналитический
стандарт фирмы
ДауАгросайенсис
с содержанием д.в. 99,6%
Ацетон,
чда ГОСТ
2603-79
н-Гексан,
ч ТУ
6-09-375-78
Насадка
для колонки: Инертон
М-А/У-ОМС8 (0,16 - 0,20 мм) с 5% SE-30
Насадка
для колонки: Хроматон-М-супер
с
5% ОУ-17 (0,20 - 0,25 мм)
Пенополиуретан
пористый, ТУ 2254-153-04691277-95
ППУ,
промытый ацетоном
2.2.2. Приборы и
оборудование
Аспирационное
устройство типа ЭА-1 ТУ
25-11-1414-78
или
аналогичное
Барометр ТУ
2504-1797-75
Весы
аналитические типа ВЛА-200
ГОСТ 34104-80Е
Воронки
химические, конусные
ГОСТ 2533-82Е
диаметром
34 - 40 мм
Газовый
хроматограф с детектором постоянной
скорости
рекомбинации ионов серии "Цвет-500"
с
пределом детектирования по линдану не выше
-14
4
x 10 г/куб. см или другой аналогичного
типа
Груша
резиновая
Колбы
мерные вместимостью 100 мл
ГОСТ 1770-74
Колонка
хроматографическая стеклянная
длиной
2 или 1 м, внутренним диаметром 3 мм
Концентраторы
грушевидные (конические) ГОСТ
10394-72
НШ29
КГУ-100-14, 19, ТС вместимостью 100 мл
Микрошприц
емкостью 10 мкл, МШ-10Ф ТУ
64-1-2850
Насос
водоструйный
ГОСТ 10696-75
Пипетки
мерные на 1,0; 5,0 и 10,0 мл
ГОСТ 20292-74
Прибор
для перегонки растворителей
при
атмосферном давлении
Ротационный
вакуумный испаритель ИР-1М ТУ
25-11-917-76
или
аналогичный
Стеклянные
палочки
Термометр
лабораторный шкальный ТЛ-2, ГОСТ 215-73Е
цена
деления 1 °C, пределы измерения 0 - 55 °C
Цилиндры
мерные на 10 мл
ГОСТ 1770-74Е
Фильтродержатели
диаметром 50 мм
2.3.
Подготовка к определению
2.3.1. Подготовка и
кондиционирование колонки для газожидкостной хроматографии
Готовую насадку (3%
5Е-30 на Инертоне N-AW-DMCS) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под
вакуумом, колонку устанавливают в термостат хроматографа, не подсоединяя к
детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250 °C в течение 8 - 10
ч.
2.3.2.
Приготовление стандартных растворов
Взвешивают 100 мг
2-этилгексилового эфира 2,4-Д в мерной колбе на 100 мл, растворяют навеску в
гексане и доводят объем до метки гексаном (стандартный раствор N 1,
концентрация 1 мг/мл). Раствор хранится в холодильнике при 4 - 6 °C в течение 6
месяцев.
Методом
последовательного разбавления гексаном готовят стандартные растворы
2-этилгексилового эфира 2,4-Д с концентрацией 1,0; 0,5; 0,3; 0,1 и 0,05 мкг/мл
для построения калибровочного графика. Рабочие растворы хранят в холодильнике
при 4 - 6 °C не более 10 дней.
2.3.3. Построение
калибровочного графика
Для построения
калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 2 мкл рабочего стандартного
раствора 2-этилгексилового эфира 2,4-Д с концентрацией 0,05; 0,1; 0,3; 0,5 и
1,0 мкг/мл. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее
значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят
калибровочный график зависимости высоты хроматографического пика, мм, от концентрации 2-этилгексилового эфира 2,4-Д в
растворе, мкг/мл.
2.4. Отбор
проб
2.4.1. Подготовка к
отбору проб
2.4.1.1. Подготовка
растворителей. Органические растворители перед началом работы очищают, сушат и
перегоняют в соответствии с типовыми методиками. Гексан встряхивают с
небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока свежая
порция кислоты не перестанет окрашиваться. Затем гексан последовательно
промывают водой, 2%-ным раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего
его сушат над гидроксидом натрия и перегоняют.
Ацетон перегоняют над
перманганатом калия и поташом (на 1 л
ацетона 10 г KMnO
и 2 г K CO ).
4 2 3
2.4.2.2. Подготовка
фильтров для отбора проб воздуха. Из пенополиурената, предварительно промытого
ацетоном, вырезают фильтры диаметром 50 мм, толщиной 2,5 - 3 мм.
2.4.2. Отбор проб
Отбор проб воздуха
рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху
рабочей зоны".
Воздух со скоростью
2 л/мин. пропускают через фильтр из пенополиуретана, помещенный в
фильтродержатель.
Для измерения
концентрации вещества на уровне 0,005 мг/куб. м следует отобрать 20 л воздуха.
Фильтры с
отобранными пробами, помещенные в герметически закрываемые склянки, можно
хранить в холодильнике при температуре 4 - 6 °C в течение 5 дней.
2.5.
Описание определения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл смеси
гексан-ацетон (9:1), оставляют на 7 - 10 мин., периодически перемешивая.
Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды
обрабатывают новыми порциями смеси гексан-ацетон объемом 10 мл.
Объединенный
экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при
температуре не выше 30 °C, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого
воздуха, остаток растворяют в 2 мл гексана и хроматографируют.
2.6.
Условия хроматографирования и обработка результатов
2.6.1. Условия
хроматографирования градуировочных и анализируемых растворов
Хроматограф
"Цвет-550" с детектором
постоянной скорости
рекомбинации ионов с пределом детектирования по
линдану не выше
-14
4 x 10
г/куб. см.
10
Показания
электрометра - 64 x 10 Ом.
Скорость движения
ленты самописца - 240 мм/ч.
Колонка стеклянная,
1000 x 3 мм; неподвижная фаза - 5% SE-30 на Инертоне N-AW-DMCS (0,16 - 0,20
мм).
Температура
испарителя - 270 °C, термостата колонки - 200 °C, детектора - 350 °C.
Газовый режим
(азот) - 25 мл/мин.
Объем вводимой
пробы - 2 мкл.
Время удерживания
2-этилгексилового эфира 2,4-Д - 2 мин. 25 с.
Линейный диапазон
детектирования: 0,1 - 2 нг.
Альтернативная
фаза: Хроматон-N-супер с 5% OV-17 (0,20 - 0,25 мм),
колонка стеклянная, 2000 x 3 мм.
10
Показания
электрометра - 64 x 10 Ом.
Скорость движения
ленты самописца - 240 мм/ч.
Температура
испарителя - 280 °C, термостата колонки - 240 °C, детектора - 340 °C.
Газовый режим
(азот) - 30 мл/мин.
Объем вводимой
пробы - 2 мкл.
Время удерживания
2-этилгексилового эфира 2,4-Д - 1 мин. 4 с.
Линейный диапазон
детектирования: 0,1 - 2 нг.
Каждую
анализируемую пробу вводят 3 раза и вычисляют среднюю высоту пика. Образцы,
дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1 мкг/мл,
разбавляют гексаном.
2.6.2. Обработка
результатов анализа
Содержание
2-этилгексилового эфира 2,4-Д
рассчитывают методом
абсолютной калибровки по формуле:
C x W
X = -----,
V
где:
X -
содержание 2-этилгексилового эфира 2,4-Д
в пробе воздуха,
мг/куб. м;
C -
концентрация
2-этилгексилового эфира 2,4-Д
в
хроматографируемом растворе, найденная
по калибровочному графику,
мкг/мл;
W - объем экстракта, подготовленного для
хроматографирования,
мл;
V - объем
пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного
к
стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20
°C), куб. дм.
3.
Требования техники безопасности
Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.
4.
Разработчики
Калинин
В.А., проф., к. с-х. н.; Довгилевич Е.В., к. биол. н.; Калинина Т.С., к. с-х.
н.; Довгилевич А.В., к. хим. н.; Устименко Н.В., к. биол. н.; Орехов Д.А.
Московская
сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева. 127550, Москва,
Тимирязевский пр., 2, кафедра химических средств защиты растений.
Телефон: 976-43-26.