Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации,
Первый заместитель
Министра
здравоохранения
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
Дата введения -
1 января 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ
КВИЗАЛОФОП-П-ТЕФУРИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ
ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1139-02
1. Методические
указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены
им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина);
Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А.
Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М.
Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.);
Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и
др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П.
Веселов).
2. Методические
указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному
санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и
введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации,
Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком
РАМН Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
1. Вводная
часть
Фирма-производитель:
Юнирояль Кэмикал Лтд. (Великобритания).
Торговое название:
ПАНТЕРА.
Действующее
вещество: квизалофоп-П-тефурил.
Название д.в. по номенклатуре ИЮПАК: Тетрагидрофурфуриловый эфир
(R)-2[4-(6-хлорхиноксалин-2-илокси)фенокси]пропионовой
кислоты.
Структурная формула
(не приводится).
C H ClN
O
М. м. 428,9
22
21 2 5
Кристаллическое вещество белого цвета без запаха.
-8
Давление
паров: < 5,9 x 10 мм Hg при 25 °C.
Растворимость (г/л при
25 °C): в воде - 0,009, метаноле -
64,39, толуоле - 651,70,
гексане - 12,43.
Температура плавления: 72,5 - 74,5 °C.
Коэффициент распределения в
системе октанол/вода - log
-
p
4,3222.
Агрегатное
состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.
Краткая
токсикологическая характеристика
Острая пероральная токсичность (LD )
для крыс - более
50
1019 мг/кг; острая
дермальная токсичность (LD ) для кроликов -
50
более 2000 мг/кг.
Гигиенические нормативы
ОБУВ для
воздуха рабочей зоны - 0,5 мг/куб. м;
ОБУВ для
атмосферного воздуха - 0,005 мг/куб. м.
Область
применения препарата
Квизалофоп-П-тефурил - новый
послевсходовый гербицид,
рекомендуемый для
уничтожения однолетних и многолетних сорняков на
посадках картофеля, посевах
сахарной и столовой свеклы.
2. Методика
измерения концентраций
квизалофоп-П-тефурила
методом высокоэффективной
жидкостной
хроматографии в воздухе рабочей зоны
2.1.
Основные положения
2.1.1. Принцип
метода
Метод основан на
определении квизалофоп-П-тефурила с помощью высокоэффективной жидкостной
хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
Отбор проб воздуха
осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя
лента".
Количественное
определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2.
Избирательность метода
В предлагаемых
условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а
также пестицидов, применяемых при возделывании сахарной свеклы и картофеля.
2.1.3.
Метрологическая характеристика метода (P = 0,95)
Число
параллельных определений 6
Предел
обнаружения 5 нг
(измерение по п. 2.7.1);
в
хроматографируемом объеме 1,0 нг
(измерение по п. 2.7.2)
Предел обнаружения в воздухе 0,05 мг/куб. м (при отборе
10 л воздуха)
Диапазон
определяемых 0,05 - 1,5
мг/куб. м
концентраций
Среднее
значение определения 97,1%
Стандартное
отклонение (S) 6,89%
Относительное
стандартное 2,82%
отклонение
(DS)
Доверительный
интервал среднего 7,27%
Суммарная
погрешность измерения не превышает
23%
2.2.
Реактивы и материалы
Квизалофоп-П-тефурил
с содержанием д.в. 99,8%
(Юнирояль
Кэмикал Лтд, Великобритания)
Ацетонитрил
для хроматографии, хч ТУ
6-09-4326-76
Вода
бидистиллированная или деионизованная
Бумажные
фильтры "синяя лента", обеззоленные, ТУ 6-09-2678-77
предварительно
промытые ацетонитрилом
2.3.
Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный
хроматограф с ультрафиолетовым
детектором
фирмы Perkin-Elmer (США)
или
аналогичный
Хроматографическая
колонка стальная, длиной
25
см, внутренним диаметром 4,6 мм, Hipersil
ODS,
зернением 5 мкм
Шприц
для ввода образцов
для
жидкостного хроматографа
Жидкостный
хроматограф Милихром
с
ультрафиолетовым детектором
Хроматографическая
колонка стальная,
длиной
64 мм, внутренним диаметром 2 мм,
заполненная Сепароном С18, зернением 5 мкм
Ротационный
вакуумный испаритель ИР-1М ТУ
25-11-917-76
или
аналогичный
Весы
аналитические типа ВЛА-200
ГОСТ 34104-80Е
Насос
водоструйный
ГОСТ 10696-75
Аспирационное
устройство типа ЭА-1 ТУ
25-11-1414-78
или
аналогичное
Барометр ТУ
2504-1797-75
Термометр
лабораторный шкальный ТЛ-2,
ГОСТ 215-73Е
цена
деления 1 °C, пределы измерения 0 - 55 °C
Колбы
мерные вместимостью 100 и 1000 мл
ГОСТ 1770-74
Цилиндры
мерные вместимостью 10, 50, 500 мл
ГОСТ 1770-74Е
Колбы
грушевидные со шлифом вместимостью 100 мл
ГОСТ 10394-72
Стаканы
химические вместимостью 100 мл
ГОСТ 25336-82Е
Пипетки,
вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл
ГОСТ 20292-74
Воронки
химические, конусные,
ГОСТ 25336-82Е
диаметром
34 - 40 мм
Фильтродержатели
Стеклянные
палочки
2.4. Отбор
проб
Отбор проб воздуха
рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху
рабочей зоны".
В течение 15 мин.
последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 2,0 - 3,0
л/мин. аспирируют в течение 5 мин. через фильтр "синяя лента".
Фильтры с
отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в
холодильнике при 4 - 6 °C в течение 5 дней.
2.5.
Подготовка к определению
2.5.1.
Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
Отмеряют 300 мл
воды, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют до метки ацетонитрил,
перемешивают и дегазируют.
2.5.2.
Кондиционирование колонки
Промыть колонку для
ВЭЖХ смесью ацетонитрил-вода (7:3, по объему) в течение 30 мин. при скорости
подачи растворителя 100 мкл/мин. (измерение по п. 2.7.1) или 1 мл/мин.
(измерение по п. 2.7.2).
2.5.3.
Приготовление стандартных растворов
Основной
стандартный раствор квизалофоп-П-тефурила с содержанием 100 мкг/мл готовят
растворением 0,0100 г вещества в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор
хранится в холодильнике в течение месяца.
Рабочие стандартные
растворы с концентрацией 0,5; 1,0; 2,0; 5,0; 10 и 15 мкг/мл (измерение по п.
2.7.1) готовят из основного стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила
соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п.
2.5.1).
Рабочие стандартные
растворы с концентрацией 0,05; 0,1; 0,2; 0,3 и 0,5 мкг/мл (измерение по п.
2.7.2) готовят из основного стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила
соответствующим последовательным разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п.
2.5.1).
Рабочие растворы
хранятся в холодильнике в течение 3 дней.
2.5.4. Построение
градуировочного графика
2.5.4.1.
Градуировочный график А (измерение по п. 2.7.1). Для
построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 10 мкл
рабочего стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила с концентрацией 0,5; 1,0;
2,0; 5,0; 10,0 и 15,0 мкг/мл.
2.5.4.2.
Градуировочный график В (измерение по п. 2.7.2). Для
построения градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл
рабочего стандартного раствора квизалофоп-П-тефурила с концентрацией 0,05; 0,1;
0,2; 0,3 и 0,5 мкг/мл.
Осуществляют не
менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты (или площади)
хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график
(А или В) зависимости высоты (или площади) хроматографического пика в мм (кв. мм) от концентрации квизалофоп-П-тефурила в растворе
в мкг/мл.
2.6.
Описание измерения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл
ацетонитрила, оставляют на 5 - 7 мин., периодически перемешивая. Растворитель
сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают
новыми порциями ацетонитрила объемом 10 мл.
Объединенный
экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе
почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха, остаток
растворяют в 1 (измерение по п. 2.7.1) или 10 мл (измерение по п. 2.7.2)
подвижной фазы для ВЭЖХ и хроматографируют.
2.7.
Условия хроматографирования
2.7.1.
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Милихром (Россия)
Колонка стальная,
длина 64 мм, внутренний диаметр 2 мм, заполнение Сепарон С18, зернение 5 мкм.
Температура
колонки: комнатная.
Подвижная фаза
ацетонитрил-вода (7:3, по объему).
Скорость потока
элюента: 100 мкл/мин.
Рабочая длина
волны: 236 нм.
Чувствительность:
0,4 ед. абсорбции на шкалу.
Объем вводимой
пробы: 10 мкл.
Время выхода
квизалофоп-П-тефурила: около 6 мин.
Линейный диапазон
детектирования: 5 - 150 нг.
Образцы, дающие
пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 15 мкг/мл, разбавляют
подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.7.2.
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Perkin-Elmer (США)
Колонка стальная,
длина 25 см, внутренний диаметр 4,6 мм, заполнение Hipersil ODS, зернение 5 мкм
Температура колонки комнатная
Подвижная фаза ацетонитрил-вода
(7:3,
по
объему)
Скорость потока элюента 1 мл/мин.
Рабочая длина волны 236 нм
Чувствительность 0,05 ед.
абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы 20 мкл
Время выхода квизалофоп-П-тефурила около 12 мин.
Линейный диапазон детектирования 1,0 - 10 нг
Образцы, дающие
пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют
подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.8.
Обработка результатов анализа
Содержание
квизалофоп-П-тефурила
рассчитывают методом
абсолютной калибровки по формуле:
C x W
X = -----,
V
где:
X -
содержание квизалофоп-П-тефурила в
пробе воздуха,
мг/куб. м;
C -
концентрация квизалофоп-П-тефурила в
хроматографируемом
растворе, найденная по калибровочному
графику, мкг/мл;
W -
объем экстракта, подготовленного для
хроматографирования,
мл;
V - объем
пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного
к
стандартным условиям (давление
760 мм рт. ст., температура
20 °C), куб. дм.
P
V = 0,386 x ------- x u t,
273 + T
где:
T - температура воздуха
при отборе пробы
(на входе в
аспиратор), °C;
P -
атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
u - расход
воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;
t -
длительность отбора пробы, мин.
3.
Требования техники безопасности
При
выполнении измерений концентраций квизалофоп-П-тефурила следует соблюдать все
необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях в
соответствии с "Правилами устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемиологического режима и личной гигиены
при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ
СССР" (N 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в
документации на прибор.
4.
Разработчики
Ракитский В.Н.,
член-корр. РАМН, проф., Юдина Т.В., Федорова Н.Е. (Федеральный научный центр
гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл., ул. Семашко, д. 2).
Телефон: (095)
586-12-76.