Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации,
Первый заместитель
Министра
здравоохранения
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
Дата введения -
1 января 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЛЮФЕНУРОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ
МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1141-02
1. Методические
указания подготовлены: Федеральным научным центром гигиены
им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина);
Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А.
Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев
и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.);
Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и
др.), при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П.
Веселов).
2. Методические
указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному
санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.
3. Утверждены и
введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской
Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации,
академиком РАМН Г.Г. Онищенко.
4. Введены впервые.
1. Вводная
часть
Фирма-производитель:
Сингента (Швейцария).
Торговое название:
МАТЧ.
Действующее
вещество: Люфенурон (ЦГА 184699).
(RS)-1-/2,5-дихлор-4-(1,1,2,3,3,3-гексафторпропокси)-фенил/-3-(2,6-дифторбензоил)-мочевина (ИЮПАК).
Структурная формула
(не приводится).
C H Cl F N O М. м.
511,2
17 8 2 8 2 3
Бесцветное
кристаллическое вещество без запаха.
Температура
плавления: 168,7 - 169,4 °C.
-3
Давление
паров при 25 °C: менее 4 x 10 мПа.
Коэффициент распределения н-октанол/вода: К log P = 5,12.
ow
Хорошо растворим в
ацетоне (460 г/л), толуоле (72 г/л), этаноле (41 г/л); плохо растворим в
гексане (0,13 г/л) и практически не растворим в воде (0,06 мг/л).
Стабильность к
гидролизу при 20 °C: DT 160 дней (pH 5), 70 дней (pH 7) и 32 дня (pH 9); при 70
°C: DT 185 дней (pH 5), 8,66 часа (pH 27) и 0,69 часа (pH 9).
В биологически
активных почвах в аэробных условиях Люфенурон
быстро разлагается: DT = 13 - 20 дней.
50
Может
присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.
Краткая
токсикологическая характеристика
Острая
пероральная токсичность (LD
) для мышей и крыс - более
50
2000 мг/кг;
острая дермальная токсичность (LD ) для крыс - более
50
2000
мг/кг; острая ингаляционная
токсичность (LC
) для крыс -
50
более 2,35 мг/л воздуха. LC для рыб 30 - 70 мг/л (96 часов).
50
Гигиенические
нормативы
ОБУВ в воздухе
рабочей зоны - 0,8 мг/куб. м.
Область применения
препарата
Люфенурон -
инсектоакарицид из группы ингибиторов синтеза хитина, эффективно уничтожает
листогрызущие личинки чешуекрылых и жесткокрылых, эриофиидных клещей на
хлопчатнике, сое, овощных культурах, винограде, семечковых плодовых, картофеле
и кукурузе в течение вегетационного периода.
2. Методика
измерения концентраций Люфенурона
в воздухе рабочей
зоны методом высокоэффективной
жидкостной
хроматографии
2.1.
Основные положения
2.1.1. Принцип
метода
Метод основан на
определении Люфенурона с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии
(ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
Отбор проб воздуха
осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя
лента".
Количественное
определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2.
Избирательность метода
В предлагаемых
условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а
также пестицидов, применяемых при возделывании яблоневых садов и картофеля.
2.1.3.
Метрологическая характеристика метода (P = 0,95)
Число параллельных
определений - 6.
Предел обнаружения
в хроматографируемом объеме - 5 нг.
Предел обнаружения
в воздухе - 0,1 мг/куб. м (при отборе 20 л воздуха).
Диапазон определяемых
концентраций - 0,1 - 1,0 мг/куб. м.
Среднее значение
определения - 93,1%.
Стандартное
отклонение (S)- 2,76%.
Относительное
стандартное отклонение (DS) - 1,05%.
Доверительный
интервал среднего - 2,70%.
Суммарная
погрешность измерения не превышает 13%.
2.2.
Реактивы, растворы и материалы
Люфенурон
с содержанием д.в. 99,7%
(Сингента,
Швейцария)
Ацетонитрил,
ч ТУ
6-09-3534-82
Вода
бидистиллированная, деионизованная
или
перегнанная над KMnO
4
Бумажные
фильтры "синяя лента", обеззоленные, ТУ 6-09-2678-77
предварительно
промытые ацетонитрилом
2.3.
Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный
хроматограф с ультрафиолетовым
детектором
фирмы Altex (США) или аналогичный
Хроматографическая
колонка стальная
длиной
25 см, внутренним диаметром 4 мм,
заполненная
Диасорбом-130-С8 Т (АО БиоХимМак,
РФ; 119899, Москва, Ленинские горы)
Хроматографическая
колонка стальная
длиной
25 см, внутренним диаметром 4 мм,
содержащая Lichrosorb RP-8, зернением 5 мкм
Шприц
для ввода образцов для жидкостного
хроматографа
Ротационный
вакуумный испаритель ИР-1М ТУ
25-11-917-76
или
аналогичный
Весы
аналитические типа ВЛР-200
ГОСТ 19401-74
Насос
водоструйный
ГОСТ 10696-75
Аспирационное
устройство типа ЭА-1 ТУ
25-11-1414-78
или
аналогичное
Барометр ТУ
2504-1797-75
Термометр
лабораторный шкальный ТЛ-2,
ГОСТ 215-73Е
цена
деления 1 °C, пределы измерения 0 - 55 °C
Прибор
для перегонки при атмосферном давлении
Колбы
мерные вместимостью 100 и 1000 мл
ГОСТ 1770-74
Цилиндры
мерные вместимостью 10, 50, 500 и
ГОСТ 1770-74Е
1000
мл
Колбы
грушевидные со шлифом вместимостью 100 мл
ГОСТ 10394-72
Стаканы
химические вместимостью 100 мл
ГОСТ 25336-82Е
Пипетки
вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл
ГОСТ 20292-74
Воронки
химические конусные
ГОСТ 25336-82Е
диаметром
34 - 40 мм
Фильтродержатели
Стеклянные
палочки
2.4. Отбор
проб
Отбор проб воздуха
рабочей зоны следует осуществлять в соответствии с требованиями ГОСТ
12.1.005-88 "ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху
рабочей зоны".
В течение 15 мин.
последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 4,0
л/мин. аспирируют в течение 5 мин. через фильтр "синяя лента".
Фильтры с
отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в
холодильнике не более 7 дней.
2.5.
Подготовка к определению
2.5.1.
Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
Отмеряют 600 мл
ацетонитрила, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 400 мл воды, перемешивают
и дегазируют.
2.5.2.
Кондиционирование колонки
Промыть колонку для
ВЭЖХ смесью ацетонитрил-вода (6:4 по объему) в течение 30 мин. при скорости
подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать стабилизации
базовой линии (5 - 15 мин.).
2.5.3.
Приготовление стандартных растворов
Основной стандартный
раствор Люфенурона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,010 г
препарата, содержащего 99,7% д.в., в ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не
более месяца.
Рабочие стандартные
растворы с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/мл готовят из основного
стандартного раствора Люфенурона соответствующим последовательным разбавлением
подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1). Рабочие растворы хранят в холодильнике не
более недели.
2.5.4. Построение
калибровочного графика
Для построения
калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 100 мкл рабочего
стандартного раствора Люфенурона с концентрацией 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/мл.
Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты
хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график
зависимости высоты хроматографического пика в мм от
концентрации Люфенурона в растворе в мкг/мл.
2.6.
Описание определения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл
ацетонитрила, оставляют на 2 - 3 минуты, периодически перемешивая. Растворитель
сливают в мерный цилиндр вместимостью 50 мл, отжимая фильтр стеклянной
палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетонитрила объемом 7
мл.
Доводят объем
объединенного экстракта до 24 мл, добавляют 16 мл воды, раствор перемешивают,
фильтруют и анализируют по п. 2.7.
2.7.
Условия хроматографирования
Жидкостный
хроматограф с ультрафиолетовым детектором Altex (США)
Колонка стальная длиной
25 см, внутренним диаметром 4 мм
Температура колонки комнатная
Подвижная фаза ацетонитрил-вода (60:40 по
объему)
Скорость потока элюента 1 мл/мин.
Рабочая длина волны 254 нм
Чувствительность 0,005 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы 100 мкл
2.7.1. Неподвижная
фаза: Диасорб-130-С8 Т, зернением 7 мкм
Время выхода
Люфенурона: около 16 мин.
2.7.2.
Альтернативная неподвижная фаза: Lichrosorb RP-8 зернением 5 мкм
Время выхода
Люфенурона: около 13 мин.
Линейный диапазон
детектирования: 5 - 50 нг.
Образцы, дающие
пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл, разбавляют
подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.8.
Обработка результатов анализа
Содержание
Люфенурона рассчитывают методом
абсолютной
калибровки по формуле:
C x W
X = -----,
V
где:
X -
содержание Люфенурона в пробе воздуха, мг/куб. м;
C -
концентрация Люфенурона в хроматографируемом растворе,
найденная по калибровочному
графику, мкг/мл;
W -
объем экстракта, подготовленного для
хроматографирования,
мл;
V - объем
пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного
к
стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20
°C), л.
P
P = 0,383 x ------- u t,
273 + T
где:
T - температура
воздуха при отборе
пробы (на входе
в
аспиратор), °C;
P -
атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
u - расход
воздуха при отборе пробы, куб. дм/мин.;
t -
длительность отбора пробы, мин.
3.
Требования техники безопасности
Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами.
4.
Разработчики
Дубовая Л.В., Макеев А.М., к. биол. н.
ВНИИ фитопатологии,
143050, Московская обл., п/о Большие Вяземы, тел.:
592-92-20.