Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации,
Первый заместитель
Министра
здравоохранения
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
16 марта 2003 года
Дата введения -
1 июля 2003 года
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИЙ НИКОСУЛЬФУРОНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ
ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
МУК 4.1.1227-03
1. Сборник
подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (проф. Т.В.
Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф.
В.А. Калинин) при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П.
Веселов). Разработчики методик контроля указаны в конце каждой из них.
2. Методические
указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при
Минздраве России.
3. Утверждены и
введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской
Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации,
академиком РАМН Г.Г. Онищенко 16 марта 2003 года.
4. Введены впервые.
1. Вводная
часть
Фирма-производитель:
Зенека (Великобритания).
Торговое
наименование препарата: АКЦЕНТ, НИССХИН.
Название
действующего вещества по номенклатуре ИСО: никосульфурон.
Название
действующего вещества по номенклатуре ИЮПАК:
2-(4,6-диметоксипиримидин-2-илкарбомоил-сульфамоил)-N,N-диметилникотинамид.
Структурная формула
(не приводится).
Эмпирическая
формула: C H N O S.
15 18 6 6
Молекулярная масса:
410,40.
Химически чистый никосульфурон представляет собой бесцветное
кристаллическое вещество без запаха.
Температура
плавления: 172 - 173 °С.
Растворимость:
хорошо растворим в дихлорметане, толуоле, хлороформе; удовлетворительно - в
ацетонитриле, ацетоне, этаноле; практически не растворим в гексане;
растворимость в воде (в мг/л): 44 (рН 3,5) и 120000 (рН 7,0).
Область применения
препарата: никосульфурон - послевсходовый гербицид для борьбы с широким кругом
одно- и многолетних сорняков.
2. Методика
измерения концентраций никосульфурона
в воздухе рабочей
зоны и атмосферном воздухе методом
высокоэффективной
жидкостной хроматографии
2.1.
Основные положения
2.1.1. Принцип
методики
Методика основана
на определении никосульфурона с помощью высокоэффективной жидкостной
хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.
Отбор воздуха
осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры "синяя
лента".
Количественное
определение проводится методом абсолютной калибровки.
2.1.2.
Избирательность метода
В предлагаемых
условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а
также пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания
сельскохозяйственных культур (хлор- и фосфорорганические пестициды,
симм-триазины, фенилмочевины, тио- и дитиокарбоматы).
2.1.3.
Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)
Число параллельных
определений - 6
Предел обнаружения
в хроматографируемом объеме - 5,0 нг
Предел обнаружения
- 0,01 мг/куб. м (при отборе 25 л воздуха)
Диапазон
определяемых концентраций - 0,01 - 0,10 мг/куб. м
Среднее значение
определения - 95,02%
Стандартное
отклонение (S) - 1,18%
Относительное
стандартное отклонение (DS) - 0,67%
Доверительный
интервал среднего - 1,72%
Суммарная
погрешность измерения не превышает 14%
2.2.
Реактивы, материалы и растворы
Никосульфурон с содержанием д.в. 94,8%
Ацетонитрил для хроматографии, х.ч. ТУ 6-09-4326-76
Вода бидистиллированная, деионизованная или
перегнанная над КМnО
4
Хлороформ (Фармакопея СССР)
Кислота уксусная, ледяная ГОСТ 61-75
Бумажные фильтры "синяя лента",
обеззоленные
предварительно промытые
хлороформом ТУ 6-09-2678-77
2.3.
Приборы, аппаратура, посуда
Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым
детектором с переменной длиной волны
Shimadzu (Япония) или аналогичный
Хроматографическая колонка стальная длиной
25 см, внутренним диаметром 4,6 мм,
содержащая Lichrosorb RP-8 или Hipersil
ODS (альтернативная фаза), зернением 5 мкм
Шприц для ввода образцов для
жидкостного
хроматографа
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М ТУ 25-11-917-74
или аналогичный
Весы аналитические ВЛА-200 ГОСТ 34104-80Е
или аналогичные
Насос водоструйный ГОСТ 10696-75
Печь муфельная
Аспирационное устройство достаточной
разрешающей способности (типа ЭА-1) ТУ 25-11-1414-78
Барометр-анероид М-67 ТУ 2504-1797-75
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2,
пределы измерения 0 - 55
°С,
цена деления 1 °С ГОСТ 215-73Е
Колбы мерные вместимостью 100 и 1000
мл ГОСТ 1770-74
Цилиндры мерные вместимостью 10, 500 и
1000 мл ГОСТ
1770-74Е
Колбы грушевидные со шлифом вместимостью
100 мл ГОСТ 10394-72
Стаканы химические вместимостью 100 мл ГОСТ 25336-82Е
Пипетки вместимостью 0,1; 1,0 и 10 мл ГОСТ 20292-74
Фильтродержатели
Стеклянные палочки
Воронки конические диаметром 30 - 37 мм ГОСТ 25336-82Е
2.4. Отбор
проб
Отбор проб воздуха
рабочей зоны проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88
"ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей
зоны".
В течение 15 мин.
последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух аспирируют в течение 5 мин. с
объемным расходом 1 - 5 куб. дм/мин. через бумажный фильтр "синяя
лента".
Фильтры с
отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить в
холодильнике не более 3 дней.
2.5.
Подготовка к определению
2.5.1.
Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
Отмеряют 300 мл
ацетонитрила, прозрачного при 254 нм, переносят в колбу на 1000 мл, добавляют 5
мл уксусной кислоты и 695 мл бидистиллированной воды, фильтруют, дегазируют.
2.5.2.
Кондиционирование колонки
Промыть колонку для
ВЭЖХ системой ацетонитрил-вода-уксусная кислота (300:695:5) в течение 30 мин.
при скорости подачи растворителя 1 мл/мин. Включить детектор и подождать
стабилизации базовой линии (5 - 15 мин.).
2.5.3. Приготовление
стандартных растворов
Стандартный раствор
никосульфурона с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г вещества в
ацетонитриле в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике не более
10 дней.
Рабочие стандартные
растворы с концентрацией 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,5 мкг/мл готовят из раствора,
содержащего 100 мкг/мл никосульфурона, соответствующим последовательным
разбавлением подвижной фазой для ВЭЖХ (п. 2.5.1). Растворы немедленно после
приготовления помещаются в холодильник, где хранятся не более 3 суток.
2.5.4. Построение
градуировочного графика
Для построения
градуировочного графика в инжектор хроматографа вводят по 20 мкл рабочего
стандартного раствора никосульфурона с концентрацией 0,25; 0,5; 1,0; 1,5; 2,5
мкг/мл.
Осуществляют не
менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты
хроматографического пика для каждой концентрации.
Строят
градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от концентрации никосульфурона в растворе в мкг/мл.
2.6. Описание
определения
Бумажный фильтр с
отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают
10 мл хлороформа, оставляют на 2 - 3 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр
стеклянной палочкой. Фильтр дважды обрабатывают новыми порциями хлороформа
объемом 10 мл.
Далее объединенный
экстракт упаривают в грушевидных колбах на ротационном вакуумном испарителе при
температуре не выше 45 °С почти досуха, оставшийся
растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 1 мл подвижной
фазы для ВЭЖХ (2.5.1) и анализируют по п. 2.7.
2.7. Условия хроматографирования
Жидкостный
хроматограф с ультрафиолетовым детектором Shimadzu (Япония)
Колонка стальная
длиной 25 см, внутренним диаметром 4,6 мм
Температура
колонки: комнатная
Подвижная фаза:
ацетонитрил-вода-уксусная кислота (300:695:5, по объему)
Скорость потока
элюента: 1 мл/мин.
Рабочая длина
волны: 254 нм
Чувствительность:
0,02 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой
пробы: 20 мкл
2.7.1. Неподвижная
фаза: Lichrosorb RP 8, зернением 5 мкм
Время выхода
никосульфурона: 6,5 - 7 мин.
2.7.2.
Альтернативная неподвижная фаза:
Hipersil ODS,
зернением 5 мкм
Время выхода
никосульфурона: около 10 мин.
Линейный диапазон
детектирования: 5 - 50 нг
Образцы, дающие
пики большие чем стандартный раствор с концентрацией
2,5 мкг/мл, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ.
2.8.
Обработка результатов анализа
Содержание
никосульфурона рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:
H х A х W
1
X = ----------,
H х V
0
где:
Х -
содержание никосульфурона в пробе воздуха, мг/куб. м;
Н - высота пика стандарта, мм;
0
Н - высота пика образца, мм;
1
А -
концентрация стандартного раствора, мкг/мл;
W -
объем экстракта, подготовленного для
хроматографирования,
мл;
V - объем
пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного
к
стандартным условиям (давление
760 мм рт. ст., температура
20 °С), л:
P
V = 0,383 ------- х u х t,
273 + T
где:
Т - температура
воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;
Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;
u - расход воздуха
при отборе пробы, куб. дм/мин.;
t - длительность
отбора пробы, мин.
3.
Требования техники безопасности
Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями, токсичными и легковоспламеняющимися веществами,
электронагревательными приборами, сжатыми газами.
4. Контроль
погрешности измерений
Оперативный
контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в
соответствии с рекомендациями МИ 2335-95. ГСИ "Внутренний контроль
качества результатов количественного химического анализа".
5.
Разработчики
Калинин В.А.,
Довгилевич Е.В., Калинина Т.С, Довгилевич А.В.
Московская
сельскохозяйственная академия имени К.А. Тимирязева. 127550, Москва,
Тимирязевская ул., д. 53/1, УНКЦ "Агроэкология пестицидов и
агрохимикатов". Телефон/факс: 976-43-26.