Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
29 июня 2003 года
Дата введения
с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ МЕТИЛОВОГО ЭФИРА ЭСТРОНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.1552-03
Методические
указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии
"Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым
заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем
Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию,
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в
июне 2003 г.
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия
(ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методика контроля
вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны.
Общие санитарно-гигиенические требования".
Методика
выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически
аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ
на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН
2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в
воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные
уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
Структурная формула
не приводится.
C H O
19 24 2
М. м. 284,40.
Метиловый эфир
эстрона (3-метокси-1,3,5-эстратриен-17-она) - производное
эстрона, активного эстрогенного гормона, используется в синтезе анаболических
препаратов феноболина и силаболина. Белый с желтоватым оттенком
мелкокристаллический порошок с температурой плавления 167 - 171 °C. В воде нерастворим, растворим в хлористом метилене, метаноле,
изопропаноле.
В воздухе находится
в виде аэрозоля.
Метиловый эфир
эстрона - малотоксичное вещество при внутрижелудочном введении. Не обладает
раздражающим действием на кожу и слизистые, легко проникает через
неповрежденные кожные покровы, оказывая системное влияние на организм. У женщин
эстрогены вызывают циклические изменения эпителия влагалища и эндометрия, что
приводит к кровотечению, у мужчин - угнетают сперматогенез, вызывают признаки
феминизации.
ОБУВ в воздухе -
0,0001 мг/куб. м.
Характеристика
метода
Определение основано
на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием.
Отбор проб
проводится с концентрированием на фильтры АФА-ХА-20 или АФА-ХП-20.
Нижний предел
измерения в анализируемом объеме пробы - 0,003 мкг.
Нижний предел
измерения в воздухе - 0,00005 мг/куб. м (при отборе 1480 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций от 0,00005 до 0,001 мг/куб. м.
Измерению не мешает
диметилсульфат изопропанола.
Суммарная
погрешность измерения не превышает +/- 18,5%.
Время выполнения
измерения - 1 час 40 мин., включая отбор проб.
Приборы,
аппаратура, посуда
Хроматограф с УФ-детектором для жидкостной хроматографии.
Колонка из
нержавеющей стали длиной 0,25 м, шириной 8,2 мм.
Аспирационное
устройство с расходомером, модель 822, ТУ 64-1-862-72.
Весы лабораторные
аналитические, ГОСТ 24104-88Е.
Разновесы Г-22210,
1 класс, ГОСТ 7328-75.
Мерные колбы
вместимостью 25, 50 и 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
Пипетки на 1, 5 и
10 мл, ГОСТ 29227-91.
Ротационный
испаритель типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Аппарат Сокслета,
ГОСТ 28165-89.
Фильтры АФА-ХА-20
или АФА-ХП-20, ОСТ 95-743-80.
Реактивы,
растворы, материалы
Метиловый эфир
эстрона - порошок.
Спирт метиловый,
хч, ГОСТ 6295-75, абсолютизированный по стандартным методикам.
Силикагель
"для хроматографии" фирмы "Zorbak" с размером частиц 4,0 -
5,0 мкм, диаметром пор 6 - 60 нм, устойчивый в водных растворах в интервале pH
I - II.
Стандартный раствор
N 1 с концентрацией 100 мкг/мл метилового эфира эстрона готовят растворением
навески вещества 0,0100 г в 100 мл метанола. Градуировочные растворы с
концентрацией 0,15-0,30-1,0-2,0-3,0 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением
стандартного раствора N 1 метиловым спиртом. Растворы устойчивы в течение 25
дней.
Отбор пробы
воздуха
Воздух с объемным
расходом 100 л/мин. аспирируют через два фильтра типа АФА-ХА или АФА-ХП. Для
определения 1/2 ОБУВ следует отобрать 1480 л воздуха.
Отобранные пробы можно хранить на протяжении 15 суток.
Подготовка
к измерению
Прибор выводят на
рабочий режим в соответствии с инструкцией, прилагаемой к жидкостному
хроматографу. Стандартную хроматографическую колонку, заполненную силикагелем
"для хроматографии", промывают в течение 10 - 15 мин. метиловым
спиртом до получения стабильной нулевой линии.
При построении
градуировочного графика в хроматограф последовательно вводят по 20 мкл
градуировочных растворов метилового эфира эстрона, что соответствует
0,003-0,006-0,02-0,04-0,06 мкг препарата. На полученной хроматограмме
обсчитывают с помощью ЭВМ "SP-4100" площади хроматографических пиков
в мВ/мин. и строят градуировочную зависимость их величины (ось ординат) от
концентрации вещества в мкг/мл (ось абсцисс).
Условия
хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:
Колонка длиной 0,25
м, диаметром 8,2 мм.
Насадка для колонки
- силикагель "для хроматографии" с размером частиц 4,0 - 5,0 мкм,
диаметром пор 6 - 60 нм.
Температура колонки
- 50 °C.
Объем вводимой
пробы - 20 мкл.
Элюент - метанол -
подается со скоростью 0,7 мл/мин.
Детектор -
ультрафиолетовый, длина волны 280 нм.
Чувствительность
определения - 0,4 Д на всю шкалу.
Время удерживания
вещества - 16 мин. 10 с.
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной
пробой помещают в аппарат Сокслета, заливают 10 мл метанола и экстрагируют в
течение 7 мин. Экстракцию повторяют дважды. Степень извлечения составляет
98,9%. Объединенные экстракты упаривают в ротационном испарителе при 70 °C.
Сухой остаток растворяют в 0,5 мл метанола и вводят в хроматограф через
инжекторное устройство, снабженное дозирующей петлей объемом 20 мкл.
Количественное определение вещества (в мкг/мл) проводят по предварительно
построенному градуировочному графику.
Расчет
концентраций
Концентрацию
метилового эфира эстрона в воздухе "C" (мг/куб. м) вычисляют по
формуле:
a х B
C = -----,
V
где:
a - концентрация
метилового эфира эстрона в анализируемом объеме, найденная по градуировочному
графику, мкг/мл;
B - объем раствора
пробы, мл;
V - объем воздуха,
отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л
(см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле:
V
x (273 + 20) x P
t
V = -------------------,
20 (273 + t) x 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
P - барометрическое давление,
кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.
ст.);
t -
температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
Для удобства
расчета V следует
пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха
к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТЫ
ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ
УСЛОВИЯМ
┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│
°C │ Давление
P, кПа/мм рт. ст. │
│
├─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│ │97,33/ 97,86/ 98,4/ 98,93/ 99,46/ 100/ 100,53/ 101,06/ 101,33/ 101,86/│
│ │730 734
738 742 746
750 754 758
760 764 │
├────┼─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│-30
│1,1582 1,1646 1,1709 1,1772 1,1836 1,1899 1,1963 1,2026
1,2058 1,2122 │
│-26
│1,1393 1,1456 1,1519 1,1581 1,1644 1,1705 1,1768 1,1831
1,1862 1,1925 │
│-22
│1,1212 1,1274 1,1336 1,1396 1,1458 1,1519 1,1581 1,1643
1,1673 1,1735 │
│-18
│1,1036 1,1097 1,1158 1,1218 1,1278 1,1338 1,1399 1,1460
1,1490 1,1551 │
│-14
│1,0866 1,0926 1,0986 1,1045 1,1105 1,1164 1,1224 1,1284
1,1313 1,1373 │
│-10
│1,0701 1,0760 1,0819 1,0877 1,0986 1,0994 1,1053 1,1112
1,1141 1,1200 │
│-6 │1,0540 1,0599 1,0657 1,0714 1,0772
1,0829 1,0887 1,0945 1,0974
1,1032 │
│-2 │1,0385 1,0442 1,0499 1,0556 1,0613
1,0669 1,0726 1,0784 1,0812
1,0869 │
│0 │1,0309 1,0366 1,0423 1,0477 1,0535
1,0591 1,0648 1,0705 1,0733
1,0789 │
│+2 │1,0234 1,0291 1,0347 1,0402 1,0459
1,0514 1,0571 1,0627 1,0655
1,0712 │
│+6 │1,0087 1,0143 1,0198 1,0253 1,0309
1,0363 1,0419 1,0475 1,0502
1,0557 │
│+10
│0,9944 0,9999 0,0054 1,0108 1,0162 1,0216 1,0272 1,0326
1,0353 1,0407 │
│+14
│0,9806 0,9860 0,9914 0,9967 1,0027 1,0074 1,0128 1,0183
1,0209 1,0263 │
│+18
│0,9671 0,9725 0,9778 0,9830 0,9884 0,9936 0,9989 1,0043
1,0069 1,0122 │
│+20
│0,9605 0,9658 0,9711 0,9783 0,9816 0,9868 0,9921 0,9974
1,0000 1,0053 │
│+22
│0,9539 0,9592 0,9645 0,9696 0,9749 0,9800 0,9853 0,9906
0,9932 0,9985 │
│+24
│0,9475 0,9527 0,9579 0,9631 0,9683 0,9735 0,9787 0,9839
0,9865 0,9917 │
│+26
│0,9412 0,9464 0,9516 0,9566 0,9618 0,9669 0,9721 0,9773
0,9799 0,9851 │
│+28
│0,9349 0,9401 0,9453 0,9503 0,9555 0,9605 0,9657 0,9708
0,9734 0,9785 │
│+30
│0,9288 0,9339 0,9391 0,9440 0,9432 0,9542 0,9594 0,9645
0,9670 0,9723 │
│+34
│0,9167 0,9218 0,9268 0,9318 0,9368 0,9418 0,9468 0,9519
0,9544 0,9595 │
│+38
│0,9049 0,9099 0,9149 0,9199 0,9248 0,9297 0,9347 0,9397
0,9421 0,9471 │
└────┴─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┘