Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
29 июня 2003 года
Дата введения:
с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ
КОНЦЕНТРАЦИЙ 3БЕТА-ХОЛЕСТ-5,7-ДИЕН-3-ОЛА БЕНЗОАТА
(БЕНЗОАТА-7-ДЕГИДРОХОЛЕСТЕРИНА) И
3БЕТА-ХОЛЕСТ-5-ЕН-3-ОЛА
БЕНЗОАТА (БЕНЗОАТА ХОЛЕСТЕРИНА) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МУК 4.1.1571-03
Методические
указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии
"Научные основы гигиены труда и профпатологии". Утверждены Первым
заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, Председателем
Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию,
Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко в
июне 2003 г.
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия
(ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методика контроля
вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны.
Общие санитарно-гигиенические требования".
Методика
выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически
аттестована и дает возможность контролировать концентрации химических веществ
на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН
2.2.5.686-98 "Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в
воздухе рабочей зоны" и ГН 2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные
уровни воздействия (ОБУВ) вредных веществ в воздухе рабочей зоны".
Структурная формула
не приводится.
C H
O М. м. 488,76
34 48 2
Бензоат
7-дегидрохолестерин.
Структурная формула не приводится.
C H O
34 50
2 М. м. 490,78
Бензоат
холестерина.
Бензоат
7-дегидрохолестерин - белый кристаллический порошок без запаха и вкуса.
Температура плавления - 134 °C. Растворим в жирах и органических растворителях,
нерастворим в воде.
В воздухе находится
в виде аэрозоля.
Бензоат
7-дегидрохолестерин является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим
действием на кожу и слизистые оболочки глаз кроликов. Обладает специфическим
влиянием на липидный обмен.
ПДК бензоата
7-дегидрохолестерина в воздухе - 1 мг/куб. м. 3 класс опасности.
Бензоат холестерина
- белый кристаллический порошок без запаха и вкуса. Температура плавления - 147
°C. Растворим в жирах и органических растворителях, нерастворим
в воде.
В воздухе находится
в виде аэрозоля.
Бензоат холестерина
является малотоксичным веществом, не обладает раздражающим действием на кожу и
слизистые оболочки глаз кроликов. Специфическое влияние на липидный обмен менее
выражено.
ПДК бензоата
холестерина в воздухе - 4 мг/куб. м. 3 класс опасности.
Характеристика
метода
Определение
основано на образовании окрашенного комплексного соединения при взаимодействии
холестерина с уксусным ангидридом и серной кислотой в хлороформе с последующим
фотометрическим измерением продукта реакции при длине волны 675 нм.
Отбор проб проводят
с концентрированием на фильтр.
Нижний предел
измерения содержания бензоата 7-дегидрохолестерина в анализируемом объеме
раствора - 40 мкг.
Нижний предел
измерения бензоата 7-дегидрохолестерина в воздухе - 0,5 мг/куб. м (при отборе
80 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций бензоата 7-дегидрохолестерина в воздухе от 0,5 до 10,0 мг/куб. м.
Определению не
мешают: остаточные количества органических растворителей; мешают: холестерин и
бензоат холестерина.
Нижний предел
измерения содержания бензоата холестерина в анализируемом объеме раствора - 80
мкг.
Нижний предел
измерения бензоата холестерина в воздухе - 2 мг/куб. м (при отборе 40 л
воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций бензоата холестерина в воздухе от 2 до 20 мг/куб. м.
Определению не
мешают: остаточные количества органических растворителей; мешают: холестерин и
бензоат 7-дегидрохолестерин.
Суммарная
погрешность измерения не превышает +/- 20%.
Приборы,
аппаратура, посуда
Спектрофотометр
Specord M-40, Carl Zess.
Весы аналитические
ВЛА-200, ГОСТ 24104-88Е.
Аспирационное
устройство, модель 822, ТУ 64-1-862-82.
Колбы мерные
вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
Пипетки
вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл, ГОСТ 29227-91.
Пробирки
колориметрические с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ 25336-82Е.
Бюксы вместимостью
10 мл, ГОСТ 7148-70.
Роторный испаритель
ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Колбы грушевидные
вместимостью 25 мл, ГОСТ 9737-70.
Воронки химические,
ГОСТ 86-13-75.
Баня водяная
лабораторная, МРТУ 64-186-23-68.
Стеклянные палочки.
Реактивы,
растворы, материалы
Бензоат
7-дегидрохолестерин, СТП 0431-507-92.
Бензоат
холестерина, содержание основного вещества не менее 99,0%.
Спирт этиловый,
ректификат, ГОСТ 5963-67, 95% и в смеси с хлороформом в соотношении 3:2.
Кислота серная,
ГОСТ 4204-77, хч, 1 н раствор.
Хлороформ, ГОСТ
215-74, хч.
Уксусный ангидрид,
ГОСТ 5815-77, ч.
Стандартный раствор
N 1 бензоата 7-дегидрохолестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят
растворением 0,1400 г вещества в смеси этанол - хлороформ (3:2) в мерной колбе
вместимостью 100 мл. Раствор устойчив в течение недели при хранении в
холодильнике.
Стандартный раствор
N 2 с концентрацией бензоата 7-дегидрохолестерина 200 мкг/мл готовят
соответствующим разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол -
хлороформ (3:2). Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
Стандартный раствор
N 1 бензоата холестерина концентрацией 1000 мкг/мл готовят растворением 0,1000
г вещества в смеси этанол - хлороформ (3:2) в мерной колбе вместимостью 100 мл.
Раствор устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
Стандартный раствор
N 2 с концентрацией бензоата холестерина 200 мкг/мл готовят соответствующим
разбавлением стандартного раствора N 1 смесью этанол - хлороформ (3:2). Раствор
устойчив в течение недели при хранении в холодильнике.
Фильтры АФА-ВП-10,
ТУ 85-743-80.
Отбор проб
воздуха
Воздух с объемным
расходом 10 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ВП-10. Для измерения 1/2 ПДК
бензоата 7-дегидрохолестерина следует отобрать 80 л воздуха, для измерения 1/2
ПДК бензоата холестерина - 40 л воздуха.
Подготовка
к измерению
Градуировочные
растворы (устойчивы в течение 7 часов) готовят согласно таблице.
Таблица
ШКАЛА
ГРАДУИРОВОЧНЫХ РАСТВОРОВ
БЕНЗОАТА
7-ДЕГИДРОХОЛЕСТЕРИНА
┌────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│ N
Стандартный Этанол - Содержание бензоата │
│стандарта
раствор N 2, хлороформ 7-дегидрохолестерина в │
│ мл (3:2), мл градуировочном растворе, мкг│
├────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│ 1
0,00 5,00 0 │
│ 2
0,20 4,80 40 │
│ 3
0,40 4,60 80 │
│ 4
0,80 4,20 160 │
│ 5
1,60 3,40 320 │
│ 6
3,20 1,80 640 │
│ 7
4,00 1,00 800 │
└────────────────────────────────────────────────────────────────┘
Таблица
ШКАЛА
ГРАДУИРОВОЧНЫХ РАСТВОРОВ БЕНЗОАТА ХОЛЕСТЕРИНА
┌────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│ N
Стандартный Этанол - Содержание бензоата │
│стандарта
раствор N 2, хлороформ холестерина в градуировочном│
│ мл (3:2), мл растворе, мкг │
├────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│ 1
0,00 5,00 0 │
│ 2
0,40 4,60 80 │
│ 3
0,80 4,20 160 │
│ 4
1,20 3,80 240 │
│ 5
1,60 3,40 320 │
│ 6
3,20 1,80 640 │
│ 7
4,00 1,00 800 │
└────────────────────────────────────────────────────────────────┘
Градуировочные
растворы перемешивают, затем переносят в грушевидные колбы и упаривают досуха
под вакуумом при температуре водяной бани 60 - 70 °C. Сухой остаток растворяют
в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл уксусного ангидрида и 0,1 мл
концентрированной серной кислоты и перемешивают. Через 20 минут после стояния
пробирок в темном месте проводят фотометрирование.
Измеряют оптическую
плотность полученных растворов при длине волны 675 нм. Измерения проводят в
кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм по отношению к контрольной пробе, не
содержащей определяемого вещества (раствор N 1 по таблице).
Строят
градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей
градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины
содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
Проверка
градуировочного графика проводится 1 раз в 3 месяца или в случае использования
новой партии реактивов.
Проведение
измерения
Фильтр с отобранной
пробой переносят в бюкс,
заливают 5 мл растворителя (смеси этанол - хлороформ в соотношении 3:2) и
оставляют на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего
растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень
десорбции бензоата 7-дегидрохолестерина с фильтра - 96%, а бензоата холестерина
- 96,7%.
Раствор переносят в
грушевидную колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре водяной бани
60 - 70 °C. Сухой остаток растворяют в 4 мл хлороформа, добавляют по 1 мл
уксусного ангидрида и 0,1 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают.
Через 20 минут после стояния пробирок в темном месте проводят фотометрирование.
Оптическую плотность полученных растворов пробы измеряют аналогично
градуировочным растворам по сравнению с контролем, который готовят одновременно
и аналогично пробе, используя чистый фильтр.
Количественное
определение содержания веществ (в мкг) в анализируемой пробе проводят по
предварительно построенному градуировочному графику.
Расчет
концентрации
Концентрацию
веществ "C" в воздухе (в мг/куб. м) вычисляют по формуле:
a
C = -,
V
где:
a - содержание
вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному
графику, мкг;
V - объем воздуха,
отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л
(см. Приложение 1).
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле:
V x (273 + 20) x P
t
V = -------------------,
20 (273 + t) x 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
P - барометрическое давление,
кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.
ст.);
t -
температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
Для удобства
расчета V следует
пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха
к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТЫ
ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ
УСЛОВИЯМ
┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│
°C │ Давление
P, кПа/мм рт. ст. │
│
├─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│ │97,33/ 97,86/ 98,4/ 98,93/ 99,46/ 100/ 100,53/ 101,06/ 101,33/ 101,86/│
│ │730 734
738 742 746
750 754 758
760 764
│
├────┼─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│-30
│1,1582 1,1646 1,1709 1,1772 1,1836 1,1899 1,1963 1,2026
1,2058 1,2122 │
│-26
│1,1393 1,1456 1,1519 1,1581 1,1644 1,1705 1,1768 1,1831
1,1862 1,1925 │
│-22
│1,1212 1,1274 1,1336 1,1396 1,1458 1,1519 1,1581 1,1643
1,1673 1,1735 │
│-18
│1,1036 1,1097 1,1158 1,1218 1,1278 1,1338 1,1399 1,1460
1,1490 1,1551 │
│-14
│1,0866 1,0926 1,0986 1,1045 1,1105 1,1164 1,1224 1,1284
1,1313 1,1373 │
│-10
│1,0701 1,0760 1,0819 1,0877 1,0986 1,0994 1,1053 1,1112
1,1141 1,1200 │
│-6 │1,0540 1,0599 1,0657 1,0714 1,0772
1,0829 1,0887 1,0945 1,0974
1,1032 │
│-2 │1,0385 1,0442 1,0499 1,0556 1,0613
1,0669 1,0726 1,0784 1,0812
1,0869 │
│0 │1,0309 1,0366 1,0423 1,0477 1,0535
1,0591 1,0648 1,0705 1,0733
1,0789 │
│+2 │1,0234 1,0291 1,0347 1,0402 1,0459
1,0514 1,0571 1,0627 1,0655
1,0712 │
│+6 │1,0087 1,0143 1,0198 1,0253 1,0309
1,0363 1,0419 1,0475 1,0502
1,0557 │
│+10
│0,9944 0,9999 0,0054 1,0108 1,0162 1,0216 1,0272 1,0326
1,0353 1,0407 │
│+14
│0,9806 0,9860 0,9914 0,9967 1,0027 1,0074 1,0128 1,0183
1,0209 1,0263 │
│+18
│0,9671 0,9725 0,9778 0,9830 0,9884 0,9936 0,9989 1,0043
1,0069 1,0122 │
│+20
│0,9605 0,9658 0,9711 0,9783 0,9816 0,9868 0,9921 0,9974
1,0000 1,0053 │
│+22
│0,9539 0,9592 0,9645 0,9696 0,9749 0,9800 0,9853 0,9906
0,9932 0,9985 │
│+24
│0,9475 0,9527 0,9579 0,9631 0,9683 0,9735 0,9787 0,9839
0,9865 0,9917 │
│+26
│0,9412 0,9464 0,9516 0,9566 0,9618 0,9669 0,9721 0,9773
0,9799 0,9851 │
│+28
│0,9349 0,9401 0,9453 0,9503 0,9555 0,9605 0,9657 0,9708
0,9734 0,9785 │
│+30
│0,9288 0,9339 0,9391 0,9440 0,9432 0,9542 0,9594 0,9645
0,9670 0,9723 │
│+34
│0,9167 0,9218 0,9268 0,9318 0,9368 0,9418 0,9468 0,9519
0,9544 0,9595 │
│+38
│0,9049 0,9099 0,9149 0,9199 0,9248 0,9297 0,9347 0,9397
0,9421 0,9471 │
└────┴─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┘