Утверждаю
Главный
государственный
санитарный врач
Российской
Федерации
Г.Г.ОНИЩЕНКО
29 июня 2003 года
Дата введения:
с момента
утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ
S-[2][(4-АМИНО-2-МЕТИЛ-5-
ПИРИМИДИНИЛ)МЕТИЛ[ФОРМИЛАМИНО]-1-[2-(ФОСФОНОКСИ)ЭТИЛ]-1-
ПРОПЕНИЛОВЫЙ ЭФИР ФЕНИЛКАРБОТИОНОВОЙ КИСЛОТЫ
(БЕНФОТИАМИНА)
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ
ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
МУК 4.1.1519-03
Методические
указания подготовлены коллективом специалистов в рамках Проблемной Комиссии
"Научные основы гигиены труда и профпатологии".
Утверждены Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации,
Председателем Комиссии по государственному санитарно-эпидемиологическому
нормированию, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации
Г.Г. Онищенко в июне 2003 г.
Методические
указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны
(сборник 37) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно
допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия
(ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при
осуществлении санитарного контроля.
Методика контроля
вредных веществ в воздухе рабочей зоны разработана и подготовлена в
соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 ССБТ "Воздух рабочей зоны.
Общие санитарно-гигиенические требования".
Методика
выполнена с использованием современных методов исследования, метрологически аттестована и дает возможность
контролировать концентрации химических веществ на уровне и меньше их ПДК и ОБУВ
в воздухе рабочей зоны, установленных в ГН 2.2.5.686-98 "Предельно
допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны" и ГН
2.2.5.687-98 "Ориентировочные безопасные уровни воздействия (ОБУВ) вредных
веществ в воздухе рабочей зоны".
Структурная формула
не приводится.
C H N O
SP
19 23 4 6
М. м. 466,5.
Бенфотиамин - белый кристаллический порошок со слабым запахом, с температурой
плавления 170 °C (с разложением). Плохо растворим в воде, мало
растворим в 95% спирте, растворим в 1% растворе натрия гидроксида,
ледяной уксусной кислоте, умеренно растворим в метаноле.
В воздухе находится
в виде аэрозоля и паров.
Бенфотиамин не обладает местнораздражающим действием на
кожу, однако проявляет слабое раздражающее действие на слизистые оболочки глаз.
ОБУВ в воздухе
рабочей зоны - 0,1 мг/куб. м.
Характеристика
метода
Методика основана
на применении высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.
Отбор проб
проводится с концентрированием на фильтр и в 90% метанол.
Нижний предел
измерения в хроматографируемом объеме (10 мкл) - 0,025 мкг.
Нижний предел
измерения в воздухе - 0,05 мг/куб. м (при отборе 50 л воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций вещества в воздухе от 0,05 до 0,6 мг/куб. м.
Определение
избирательно на стадиях сушки, просеивания, хранения и фасовки вещества.
Определению не
мешают остаточные количества растворителей.
Суммарная
погрешность измерения не превышает +/- 20%.
Время выполнения
измерения, включая отбор проб, - 2 часа.
Приборы,
аппаратура, посуда
Жидкостный
хроматограф высокого давления "Милихром-1" или другой модели с УФ-детектором.
Хроматографическая
колонка размером 64 x 2
мм, заполненная
сорбентом "Силасорб С ".
18
Весы лабораторные
ВЛА-200 2-го кл., ГОСТ 24104-88Е.
Аспирационное
устройство, ГОСТ 17.2.6.01-86.
Фильтродержатели, ТУ 95-72-05-77.
Колбы мерные
вместимостью 25, 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74Е.
Пипетки
вместимостью 1, 2, 5 мл, ГОСТ 29227-91.
Пробирки
колориметрические с пришлифованными пробками вместимостью 10 мл, ГОСТ
25336-82Е.
Поглотительные
приборы Рыхтера 7Р, ТУ 25-11-1081-75.
Воронки химические
диаметром 30 мм, ГОСТ 25336-82Е.
Вакуумная установка
или роторный испаритель ИР-1, ТУ 25-11-917-74.
Секундомер, ГОСТ
5072-97.
Линейка
измерительная металлическая, ГОСТ 8309-75.
Лупа измерительная
ЛИ-3-10Х, ГОСТ 8309-75.
pH-метр ЭВ-74.
Водяная баня, ТУ
64-1-2850-76.
Дистиллятор, ТУ
61-1-721-79.
Реактивы,
растворы, материалы
Бенфотиамин, ФС 42-2379-85.
Метиловый спирт,
ГОСТ 6995-77, 90% раствор.
Ортофосфорная
кислота, ГОСТ 6552-80.
Элюент: к 100 мл
90% спирта метилового добавляют около 0,2 мл ортофосфорной кислоты до pH 2,8.
Стандартный раствор
N 1 с концентрацией 500 мкг/мл бенфотиамина готовят
растворением 0,0500 г вещества в 90% метаноле в мерной колбе вместимостью 100
мл. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.
Стандартный раствор
N 2 с концентрацией 20 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного
раствора N 1 90% метанолом. Раствор устойчив в течение двух недель при хранении
в холодильнике.
Градуировочные растворы с концентрацией 0,5-1-2-3-4-6 мкг/мл готовят соответствующим
разбавлением стандартного раствора N 2 90% метанолом. Растворы применяют свежеприготовленными.
5 мл градуировочных стандартных растворов, что соответствует
2,5-5-10-15-20-30 мкг бенфотиамина, переносят в
грушевидные колбы и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 °C.
Сухой остаток растворяют в 1,0 мл элюента и хроматографируют.
Фильтр АФА-ХА-10,
ТУ 95-743-80.
Отбор пробы
воздуха
Воздух с объемным
расходом 5 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХА-10 и
поглотительный сосуд Рыхтера 7Р, содержащий 10 мл 90%
метанола. Поглотительный сосуд охлаждают смесью льда с хлористым натрием. Для
измерения 1/2 ОБУВ следует отобрать 50 л воздуха.
Пробы хранят в закрытых сосудах в течение суток в холодильнике.
Подготовка
к измерению
Хроматографическая колонка промышленного изготовления.
Инжектируют в
хроматограф от 0,025 до 0,3 мкг бенфотиамина из градуировочных растворов при максимальном объеме вводимой
пробы 10 мкл.
Условия хроматографирования градуировочных
смесей и анализируемых проб:
Температура термостата колонки 20 °C
Скорость подачи элюента 50 мкл/мин.
Чувствительность измерения детектора 1,6
Длина волны УФ-детектора 240 нм
Скорость движения диаграммной ленты 180 мм/мин.
Диапазон измерения самописца 100 мВ
Максимальный объем вводимой пробы 10 мкл
Время удерживания бенфотиамина 4 мин. 33 сек.
На основании
полученных хроматограмм строят градуировочный
график, выражающий зависимость площади пиков (кв. мм) от количества вещества в хроматографируемом объеме пробы (мкг).
Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем
по 6 точкам, выполняя 5 параллельных измерений для каждого раствора. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении
условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.
Проведение
измерения
Фильтр и содержимое
поглотительного сосуда помещают в колориметрическую пробирку с пришлифованной
пробкой, доводят объем до 10 мл 90% метанолом и оставляют при комнатной
температуре на 15 минут, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего
растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают и удаляют. Степень
десорбции вещества с фильтра - 96%. Полученный раствор сливают в грушевидную
колбу и упаривают досуха под вакуумом при температуре 50 - 60 °C. Сухой остаток
растворяют в 1,0 мл спирта метилового 90%, подкисленного кислотой ортофосфорной
до pH 2,8.
Параллельно с
анализом проб проводят хроматографирование раствора,
полученного обработкой чистого фильтра.
Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к
тому же элюенту, что и при построении градуировочного
графика.
Количественное
содержание бенфотиамина (в мкг) в хроматографируемом
объеме проводят по предварительно построенному градуировочному
графику.
Расчет
концентрации
Концентрацию бенфотиамина (C, мг/куб. м) в воздухе вычисляют по формуле:
a x B
C = -----,
б x V
где:
a - количество
вещества в хроматографируемом объеме пробы, найденное
по градуировочному графику, мкг;
б - хроматографируемый объем пробы, взятый
для анализа, мл;
B - общий объем
раствора пробы, мл;
V - объем воздуха,
отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (Приложение 1).
Методические
указания разработаны ВНЦ БАВ, г. Москва.
Приложение 1
Приведение объема
воздуха к стандартным условиям проводят по следующей формуле:
V x (273 + 20) x P
t
V = -------------------,
20 (273 + t) x 101,33
где:
V - объем воздуха, отобранный для анализа, л;
t
P - барометрическое давление,
кПа (101,33 кПа = 760 мм рт.
ст.);
t -
температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
Для удобства
расчета V следует
пользоваться таблицей
20
коэффициентов (Приложение 2). Для приведения воздуха
к стандартным
условиям надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
Приложение
2
КОЭФФИЦИЕНТЫ
ДЛЯ ПРИВЕДЕНИЯ ОБЪЕМА ВОЗДУХА
К СТАНДАРТНЫМ
УСЛОВИЯМ
┌────┬─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┐
│
°C │ Давление
P, кПа/мм рт. ст. │
│
├─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│ │97,33/ 97,86/ 98,4/ 98,93/ 99,46/ 100/ 100,53/ 101,06/ 101,33/ 101,86/│
│ │730 734
738 742 746
750 754 758
760 764 │
├────┼─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┤
│-30
│1,1582 1,1646 1,1709 1,1772 1,1836 1,1899 1,1963 1,2026
1,2058 1,2122 │
│-26
│1,1393 1,1456 1,1519 1,1581 1,1644 1,1705 1,1768 1,1831
1,1862 1,1925 │
│-22
│1,1212 1,1274 1,1336 1,1396 1,1458 1,1519 1,1581 1,1643
1,1673 1,1735 │
│-18
│1,1036 1,1097 1,1158 1,1218 1,1278 1,1338 1,1399 1,1460
1,1490 1,1551 │
│-14
│1,0866 1,0926 1,0986 1,1045 1,1105 1,1164 1,1224 1,1284
1,1313 1,1373 │
│-10
│1,0701 1,0760 1,0819 1,0877 1,0986 1,0994 1,1053 1,1112
1,1141 1,1200 │
│-6 │1,0540 1,0599 1,0657 1,0714 1,0772
1,0829 1,0887 1,0945 1,0974
1,1032 │
│-2 │1,0385 1,0442 1,0499 1,0556 1,0613
1,0669 1,0726 1,0784 1,0812
1,0869 │
│0 │1,0309 1,0366 1,0423 1,0477 1,0535
1,0591 1,0648 1,0705 1,0733
1,0789 │
│+2 │1,0234 1,0291 1,0347 1,0402 1,0459
1,0514 1,0571 1,0627 1,0655
1,0712 │
│+6 │1,0087 1,0143 1,0198 1,0253 1,0309
1,0363 1,0419 1,0475 1,0502
1,0557 │
│+10
│0,9944 0,9999 0,0054 1,0108 1,0162 1,0216 1,0272 1,0326
1,0353 1,0407 │
│+14
│0,9806 0,9860 0,9914 0,9967 1,0027 1,0074 1,0128 1,0183
1,0209 1,0263 │
│+18
│0,9671 0,9725 0,9778 0,9830 0,9884 0,9936 0,9989 1,0043
1,0069 1,0122 │
│+20
│0,9605 0,9658 0,9711 0,9783 0,9816 0,9868 0,9921 0,9974
1,0000 1,0053 │
│+22
│0,9539 0,9592 0,9645 0,9696 0,9749 0,9800 0,9853 0,9906
0,9932 0,9985 │
│+24
│0,9475 0,9527 0,9579 0,9631 0,9683 0,9735 0,9787 0,9839
0,9865 0,9917 │
│+26
│0,9412 0,9464 0,9516 0,9566 0,9618 0,9669 0,9721 0,9773
0,9799 0,9851 │
│+28
│0,9349 0,9401 0,9453 0,9503 0,9555 0,9605 0,9657 0,9708
0,9734 0,9785 │
│+30
│0,9288 0,9339 0,9391 0,9440 0,9432 0,9542 0,9594 0,9645
0,9670 0,9723 │
│+34
│0,9167 0,9218 0,9268 0,9318 0,9368 0,9418 0,9468 0,9519
0,9544 0,9595 │
│+38
│0,9049 0,9099 0,9149 0,9199 0,9248 0,9297 0,9347 0,9397
0,9421 0,9471 │
└────┴─────────────────────────────────────────────────────────────────────────┘